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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二层,第三层,第四层,第五层,2021/3/2,*,*,第一次实验 细菌的形态和结构观察,介绍实验室有关的内容,实验内容,实验小结,22896337,2021/3/2,1,学习要求,1、初步了解病原生物学和免疫学实验,技术的概念和内容;,2、熟悉病原生物学实验室的注意事项;,3、掌握显微镜的使用和保护方法;,4、掌握细菌的基本形态和特殊结构;,5、掌握细菌的革兰染色法;,6、了解细菌的运动特点。,2021/3/2,2,介绍实验室有关的内容,1、总论,微生物,实验,寄生虫,实验,免疫学技术,2、实验室注意事项,评分标准,清洁卫生,操作规程,显微镜管理等,2021/3/2,3,实验内容,1、显微镜使用和保护(,录像,),2、细菌的,镜下形态,观察(学生操作),3、细菌的,特殊结构,(学生操作),4、,革兰染色,(学生操作),5、细菌的动力观察,录像,(教师示教),2021/3/2,4,2021/3/2,5,实验小结,1、显微镜油镜的使用和保护,2、细菌的基本形态,球菌 杆菌 螺形菌,3、细菌的特殊结构,荚膜 鞭毛 芽胞 菌毛,4,、细菌的革兰染色法,5、注意事项:,评分、卫生、操作、管理。,2021/3/2,6,end,2021/3/2,7,细菌的基本形态观察(发片),1、球菌镜下形态:,葡萄球菌,链球菌,肺炎链球菌,脑炎奈瑟菌,2、杆菌镜下形态:,大肠埃希菌,破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,变形杆菌,3、螺形菌革兰染色片:,霍乱弧菌,或水弧菌,2021/3/2,8,细菌的特殊结构(示教片),1,肺炎球菌,荚膜,染色,示教片(示,荚膜,),2,变形杆菌鞭毛染色,示教片(示,鞭毛,),3,破伤风梭菌芽胞染色或革兰染色,示教片(示,芽胞,),2021/3/2,9,细菌的革兰染色,革兰染色法是细菌检验中最常用的一种染色法。利用革兰染色法,可将细菌分为两大类,有助于鉴别细菌和选择用药等。,1、革兰染色法原理,2、,革兰染色法,操作步骤,3、,革兰染色,结果,通过革兰染色可以观察到什么?,细菌的形态、排列、,荚膜、芽胞,2021/3/2,10,革兰阴性菌,因其细胞壁中肽聚糖含量少,结构疏松,脂类物质含量高而被酒精脱色,经复染呈红色。,革兰染色,原理:,革兰阳性菌,因细胞壁中含有大量的肽聚糖和磷壁酸,且结构致密,可保留结晶紫与碘的复合物,并不被酒精脱色而显示为紫蓝色。,2021/3/2,11,革兰染色方法(,录像,),涂片,自然干燥,火焰固定,染色,染色过程:,已固定的涂片,加结晶紫,1分钟,水冲洗,滴加碘液,1分钟,水冲洗,95%酒精,2030秒,稀释石炭酸复红,1分钟,水冲洗,待干镜检,初染,媒染,脱色,复染,一般用室温干燥,注意必须完全干燥后方可固定。,涂片在酒精灯火焰上快速通过 34次以固定细菌,并使其不易从玻片上脱落。注意不要将涂片直接放在火焰上烤,以免破坏细菌结构。,2021/3/2,12,用灭菌的接种环取无菌生理盐水1-2环,置于玻片中。接种环灭菌,待接种环,冷却后,,挑取适量培养物混合于盐水中,涂抹均匀使成一层薄膜(若检材是液体则不必加生理盐水),薄膜涂抹的面积约1.52.0 cm,。按上法制备大肠杆菌涂膜。,2021/3/2,13,2021/3/2,14,葡萄球菌(革兰染色),2021/3/2,15,葡萄球菌(革兰染色),2021/3/2,16,葡萄球菌电镜照片,2021/3/2,17,链球菌(革兰染色),2021/3/2,18,链球菌(革兰染色),2021/3/2,19,链球菌电镜照片,2021/3/2,20,奈瑟菌(革兰染色),2021/3/2,21,双球菌(革兰染色),2021/3/2,22,双球菌电镜照片,2021/3/2,23,大肠埃希菌,(,革兰染色),2021/3/2,24,大肠埃希菌,(革兰染色),2021/3/2,25,大肠埃希菌,电镜照片,2021/3/2,26,霍乱弧菌(革兰染色),霍乱,弧菌电镜照片,2021/3/2,27,荚膜 荚膜,2021/3/2,28,荚膜,2021/3/2,29,荚膜,2021/3/2,30,变形杆菌鞭毛染色(示鞭毛),2021/3/2,31,变形杆菌鞭毛电镜照片(示鞭毛),2021/3/2,32,破伤风梭菌(示芽胞),革兰染色和芽胞染色,2021/3/2,33,破伤风梭菌芽胞染色(示芽胞),2021/3/2,34,破伤风梭菌革兰染色(示芽胞),2021/3/2,35,破伤风梭菌芽胞电镜照片(示芽胞),2021/3/2,36,产气荚膜梭菌革兰染色(示荚膜),2021/3/2,37,2021/3/2,38,2021/3/2,39,2021/3/2,40,2021/3/2,41,霍乱弧菌(革兰染色),霍乱,弧菌电镜照片,2021/3/2,42,2021/3/2,43,2021/3/2,44,2021/3/2,45,1、实验时不迟到、不早退。,2、实验时要保持实验室内的整洁、安静。,3、正确使用显微镜,观察完毕应把镜头和载玻片上的镜油擦净。,4、各实验小组的实验用品、由各组保管使用,不得随意与他组调换或挪用。如需补发或增添,应说明原因。,5、每次实验后应清点实验器材、用品数量,如有遗失或损坏应按规定赔偿。动物及标本要按规定处理,不可擅自拿走。,6、实验结束后,各组应自觉清理实验器材,值日生做好全室清洁工作,关好门窗、水电,经指导教师检查合格后方可离开实验室。,1、要按时完成实验报告。,2、实验报告要保证准确、工整、美观。,3、实验课结束要将实验报告交病原生物学实验室评分存档。,1、操作考核。,2、大体标本考核。,3、镜下标本考核。,病原生物学与医学免疫学实验是独立计分的学科,总评分为100分(平时成绩40分+考核成绩60分),1、平时成绩40分(其中平时表现占40%,实验报告占60%),2、实验考核60分(其中操作考核占25%,标本考核占75%),2021/3/2,46,
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