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宠物临床诊疗生化.ppt

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录,一、生化仪的介绍(以,IDEXX,为例),二、样本采集与制备,三、检测指标及临床选择,四、主要检测指标临床意义,一、生化仪的介绍(以,IDEXX,为例),生化仪,干式,时间:,8,分钟,项目任意(单次最多,12,项),多种动物不同年龄模式,试剂片,将绿色盒子存放在冰箱冷藏室,,紫色盒子存放在冰箱冷冻室里。,二、样本采集与制备,全血、血清、血浆的区别?,如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?,样品如何保存?,采多少样本?,血浆样本的检查?,血浆,=,血清,+,纤维蛋白原,血浆,=,全血,-,血细胞,二、样本采集与制备,如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?,全血样本收集,血清样本收集,血浆样本收集,建议头皮针:静脉采血,小动物多用紫色,采血管:红帽、绿帽、紫帽分别指示无抗凝剂、肝素锂、,EDTA,,根据需求自行选择,采集的血液需立即放入其内。,无菌采血管:一般用,2mL,注射器,针头过细易造成溶血,计数娴熟的专业人员进行操作,禁食、,安静的动物:应激可导致血糖显著升高,镁离子(,Mg,)、天门冬氨酸氨基转移酶(,AST,)、乳酸脱氢酶(,LDH,)、肌酐酸激酶(,CK,)磷酸酶(,PHOS,)可能升高。,采血视频,点击播放,如何根据标准流程收集和制备全血、血清、血浆样本?,血清样本收集,全血样本加入无抗凝剂或促凝管中,凝固取上清液,血浆样本收集,全血样本加入,肝素锂,抗凝管中离心,取上清液,二、样本采集与制备,为何建议使用血浆样本进行检测?,比血清来的更快,血清凝固期间会造成乳酸、氨等指标的升高,葡糖糖和总蛋白指标的降低。血浆可实现快速、简便、准确的效果。,抗凝管为何选择肝素锂而非其他?,EDTA,、,枸橼酸钠,会影响,Ca,、,K,等指标的偏差,二、样本采集与制备,样品如何保存?,全血保存,含肝素锂的全血样本必须马上检验。无法在,1,小时内完成检验时,样本必须离心后,并将血浆转移出保存。,建议您于采血后立即处理及分析样本,可得到最佳结果。,血清、血浆保存,血清或血浆必须先与血细胞分离后才能保存。移液管小心的移至新的采血管,关紧管盖避免污染及蒸发。不要有任何气泡存在,会影响血清蛋白。若您无法在,4,小时内完成检验,冷藏保存。若您无法在,48,小时内完成检验,冷冻保存。,二、样本采集与制备,采多少样本?,依据:,做多少项目,公式:,试剂片,8,,样本总量,(uL)=50uL,基本量,+10uLx,试剂片数,试剂片,8,,样本总量,(uL)=100uL,基本量,+10u1x,试剂片数,样本需求量参考表,试剂片数,样本量,(u1),试剂片数,样本量,(u1),1,60,10,200,2,70,11,210,3,80,12,220,4,90,13,230,5,100,14,240,6,110,15,250,7,120,16,260,8,130,17,270,9,190,18,280,0.5 CC,的全血可以得到,225u1,血浆,足矣!,血浆样本的检查?,为何检查?,指示什么?,二、样本采集与制备,不同情况下可能会影响结果,如,:,溶血。您可藉由这些肉眼观察离心后的样本,以修正您的检测组合。,黄疽,视觉,:,样本呈透明淡黄色到不透明的棕色。,象征,:,阻塞或肝脏疾病,血管内的溶血。,额外测试项目,:,肝脏相关酶,总胆红素,,PCV(,红细胞压积,),。,溶血,视觉,:,样本呈透明的淡到深红色。,象征,:,红细胞在采血中损坏或是血管内的溶血。,额外测试项目,:,总胆红素,,PCV(,红细胞压积,),厚的白血细胞层,视觉,:,白细胞层,(,介于血浆或血清和浓缩红细胞之间,),特别宽。,象征,:,白细胞和,/,或血小板过多。,额外测试项目,:,总白细胞计数和分类,血小板计数。,二、样本采集与制备,血浆样本的检查?,指示什么?,血脂,视觉,:,样本呈苍白色,牛奶状,甚至有浮游的脂肪球状颗粒。,象征,:,最近食用脂类食物或脂肪代谢功能不足。,额外测试项目,:,血脂和肝脏相关酶。,三、检测指标及临床选择,内分泌:,碱性磷酸酶(,AKP,),肌酸激酶(,CK-NAC,),葡萄糖,(GLU-0X),胆固醇(,CHOL,),钙(,Ca,),磷(,P,),钠(,Na,),钾(,K,),镁(,Mg,),白蛋白(,ALB,),总蛋白(,TP,),总胆红素(,TB,),总胆汁酸(,TBA,),直接胆红素(,DBB,),谷草转氨酶(,AST,),谷丙转氨酶(,ALT,),r-,谷氨酰转移(,r-GT,),胆碱酯酶(,CHE,),碱性磷酸酶(,AKP),尿素氮(,BUN,),肌酐(,Cr,),尿酸(,UA,),乳酸脱氢酶(,LDH,),血钾(,K,),血钙(,Ca,),肌酸激酶(,CK-NAC,),血糖血脂:,葡萄糖,(GLU-0X),甘油三脂,(TG),酮体,胆固醇(,CHOL,),果酸胺(,FMN,),高密度脂 蛋白胆固醇(,HDC-C),低密度脂蛋白胆固醇(,LDC-C,),电解质:,钠(,Na,),氯(,Cl,),碳酸氢盐,镁(,Mg,),无机磷(,P,),钙(,Ca,),淀粉酶(,AMY,),脂肪酶,(LIPA),三、检测指标及临床选择,四、主要检测指标临床意义,同时,在有些病例中,不要忘记正常的体液平衡机制干扰的影响。,如何分析测定指标?,参考值,(点击查阅),增高临床意义:,脱水,-,呕吐、腹泻、休克,-,相对增多,慢性和免疫介导的疾病,-,细菌性传染病和自体免疫疾病,特别是猫传染性腹膜炎,-,球蛋白,特别是,-,球蛋白的升高,。,多发性骨髓瘤、淋巴肉瘤、浆细胞瘤,总蛋白(,TP,),四、主要检测指标临床意义,-,蛋白,检测目的:,总蛋白与其他检查肝肾功能、脱水程度、有无蛋白质流失性肠道疾病或免疫球蛋白疾病一起检测时,可提供有用的讯息。此项目单独检测时无法提出具体诊断意义,因为它缺乏特异性。,降低临床意义:,水相对增多(少见),多为医源性,过多的蛋白丢失,-,低白蛋白血症,最常见(最小,易丢失),肾蛋白丢失,见于肾病综合征、肾小球性肾炎、淀粉性样变等。这可通,过检查尿中是否存在蛋白来证实,。,肠蛋白丢失,(,蛋白丢失性肠病,),在小动物中,要考虑的疾病有淋巴癌、绒毛萎缩、大肠炎和嗜酸性肠炎。,出血,当全血丢失时,血浆蛋白的丢失会引起低蛋白血症,同时存在贫血。这是评估再生性贫血,出血性贫血,还是溶血性贫血最容易的方法,(,如果是后者,血浆蛋白不会下降,),。,烧伤,大面积皮肤烧伤渗出血清,可引起低蛋白血症。,蛋白合成的下降,-,营养不良、,吸收障碍,、,肝衰,白蛋白(,ALB,),。,。,球蛋白(,GLOB,),球蛋白(,GLOB,),=,总蛋白(,TP,),-,白蛋白(,ALB,),隐藏项目,当同时检查,TP,与,ALB,时,结果会自动生成,四、主要检测指标临床意义,-,蛋白,四、主要检测指标临床意义,-,酶,谷丙转氨酶,/,丙氨酸氨基转移酶,(,ALT,),来源:,主要存在于肝脏,(,犬猫,),、心脏和骨骼肌中(大动物)。,在犬猫方面,此酶对肝脏具有特异性。,A LT,存在于,细胞质中,,当细胞膜通透性改变或细胞坏死时它会被释放到血液中。,检验目的:,犬猫的肝脏有无受损。,作用:,催化丙氨酸和酮戊二酸转氨生成丙酮酸和谷氨酸。,检查适应症:,腹泻、黄疸、腹水、精神不振和厌食,以及难以诊断的疼痛时。,ALT,值升高:,肝病:,见于肝坏死、肝肿瘤、脂肪肝及肝炎、肝硬化、肝脓肿和肝胆炎时。肝脏损伤(自然、手术、外伤),药物:,氯丙嗪、利福平、红霉素、氯霉素、四环素、庆大霉素、皮质类固醇抗惊厥药(扑癫酮、苯巴比妥)等药物。,中毒:,四氯化碳,铅、汞等重金属,砒霜等中毒,传染病:,犬传染性肝炎、猫传染性腹膜炎、钩端螺旋体病。,ALT,值降低:没有意义。,四、主要检测指标临床意义,-,酶,谷草转氨酶,/,天门冬氨酸氨基转移酶(,AST,),作用:,AST,催化天门冬氨基酸和酮戊酸转氨生成草酰乙酸和谷氨酸,。,来源:,广泛地分布于机体中,特别是骨骼肌、心肌、肝脏和红细胞。,检验目的:,检查肝脏,心肌或骨骼肌有无受损。此酶对任何器官或组织受损都,不是一项专一或敏感的指标。,AST,升高:,心肌疾病、骨骼肌疾病、肝细胞受损、人为误差(溶血),AST,降低:,没什么意义,四、主要检测指标临床意义,-,酶,ALP,(,ALKP,):碱性磷酸酶,ALP,是体内分布最广泛的酶之一,,主要存在于肝脏和骨骼中;,血浆,ALP,正常值的范围非常广,;,成骨细胞活性较高的幼年动物,其,ALP,水平较高,。,骨源性,ALP,的升高,通过肝实质性酶的不升高和黄疸缺乏,很容易与肝胆疾病区别。,胆道疾病,特别是阻塞,会引起血浆,ALP,的大量升高,,,可通过,ALP,的显著升高而肝实质性酶不发生任何变化来鉴别。,四、主要检测指标临床意义,-,酶,(,CK,),CPK,:肌酸激酶,存在于骨骼肌、心肌和脑等组织的细胞浆和线粒体中。检验目的是,检查骨骼肌或心肌有无受损,。最常见的异常原因是,外伤或过度运动造成骨骼肌的病变,。,增高:,心肌炎、心肌梗塞;脑血管意外、脑膜炎、脑梗死、脑缺血;皮肌炎、肌营养不良、肌肉损伤、甲状腺机能减弱、肺水肿、肺梗死、肌肉物理性损伤。,降低:,血样放置时间过长(,2,小时),AMYL,:淀粉酶,主要存在于胰腺中,通常通过肾脏排泄。临床上主要用于,诊断急性坏死性胰腺炎。,在该疾病中,淀粉酶从细胞中漏出,并开始消化自己的组织。,有急性腹痛和呕吐的症状,,可能会被误认为是小肠内有异物,如果不能确定的话,就应该检查淀粉酶,(,和脂肪酶,),。,轻度到中度的非特异性的升高,可见于其它急性的腹部疾病,(,包括肠梗阻,),和肾衰。,四、主要检测指标临床意义,检验此项目的主要目的:检测碳水化合物的代谢情形。,葡萄糖(,GLU,),增高:,生理性高血糖:,餐后 紧张 兴奋 疼痛 注射可的松,病理性高血糖:,糖尿病、胰腺炎、酸中毒、癫痫、抽搐、颅外伤、颅内出血、脑膜炎、肾上腺皮质机能亢进、甲状腺和脑垂体前叶功能亢进以及频死期,降低:,生理性低血糖:,饥饿,病理性低血糖:,胰岛B细胞增生或瘤,垂体前叶功能减退、肾上腺功能减退、肝病后期、甲状腺和脑垂体前叶功能减退、坏死性肠炎、消化吸收不良、慢性贫血。,胆固醇(,CHOL,),检验目的:是甲状腺功能低下的指针。最常见的异常原因:甲状腺功能低下。,四、主要检测指标临床意义,肌酐(,CREA,),肌酐是,肌肉代谢过程中肌胺酸降解的产物,。每天产生的量是相当稳定的,,不会随年龄、饮食、运动或损伤作用而改变,。经肾脏过滤及肾小管分泌排出体外。,血浆肌酐浓度的变化,只与肌酐的排泄有关,,也就是说,它更,准确反映了肾的功能,。,既然肌酐比尿素对肾衰更特异更敏感,为什么还要同时测定尿素呢?,1,、肌酐在血浆样品中,易,变质,。,2,、有些物质容易干扰肌酐的检测,胆红素降低肌酐浓度,头孢增加肌酐的浓度。,3,、由于尿素受许多因素影响,故尿素的测定也可以为病畜提供比肌酐更多的信息。,降低没有临床意义,;增加到,250,mol/L,左右时,可能是,肾前性的原因,引起的,(,脱水或心衰,),;超过该值时,,肾是有问题,的,(,除非存在膀胱破裂或尿道阻塞,),;当血浆肌酐的浓度超过,500,mol/L,时,情况就十分严重了;浓度超过,1000,mol/L,的情况,见于,肾衰后期、膀胱破裂和尿道阻塞,。,四、主要检测指标临床意义,尿素氮(,BUN,),蛋白质,分解后产生的,氨,具有相当的毒性,它会在,肝脏,中转变成,尿素,并由,肾,小管滤过后排出体外。,检验,主要目的是肾脏疾病,的指标。,肾衰实际上只是可以影响血浆尿素浓度的疾病之一,,,当心基于尿素浓度升高把心脏疾病误诊为肾衰的情况。,还是,监测慢性心衰治疗效果,的一种有效方法。,当血浆尿素水平高于,60mmol/L,时,治愈希望很小,(,除非进行肾移植技术,),,建议安乐死。,治疗,肾衰,方法,主要是喂低蛋白、低钾、低镁、低磷的食物,从而降低肾脏的排泄压力,;多饮水,防止脱水的发生。,四、主要检测指标临床意义,胆红素(,TBIL,),检验主要目的:,检测阻塞型肝病。,注意:,健康的犬猫总胆红素的浓度相当低。通常先用肉眼观察样本后可决定是否需要检验胆红素。,四、主要检测指标临床意义,钙(,Ca,),四、主要检测指标临床意义,磷(,PHOS,),与,Ca,一样,,血浆浓度也是被甲状旁腺激素和维生素,D,调控的。,检验主要目为判读肾脏疾病严重程度的指标。最常见的异常原因为肾衰竭及胃肠炎。,血清磷受,食物、体内激素及肾脏机能,的影响。,体内大量的磷存在于红细胞内,故采血时的,溶血可导致血磷值的假性升高,,应加以避免和判读上的注意。,甲状旁腺激素使磷在肾脏细曲尿管重吸收减少。,意义,血磷升高,见于甲状旁腺机能低下、营养性、继发性甲状旁腺机能亢进、肾功能不全、肾性继发性甲状旁腺机能亢进等时。,由于甲状旁腺激素降低磷在肾脏的重吸收,故甲状旁腺机能亢进和假性甲状旁腺机能亢进时,血磷均下降。,血清磷值和血清肌酐值一起在肾脏病持续期间,在评价肾病严重程度上具有重要作用。血清磷和肌酐值的升高是长期及严重肾病的特征。,
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