医学研究生开题报告医学知识.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系本人改正。,目 录,1.,课题研究背景,2.,国内外研究现状,3.,研究的目的和意义,4.,课题研究内容,5.,研究计划进度,课题研究背景,卒中后感染,(post-stroke infection，PSI),最早由Vargas等于2006年提出，Emsley和Hopkins于2008年对其做了进一步完善:是指卒中发病时无感染且不处于感染潜伏期，而在卒中,发病48 h后,发生的感染，主要包括,卒中相关性肺炎(stroke associated pneumonia,SAP),和尿路感染(urinary tract infection，UTI)。75的PSI发生在卒中,发病后72 h内,。,1V,argas M，,Stroke200637：461-465,其中急性期、神经危重症病房以及卒中单元内的患者以SAP为主，恢复期和康复病房内的患者则以UTI多见。,SA,P,发生率约为23一65，严重感染是卒中患者死亡的首要原因,。,2-4,2Chell YDEur Neurol2011.66：204209,3Chen CMAm J Phys Med Rehabil，2012，9l：211_219.,4Westcndorp WF，BMC Neurol，201111：1lO,国外定义：,临床确诊的急性卒中患者出现发热、咳嗽、呼吸困难等症状，并根据特定诊断程序而确诊的肺炎，其诊断标准参照了美国疾病控制中心对肺炎诊断的临床标准(发热、肺部听诊,、,叩诊、呼吸道脓性分泌物)、微生物学检查(支气管活检分泌物或血培养)以及胸部,X,线,/,CT表现等制定,。,5,Hilker,R,Stroke,2003,34,:,975-98,1,2010年国内专家共识：,是指原无肺部感染的卒中患者罹患感染性肺实质(含肺泡壁即广义上的肺间质)炎症。,6,6卒中相关性肺炎诊治中国专家共识组,卒中相关性肺炎诊治中国专家共识,中华内科杂志2010年12月,第49卷第12期.,课题研究背景,卒中相关性肺炎,(stroke,associated,pneumonia,，,SAP),课题研究背景,卒中相关性肺炎,病原体,肺炎克雷伯杆菌,铜绿假单胞菌,G+菌,金黄色葡萄球菌,流感嗜血杆菌,肺炎链球菌等,厌氧菌,普雷沃菌、梭状杆菌,等,不动杆菌等,G-菌,大肠杆菌,真菌、支原体、衣原体.,课题研究背景,脑卒中,免疫激活,免疫抑制,清除坏死组织,继发性组织,损伤,神经保护,感染,课题研究背景,脑卒中后免疫抑制,早在1974年，Howard和Simmons 就提出了“卒中后获得性免疫缺陷”的概念，它是指卒中发病后早期出现的对细菌感染的易感性。,7Howard RJSktrg Gynecol Obstct，1974，139：77l-782,1979年,C,zl,onkowska等报道卒中后存在,细胞介导的免疫功能受损,以来,大量的研究表明脑卒中后存在以,外周血淋巴细胞计数减少、T细胞活性受损以及致炎因子产生减少,为特点的周围免疫功能的变化。,8,C,zl,onkowska,A,J Neurol,Sci，1979，43：455,-,464,2005年,Meisel等提出了,中枢神经系统损伤诱导的免疫抑制综合征(CNS injury-induced immunodepression syndrome,CIDS),的概念,包括,脑卒中,、脑外伤、脊髓损伤等中枢神经系统病变均可出现外周免疫功能的抑制。,9,MejselC,Nat,Rev,Neurosei,2005,6(10):775一786.,2005年Meisel,等提出,脑卒中诱导的免疫抑制综合征(stroke induced inununodepression syndrome，S,I,DS),：,特征是急性卒中后出现快速和持续的细胞免疫反应抑制，主要表现为广泛的淋巴细胞凋亡和功能障碍。,9,免疫变化出现在血液和肺部可检测出细菌之前，说明细胞免疫反应抑制削弱了抗菌防御能力，进而导致细菌感染,。,课题研究背景,国,外,研究现状,时间,作者,结果,2003年,Prass等,在小鼠脑卒中模型中观察到血液、脾和淋巴结中B细胞、T细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)等免疫细胞数量减少,TNF,-,和INF,-,等细胞因子水平降低。,10,2006年,O,ffner等,观察到局灶性脑缺血可引起广泛的淋巴细胞凋亡,并促进使Th,1,向Th,2,转化的细胞因子产生以及脾脏和胸腺萎缩。,并,对脑卒中后22h及4d的小鼠进行观察发现小鼠脾细胞数量减少且功能减退;进一步研究发现脾细胞分化生成减少和凋亡增多这两个途径共同导致脾细胞数量减少。,11,2008年,Vogeigesang等,发现脑卒中后机体存在CD4+T细胞功能下,降。12,2009年,Klehmet等,观察到脑卒中后发生感染的患者早期即有明显的CD4+Th细胞数量减少,并有血浆,IL,-6水平及尿去甲肾上腺素水平升高。,13,2009年,O,ffner等,使用缺少T细胞和B细胞的转基因小鼠建立局灶性脑缺血模型,与野生型小鼠比较,存在免疫,细胞缺陷的小鼠脑梗死面积明显较小,提示在脑缺血发生后约40%的梗死损伤是T细胞或B细胞参与的结果。,14,2011年,Hug,等,在小鼠脑卒中模型,及卒中患者中均观察到,CD4+CD25+调节 T 细胞,减少及功能受抑制。15,2013年,Kleinschnitz等,在小鼠脑卒中模型,中观察到调节T细胞能够减少梗死面积并且改善卒中后24小时,神经功能。16,国,内,研究现状,时间,作者,结果,2012年,马嘉,等,在卒中患者中观察到,感染组CD3+T细胞,百,分比、CD4+T细胞百分比和C,D4,+CD8+比值均显著低于非感染组。,17,2013年,张新颜等,在卒中患者中观察到SAP组单核细胞HLA-DR表达率、淋巴细胞计数、CD3+T淋巴细胞计数、cD4+T淋巴细胞计数、CD8+T淋巴细胞计数低于非SAP组。,18,2013年,林真珍等,在大鼠脑卒中模型中观察到大鼠脑缺血后72 h，脑组织内cD3+细胞比例升高，血标本内cD3+细胞比例未见明显,升高,。,19,2013年,Qing Li等,在卒中患者中均观察到CD4+CD25+调节 T 细胞减少及Th17细胞增加。,20,课题研究背景,中性粒细胞,吞噬活性下降,NK细胞毒性下降,巨噬细胞,活性下降,B细胞减少,免疫球蛋白？,Th1 Th2,脑卒中合并肺部感染的患者和脑卒中后无合并肺部感染的患者进行血清,IgA，IgG,，C3，C反应蛋白和白蛋白测定，了解其水平与脑卒中患者合并肺部感染及脑卒中患者神经功能恢复的关系。,结果,:,肺部感染组与对照组比较，,I,gG，IgA,，白蛋白含量,降低,，C3，C,-,反应蛋白升高。,21何文贞,Chinese Journal Clinical Rehabilitation,August 7 2005 Vol.9 No.29.,课题研究背景,目前国内外尚,缺乏,观察,不同病原体,所致卒中相关性肺炎患者免疫抑制作用和机理的临床研究！,课题研究背景,研究目的和意义,研究目的：,探索,不同病原体所致,脑卒中相关性,肺炎患者免疫抑制变化,的,差异，,进一步了解脑卒中并发肺部感染的病因,。,研究意义：,对不同病原体所致,免疫低下进行,针对性,干预,，,有望降低感染的发生率,。,改善卒中的预后，降低医疗费用,！,课题研究内容,健康体检者,病程不同时期进行外周血免疫免疫细胞计数及免疫球蛋白测定,根据三组检测结果的差异，讨,论不同病原体所致,脑卒中相关性,肺炎,免疫功能,抑制,的,差异，并观察其动态变化,脑卒中非合并感染患者,脑卒中合并SAP患者,病原学诊断,细胞表面抗原,细胞名称,主要功能,T细胞抗原,CD2,总T细胞,参与细胞免疫,CD3,成熟T细胞,CD4,T辅助/诱导性细胞亚群,CD5,T细胞（B细胞亚群）,CD8,T细胞/细胞毒性细胞亚群,CD28,T细胞受体共刺激分子,CD8+/CD28+,细胞毒性T细胞,CD8+/CD28-,T抑制性细胞,CD3+/HLA-DR-,静止T细胞,B细胞抗原,CD19,全部B细胞,参与体液免疫,CD20,全部B细胞,NK细胞抗原,CD3-/CD16+56+,NK细胞,杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞,，,分泌INF-,、IL-2和TNF参与免疫调节,课题研究背景,各,免疫,细胞亚群表面抗原,技术路线,脑卒中患者,第,1,天,第,3,天,第,7,天,观察上述指标,的动态变化趋势,分析不同病原体SAP组免疫抑制差异,健康体检者,抽取外周静脉血,透射比浊法测定,免疫球蛋白,流式细胞仪,检测,CD3+Tc.、CD4+Tc.、CD8+Tc.、,CD4+CD25+Treg、,B,c.、NKc.、单核c.,样本病例选择,选取201,4,年,2,月至201,5,年,2,月在,首都医科大学,附属,北京友谊,医院神经内科住院的脑梗死患者。根据住院2周内是否发,生,感染，将患者分为感染组和非感染组。,入组标准,：,符合中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010,制定的脑卒中诊断标准,并经头部CT(或)MRI证实。,包括,病史和体征、影像学检查、实验室检查、疾病诊断和病因分型等。,排除标准:,(1),痛风、血液系统疾病、恶性肿瘤,近期曾服用过B族维生素、叶酸;,(,2,),明显的肝、肾功能障碍;,(,3,),急性心肌梗死及其他血管栓塞性疾病;,(,4,),甲亢及其他慢性消耗性疾病;,(,5,),近期感染、自身免疫性疾病、服用雌激素及2周内有外科手术或外伤,病史。,对照组,：,选择我院同期,体检,中心,体检,者,。,数据处理方法,使用,SPSS1,5,.0,统计软件进行统计分析,。,统计学方法,：,数据以均数,标准差,（x,s,）,表示,，,采用,t,检验,。,P0.05,统计学有显著差异,。,质量控制方法,对选取研究对象及标本的一线工作人员进行统一培训,研究数据及时计入工作手册,及时制订修改研究方案、工作手册、研究进度表等,课题可行性分析,研究对象选取：,脑卒中病人入院后，第一时间筛查入组,标本检测：,外周血免疫球蛋白,病房化验室 免疫球蛋白+补体,外周血,CD3+Tc.、CD4+Tc.、CD8+Tc.、CD19+,B,c.、NKc.,病房化验室 T、B淋巴细胞亚群,单核c.,病房化验室 血常规,CD4+CD25+Treg,实验室流式细胞仪检测,研究计划进度,课题设计,开题考核,实验准备;,201,4,.2,选取研究对象,抽血化验，,完成相关检测，,数据统计,;,201,4,.3,2014,.2,数据分析整理,论文撰写,答辩阶段;,201,5,.3201,5,.5,参 考 文 献,1Vargas M，Horcajada JP，Obach V，et a1Clinical consequences of infection in patients with acute stroke：is it prime time for further antibiotic,trials?Stroke200637：461-465,2Chell YDSJSun FH，ct a1Monitoring of medical complications after acute ischeaic stroke in aneurological intensive care unitEur Neurol2011、66：204209,3Chen CMHsu HCTsai WSet a1Infectiorts in acute older stroke inpatients undergoing rehabilitationAm J Phys Med Rehabil，2012，9l：211_219.,4Westcndorp WF，Nederkoom PJ，Vernleij JD，et a1Post-stroke infection：a systematic review and metanalysisBMC Neurol，201111：1lO,5Hilker R,Poetter C,Findeisen Net a1Nosocomial pneumonia after acute stroke：implications for neurological intensive care medicineStroke,2003,34:975-981,6卒中相关性肺炎诊治中国专家共识组,卒中相关性肺炎诊治中国专家共识,中华内科杂志2010年12月,第49卷,第12期.,7Howard RJSimmons RLAcquired immunologic deficiencies after trauma and surgical proceduresSktrg Gynecol Obstct，1974，139：77l-782,8,C,zl,onkowska,A,Cyrta B，gorlak J,immun,ological obs,ervations,on,pat,ie,n,t,s,with,acute,ce,re,bral,vascular disease，J Neurol,Sci，1979，43：455,-,464,9,MejselC,SchwabJM,PrassK,et。1.Cen,t,ral,nervou,s,ystem,injury,-,indu,c,ed,immunedefieieney,s,yndrome,J.Nat,Rev,Neurosei,2005,6(10):775一786.,10,Prass K,Meisel C，et,al,Str,o,ke-induced i,mmu,modeficiency promotes spontaneous bacterial infections and is rnediated by sympathetic activation reversal by poststroke T helper cell type 1-like immunostimulationJ Exp Med2003198：725736,11,OffnerH,SubramanianS,ParkerSM,etal.Splenieatrophy,in,experimental,stroke,in acc,ompanied,by,inereased,regulatory,T,c,ells,and,c,ir,c,ulating,m,a,c,rophagesJ,.I,m,munol,2006,176:6523一6531.,12,VogeigesangA,GrunwaldU,LangnerS,etal.Analysis,of,lympho,c,yte,subsets,in,patients,with,stroke,and,their,influen,c,e,on,infe,c,tion,after,strokeJ,.Stroke,2008,39:237一241.,13,KlehmetJ,HarmsH,RiehterM,e,t,al.Stroke,-,indu,c,ed,immunodepress,i,on,and,post,-,stroke,infe,c,tions:lessons,from,the,preventive,antibaeterial,therapy,in,stroke,trialJ.Neuros,c,ien,c,e,2009,158(3):1184一1193.,14O,ffner,H,VandenbarkAA,HurnPD.Effeet,of,experimental,stroke,on,peripheral,immunity:CNS,is t,hemaindues,profound,immunosuppression,J,.Neuroseienoe,2009,158(3):1098,-,1111.,15Andreas Hug,Arthur Liesz,Reduced Efficacy of Circulating Costimulatory Cells After Focal Cerebral Ischemia，Stroke.2011;42:3580-3586.,16Christoph Kleinschnitz,Peter Kraft,Regulatory T cells are strong promoters of acute ischemic stroke in mice by inducing dysfunction of the cerebral microvasculature，Blood.2013 January 24;121(4):679691.,17,马嘉,闫福岭,T淋巴细胞亚群预测卒中相关性感染前瞻性病例系列研究,国际脑血管病杂志2012年6月第20卷第6期.,18,张新颜,，,闫福岭,，检测单核细胞HLA-DR和T淋巴细胞亚群变化 对脑卒中相关性肺炎的预测价值，中国神经免疫学和神经病学杂志，2013.Vol.20.No6.,19,林,真,珍，邵 蓓,，,流式细胞技术分析大鼠缺血性脑卒中后脑组织内 T细胞的变化,，Chin J Clin Neurosei 2013,21(2).146-151.,20,Qing Li,Yiping Wang，Peripheral Th17/Treg imbalance in patients withatherosclerotic cerebral infarction,Int J Clin Exp Pathol 2013;6(6):1015-1027.,21何文贞，脑卒中合并肺部感染患者体液免疫与神经功能恢复的关系.Chinese Journal Clinical Rehabilitation,August 7 2005 Vol.9 No.29.,谢谢您的聆听！,请各位专家提出宝贵意见！,