检验的临床应用.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,检查医学的临床应用,走近临床实验室,检查科专业分类,检查医学概述,项目选择,解释,开医嘱,标本,准备标本,测定,报告,计算,准备病人,检查医学全流程图,对医生的建议,合理选择检查项目并知晓其办法及特点,与实验室沟通并合作，确保精确、快速,时机的把握,病人的准备,严格监督标本的采集（SOPs）,客观评价检查成果,循证检查医学（EBLM）,是循证医学(evidencebased medicine)的一种分支。是在大量可靠的临床应用资料和经验的基础上（即证据）研究检查项目临床应用的价值，为临床诊疗、疗效观察、病情转归提供有效、实用、经济的检测项目及其组合。及为临床合理应用提供指导意见。,实验办法分级,推荐常规使用,精密，准确，特异,c.,常规,鉴定常规，质控定值,标定，干扰少，结果可靠,b.,参考,标准品，参考方法评价,准确，误差小，接近真值,a.,决定性,用途,特点,分类,金 标 准,“金原则”重要指活体组织检查、病原学检查、细胞学检查、特殊影像诊疗、长久随访及临床医学专家共同制订的公认的综合诊疗原则。,四格表的排列,-假阴性(,FN),真阴性(,TN)FN+TN,有病 无病 合计,合计,TP+FN FP+TN TP+FN+FP+TN,试验,诊断性 +真阳性(,TP),假阳性(,FP)TP+FP,金原则,实验办法评价的有关指标,敏感性=（,TP/（TP+FN）,100%,特异性=（,TN/（TN+FP）,100%,阳性预测值=,TP/（TP+FP）,100%,阴性预测值=,TN/（TN+FN）,100%,实验办法选择,筛查：敏感性高的项目，避免假阴性,诊疗：特异性高的项目，避免假阳性,对的认识正常参考值,阅读检查成果时，需要判断正常与否,其参考就是“参考值”,过去习惯称为“正常值”,由于“参考值”是统计学成果,应当用统计学的观点来看待,抽样的代表性、检查的办法学,对的认识正常参考值,入选人群测试成果多数呈正态分布,参考值范畴普通为“平均值 1.96SD”即涉及95%的测试成果,5%的入选人群被视为异常,参考值内外都有生理和病理的可能，只是概率大小而已,不可过分依赖和机械使用“参考值”,个体差别,任何检查项目均存在个体差别,在参阅检查成果时应充足考虑,由此，个体化实验诊疗显得非常重要,WBC,靶值,6%,RBC,靶值,6%,Hb,靶值,7%,Hct,靶值,6%,PLT,靶值,25%,美国CLIA88对检查项目重复性的规定,PT,靶值,15%,APTT,靶值,15%,Fig,靶值,20%,美国CLIA88对检查项目重复性的规定,检查时机的把握,不同的指标所出现的病程期不尽相似,急性心梗的酶谱在发病2h内或3d后检测，阳性率大大减少,急性胰腺炎时，淀粉酶普通在发病6-12h升高，持续3-5d；脂肪酶则晚于淀粉酶，持续时间较长10-14d,而急性出血性坏死性胰腺炎无酶学的变化,AMI,酶变化,检查时机的把握,不同的指标所出现的病程期不尽相似,细菌性感染，1-2d内可见白细胞计数和C反映蛋白升高，而ESR变化需要5-7天。,本身抗体检测应在激素使用前,细菌培养尽量在抗生素使用前,标本因素对成果的影响,静脉采血时，止血带使用时间过长,一分钟开始蛋白浓度开始升高,3-5分钟约升高5%,10-15分钟高达15%左右,标本因素对成果的影响,采血时应嘱咐病人不要过分紧张,采血时握拳可造成血钾增高,握拳一分钟可使血钾增高1.0-1.5mmol/L,文献支持：,Don et al.N Engl J Med 1989,322:1291,标本因素对成果的影响,检测项目涉及静脉予以的物质时应注意,5%的右旋糖中葡萄糖浓度为5000 mg/dl,体内普通为100 mg/dl,内置导管常使用肝素，这种状况采血进行凝血实验成果显然不可靠,一边输液一边采血，既可能被污染又可能被稀释,解决方法：在采血前几分钟停止输液,标本因素对成果的影响,抗凝剂的影响（污染）,不同项目有不同的保护剂或抗凝剂,试管选择错误,实验室拒收后，偶然可出现从此试管倒入另一试管的现象,如EDTA钾可使钾升高，钙、镁、CK等减少,凝血实验的标本不适宜先取,合理次序：无添加剂、少量抗凝剂、其它,疾病因素对成果的影响,血液病的影响,白细胞增高者的白细胞代谢明显高于红细胞,血小板参加凝血时，释放钾,因此，血清钾 血浆钾,正常状况两者仅差0.2-0.3mmol/L，问题不大,但血小板每增加10万/mm3，两者之差就增加0.1-0.2mmol/L,血小板及白细胞明显增高的患者建议肝素抗凝，及时送检，及时分离血浆,某些物质对成果的影响,某些药品或化学物质的影响,肌酐检测,酮症酸中毒产生的酮体涉及乙酰乙酸,乙酰乙酸可在肌酐检测中产生交叉反映,使得肌酐检测成果假性增高，误疑急性肾衰,某些头孢菌素也有类似作用,蔬菜、肉类-潜血实验；Vc-血、尿糖下降,人为因素（为了某种目的）,生物化学检查项目的临床应用,（举例）,心梗的实验室检核对策,急诊的初步评定,初次就诊的检查成果意义有限，普通只有1/4-2/5的心梗病人出现异常成果。因此绝不能因初次成果正常而放松警惕,心梗检查的应用,需要持续检测,症状出现后6-10h标志物检出率达98-99%,肌钙蛋白、CK-MB含有相似的敏感性,如果为肌钙蛋白I则不受肌肉损伤的干扰,普通持续两次成果超出参考值即有诊疗价值,心梗的实验室检核对策,伴骨骼肌损伤的心肌梗死诊疗,心肌和骨骼肌标志物（CK、CK-MB、肌红蛋白和AST）均升高，难以鉴别诊疗,另外，骨骼肌CK的大量释放稀释了CK-MB，常出现假阴性,这时可选用肌钙蛋白检查，肌钙蛋白I优于T,心脏手术后心梗的诊疗,研究显示术后的15h内，如果CK-MB 133U/L，其对手术期心梗诊疗的敏感性为60%，特异性为100%,心梗的实验室检核对策,就诊较晚的心肌梗死诊疗（24h后）,标志物CK、CK-MB、肌红蛋白和AST等均无诊疗意义。,LDH同工酶，LDH1/LDH2 1见于30%的非Q波心梗和80%的Q波心梗，持续4-7d,肌钙蛋白可持续7-10d，较LDH同工酶更可靠,心梗检测指标的敏感性（%）变化,心梗的实验室检核对策,指标组合、持续监测、快速报告,标本规定：,CK-MB mass：2-8可保存24h，冷冻可长久保存,CK同工酶亚型：4可保存24h，不可冰冻,cTnT：4-25,24h减少 5%；-20可最少稳定3M,cTnI：2-8可保存24h，超出24h需置-20，只可一次冻融,血栓与止血项目的临床应用,（举例）,APTT,与,PT,的临床应用,APTT和PT在血栓形成时可缩短，在出血性疾病时往往延长,APTT和PT在检测高凝状态时不及检测低凝状态敏感，在分析成果时应注意,采血避免重复穿刺,采样后立刻混匀，否则易发凝块，时间假性延长,溶血可造成时间假性缩短,采血后2h内完毕检测,血栓与止血检测的注意事项,采血后标本应在15-25度保存，勿置2-8度，避免血小板被低温激活,避免使用钙离子螯合剂如EDTA等,现在，血小板聚集功效检测多依赖于光电比浊法，要避免溶血和脂血,应使用硅化试管或塑料试管,避免阿司匹林、肝素等药品的影响,D-,二聚体检测的评价,D-,二聚体是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶的特有产物,它是鉴别原发性和继发性纤溶的较好指标，血栓形成敏感性高达90-95%，特异性较差为30-40%，阳性预期值仅为30-40%，阴性预期值高达95%以上，即,D-,二聚体阴性，基本可排除血栓形成,血、尿检查项目的临床应用,（举例）,尿常规的临床应用（举例）,干化学测定白细胞的原理是：,粒细胞内的酯酶与试纸条上的吲哚酚酯作用,只能测定粒细胞，不能与淋巴细胞反映,肾移植病人发生排异反映时，以淋巴细胞为主,这类病人应以显微镜检查为准,尿常规的临床应用（举例）,干扰物对红、白细胞的影响：,标本污染甲醛，或含有高浓度的胆红素可使白细胞出现假阳性,尿蛋白5g/L，或标本中含有大剂量的庆大霉素等药品时可造成白细胞成果偏低甚至假阴性,肌红蛋白或菌尿可使红细胞成果出现假阳性,标本中含有大量Vc可使红细胞成果出现假阴性,尿常规的临床应用（举例）,干化学法尿白细胞检测与显微镜计数两者之间的对应关系很难确立，至今尚未建立起直接的换算关系,Alwall等报道高倍视野白细胞数是干化学报告（白细胞数/l）的11%,Loosyt等报道白细胞数/l是高倍视野白细胞数的10.8倍,国内报道为8.7倍,干化学法是一种筛选实验，不可取代镜检,尿常规的临床应用（举例）,细胞破坏造成的“假阴性”：,注：“假阳性”、“假阴性”是针对显微镜检查而言的,尿贮存（膀胱、环境）时间过长，细胞破坏，造成干化学阳性/镜检阴性（所谓的假阳性）,这时要结合临床综合分析、动态观察，切勿一概否认干化学办法,尿常规的临床应用（举例）,尿蛋白+，沉渣-，如何解释？,临床普通要考虑实验室有“误”,应综合考虑，客观评价,肾病综合症、肝肾综合症、妊娠后期、妊娠中毒均可有这类成果,另外，直立性蛋白尿、运动性蛋白尿等也可出现,实验室的问题，离心条件、检测办法等均可影响,尿常规的临床应用（举例）,亚硝酸盐检测,大肠、变形、铜绿等产硝酸盐还原酶，粪肠球菌则无,尿中需要存在一定量的硝酸盐,尿液在膀胱内停留4h以上,干扰因素多，单项指标意义不大,需要与其它指标联合考虑,如：亚硝酸盐+干化学WBC+显微镜，敏感性为92%，特异性为95%，阳性可提示尿路感染，但阴性不能排除,免疫学检查项目的临床应用,（举例）,肝炎标志物检查及解释,甲型肝炎病毒（HAV）,抗-HAV涉及IgA,IgG,IgM三种,抗-HAV IgM出现较早，有助于早期诊疗,抗-HAV IgG出现较晚，属于保护性抗体，是机体含有免疫力的标志,抗-HAV IgA在粪便中可检出，实验室普通不开展此项检查,肝炎标志物检查及解释,甲型肝炎病毒（HAV）,即使抗-HAV IgM可做为早期诊疗的指标，但它的出现往往迟于ALT的升高,HAV特异性诊疗指标涉及抗原检测和抗体检测两大部分,肝炎标志物检查及解释,乙型肝炎病毒（HBV）,HBV抗原涉及HBsAg,HBcAg,HBeAg三种,任何乙型肝炎均可检出HBsAg，在急性期它的检出比ALT升高早2-8周，是急性乙肝早期诊疗的指标之一,HBsAg在恢复期可消失，部分成为携带者,HBsAg只可证明曾经发生HBV感染，并不能反映病毒有无复制,肝炎标志物检查及解释,无肝炎症状而,携带,HBsAg,者的预后,多数可持续携带数年、数十年乃至终身,有的可在一段时间后转阴,出现肝炎症状和体症，肝功出现异常,极少数发展为肝硬化或肝癌,肝炎标志物检查及解释,抗-HBs（HBsAb）,属保护性抗体,普通出现在乙肝恢复期或痊愈期,乙肝疫苗接种后亦可出现,若伴有抗-HBc（HBcAb）增高提示预后不良,肝炎标志物检查及解释,HBeAg,多伴有HBsAg阳性，出现稍晚于HBsAg，但消失较早,是HBV复制和含有传染性的重要标志,持续阳性 10周病情易慢性化,多数认为几乎100%的慢性肝炎HBeAg阳性且长久持续存在,肝炎标志物检查及解释,HBeAg,阴性者常为缓和期、轻症或非活动性肝炎,与HBsAg同时阳性表明病毒复制活跃，含有高度传染性,肝炎标志物检查及解释,抗-HBe（HBeAb）,常于HBeAg转阴后出现，同时阳性者少见,不属于保护性抗体,其意义与HBeAg相反，它的出现表达病毒复制减少，传染性削弱，但并非完全无传染性,HBeAg、HBeAb阳性及AFP升高模式在原发性肝癌病例中出现频率较高,肝炎标志物检查及解释,HBcAg,HBcAg是病毒复制的体现，具传染性,它可快速与HBcAb结合，普通免疫学办法难以检出,在急慢性肝病的肝组织中，运用免疫组化办法可检测出HBcAg和HBsAg，这是一项非常敏感的判断病毒复制的办法,肝炎标志物检查及解释,抗-HBc（HBcAb）,涉及IgM和IgG两种,IgM出现早，常继HBsAg、HBeAg之后出现，在血中维持时间约6-18个月,IgM是乙肝病毒急性感染和病毒复制活跃的标志，含有高度传染性,IgG呈现高滴度表明正在感染，低滴度提示曾经感染，含有流行病学意义,HBV,血清标志物检出模式及其意义,点击可见具体内容,某些项目需要持续监测,（举例）,弥散性血管内凝血（,DIC）,检测,惯用的筛选实验是BPC、Fg、PT、FDP及D-二聚体,前三者不敏感但特异，其成果异常表明DIC已进入中、晚期,后两者虽较敏感但不十分特异,因此，整个DIC病程必须用筛选实验作持续动态观察,BPC和Fg进行性减少，FDP及D-二聚体进行性增高更具诊疗价值,血培养,普通需要持续培养三次,仅有一次的培养成果，阴性或阳性均不可靠,特别是培养出一次葡萄球菌，难以判断,金黄色葡萄球菌对喹喏酮类的耐药性观察,长久使用喹喏酮类治疗金黄色葡萄球菌感染，可由敏感很快发展为耐药。最初的分离株是敏感的，治疗3-4天后可变为耐药，应不停监测。,细菌学检查项目的临床应用,（举例）,涂片检查,特点是快速，对于危重病人意义重大,是“指南针”,对确诊报告提供参考意义,不要过分依赖、过分夸张它的作用,涂片检查重要性举例,产单核细胞李斯特菌对头孢菌素类体外实验敏感，但临床证明无效。因此应当切记：产单核细胞李斯特菌无论对头孢菌素体外敏感与否，临床报告一律应视为耐药。,由于头孢菌素经常被经验用于脑膜炎，临床细菌室应快速对标本进行涂片染色检查，同时进行培养。以最快的速度排除或高度怀疑产单核细胞李斯特菌，指导临床精确用药。,肺炎链球菌,肺炎链球菌,2002年NCCLS已将三代及四代头孢菌素针对肺炎链球菌的敏感性折点按脑膜炎和非脑膜炎分别进行了设立，如头孢吡肟、头孢噻肟和头孢曲松在脑膜炎和非脑膜炎时的敏感鉴定原则分别为MIC0.5g/ml和MIC1g/ml。,这就提示临床医生在参考药敏报告时不仅要理解肺炎链球菌对某些抗生素的敏感性，还要考虑感染的部位。,耐药菌举例,MRSA：,Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus,VRE：,Vancomycin Resistance Enterococci,HLAR：,High Level Aminoglycoside Resistance,ESBL：,Extended-Spectrum,-Lactamase,MRSA,对全部B-内酰胺类抗生素均耐药，无论体外实验成果如何，亚胺培南也不例外。,呈多重耐药,万古霉素及替考拉宁含有较高抗菌活性,HLAR,肠球菌感染的常规治疗方案涉及B-内酰胺类（如氨苄西林）与一种氨基糖苷类（如庆大霉素）联合用药。,如果对氨基糖苷类呈现高水平耐药，以上方案将无效。,VRE,VRE,有四种基因表型：,VanA、VanB、VanC,及,VanD。,VanA,表型对万古霉素及替考拉宁均呈高度耐药；,VanB,表型可对万古霉素呈现不同程度耐药，但对替考拉宁敏感；后两者,VanC,及,VanD,对万古霉素呈低水平耐药，且临床意义不大。,VRE,朝阳医院2003年住院标本检测出5株VRE,分别来自5个不同的住院病人,PFGE证明5株VRE属同源,各例已报,回想性研究，待整顿,ESBLs,对B内酰胺类的耐药可通过三种机制：,1.外膜渗入力下降和主动泵出。,2.PBPs变化。,3.产生B内酰胺酶(BLA)。,PBP的变化是革兰阳性菌耐B内酰胺类抗生素的最重要的机制，而在革兰阴性菌中BLA是最普遍和重要的。,ESBLs,它能够水解青霉素类、一、二、三代头孢菌素和氨曲南。,但头霉菌素和碳青霉烯类不受影响。,ESBLs,NCCLS建议：全部产ESBLs的菌株均应报告对全部的青霉素类、头孢菌素类和氨曲南耐药。,AmpC酶介绍,AmpC酶重要由肠杆菌属、弗劳地枸橼酸杆菌、摩根摩根菌、粘质沙雷、铜绿假单胞菌产生，最初只发现染色体介导的。,属于Bush分类中的 I 型酶。,AmpC酶介绍,典型的AmpC酶药敏谱：,耐药：青霉素、舒普深、三代头孢、氨曲南。,敏感：亚胺培南、四代头孢。,质粒介导的AmpC介绍,SSBL（DHA-1）,来源：北京朝阳医院住院病人。,时间：2001年1-12月。,种类及数量：大肠埃希菌292株；肺炎克雷伯菌212株。,国内发现的质粒介导的,AmpC,举例,2002年，协和医院发现一株产,ACT-1,型,AmpC,酶的,大肠埃希菌。,2003年，北京朝阳医院有1株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌产,DHA-1,型,AmpC,酶。,ESBLs&SSBLs,发生率,急诊报告和危机报告,（举例）,如何看待急查报告,掌握急查原则,及时查阅成果,临床生化危急值,血钾（,K）5.8,mmol/L,肌酐（,Cr）5.0mg/dl,血清肌酸激酶（,CK）,2000,U/L,血糖（,Glu）,500,mg/dl,临床细菌危急值,无菌区体液（如血液、,CSF）,培养阳性,无菌区体液涂片发现细菌,培养出,MRSA、GISA、GRSA、VRE、HLAR、PRSP、,产,ESBL,菌等,血常规检查危急值,血小板计数,50,10,9,/,L,白细胞计数,2,0,10,9,/,L,发现幼稚细胞等,如何看待危急报告,设立临床危机值,保持高度的职业敏感性,重视，统计,向上级主管医师报告或及时解决,充足体现“急”字,南方某医院1995-1999年细菌流行分布及耐药监测报告,（2000年8月来稿）,材料：1995-1999，临床多个标本分离菌。,办法：纸片法药敏实验，参考NCCLS97药敏文献，同时进行质控。,成果之一：发现11株GISA；6株GRSA。,讨论：（略）,GISA及GRSA,即使自1996年就出现了GISA，但到现在为止GISA及GRSA感染并不多见。据CDC报告：截止到2003年全球共发现GISA感染9例：Japan 1996,Michigan 1997,New Jersey 1997,New York 1998,Illinois 1999,Minnesota 2000,Nevada 2000,Maryland 2000和Ohio 2000；GRSA感染2例：Michigan 2002和Pennsylvania 2002。,检查报告单,检查报告,谢谢！,2004年 06月29日,