人参皂苷Re的提取分离与鉴定.ppt

Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,Click to edit Master title style,人参皂苷,Re,的提取分离与鉴定,天然药物化学教研室,一、实验目的,1,2,3,要求提取分离人参皂苷,Re,；,掌握大孔树脂法提取人参皂苷的操作程序；,学习薄层层析在皂苷检识中的应用。,二、实验原理,果汁中含脂溶性杂质，用乙醚脱脂后，利于水溶性皂苷在树脂上的吸附，籍此提取皂苷，且利用,Re,溶于热乙醇，在冷乙醇溶解度小的特点析出,Re,，与其它成分分离。,1,人参果汁总皂苷的提取,人参果肉,50g,150ml,水温浸（,70,，,1hr,）,，抽滤,滤液,1,果肉,合并，通过大孔吸附树脂,D4020,柱,；,水洗至无糖反应,；,90%,乙醇（,8001000ml,）洗脱,。,回收乙醇,乙醇提取物（人参粗总苷,A,）,100ml,水温浸（,70,，,30,）,，抽滤,滤液,2,果肉,乙醇洗脱液,三、,实验方法,2,人参皂苷,Re,的制备,取,4/5,量的乙醇提取物,少量展开剂,2,溶解；,上样于硅胶,H,（,40g,）柱,展开剂,1,洗脱，每,30ml,为一流份收集,Re,粗晶,B,TLC,检测，合并,Re,单一斑点的流份,回收洗脱液至小体积（约,2030ml,）,放置、析晶,95%,乙醇重结晶,Fr1,Fr2,Fr3,Fr13,Re,纯品,C,注：树脂柱用前需经无水乙醇处理；,可用,萘酚糖反应检测，实际中可目测，至,水洗液颜色变浅至清即可；,洗脱时，自紫色带即将流出时，开始收集洗脱,液。收集,12001500ml,需半周时间；,可用回流装置中脱色半小时。,Liebermann-,Burchard,反应：取果汁,1ml,，加等量乙酸酐，滴加,1,滴浓硫酸,变成紫红色。,取果汁,12ml,于试管内，激烈振摇，如产生多量蜂窝状泡沫，放置,10,分钟以上，泡沫不明显减少，示有皂苷成分。,1),展开剂：,1,氯仿：甲醇：乙酸乙酯：水（,2,：,2,：,4,：,1,，下层）,2,氯仿：甲醇：水（,65,：,35,：,10,，下层）,2),显色剂：,5%,硫酸乙醇溶液（,110,以上加热,5,分钟）显红色、紫红色斑点,。,四、鉴定,1,泡沫实验,2,显色反应,3,薄层层析,五、,思考题,1,1.,层析结果如何？若想进一步得到,Re,纯品应怎样程序处理？,2,2.,根据皂苷性质、自行设计一种自人参根中提取总苷及皂苷单体分离的方案。,