GB 23200.40-2016 （代替 SN∕T 1984-2007）食品安全国家标准 可乐饮料中有机磷、有机氯农药残留量的测定 气相色谱法.pdf

ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB GB 23200.402016 代替SN/T 19842007 食品安全国家标准 可乐饮料中有机磷、有机氯 农药残留量的测定 气相色谱法 National food safety standards Determination of organophosphorus and organochlorine residues in cola drink Gas chromatography 2016-12-18 发布 2017-06-18 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 发布 国家食品药品监督管理总局 GB 23200.402016 I 前前 言言 本标准代替SN/T 1984-2007 进出口可乐饮料中有机磷、有机氯农药残留量检测方法 气相色谱法。 本标准与SN/T 1984-2007相比，主要变化如下： 标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式； 标准名称中“进出口可乐饮料”改为“可乐饮料”。 标准范围中增加“其它食品可参照执行”。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 1984-2007。 GB 23200.402016 1 食品安全国家标准食品安全国家标准 可乐饮料中有机磷、有机氯农药残留量的测定可乐饮料中有机磷、有机氯农药残留量的测定 气相色谱法气相色谱法 1 1 范围范围 本标准规定了可乐饮料中11种有机磷、有机氯农药残留量的气相色谱测定方法。 本标准适用于可乐饮料中敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷、七氯、六氯苯、六六六及其异构体 （-六六六、-六六六、-六六六、-六六六） 、五氯硝基苯等11种有机磷、有机氯农药残留量的检测，其它食品可参照执行。 2 2 规范性引用文件规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 2763 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 3 原理原理 试样中有机磷残留经乙酸乙酯萃取，旋转蒸发浓缩，固相萃取柱净化，使用气相色谱火焰光度检测器测定，外标法定量。 试样中有机氯残留经乙酸乙酯萃取， 旋转蒸发浓缩， 磺化净化， 使用气相色谱电子俘获检测器测定，外标法定量。 4 4 试剂和材料试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。 4.14.1 试剂试剂 4.1.1 正己烷(C6H14)：色谱纯。 4.1.2 甲醇(CH3OH)：色谱纯。 4.1.3 乙酸乙酯(C4H8O2)：优级纯。 4.1.4 无水硫酸钠(Na2SO4)：经 650灼烧 4 h，置于干燥器中备用。 4.1.5 氯化钠(NaCl)。 4.1.6 氢氧化钠(NaOH)。 4.1.7 浓硫酸(H2SO4)：优级纯。 4.2 4.2 溶液配制溶液配制 4.2.1 甲醇-水溶液（5+95, V/V）：量取 5 mL 甲醇与 95 mL 水混合。 4.2.2 甲醇-水溶液（10+90, V/V）：量取 10 mL 甲醇与 90 mL 水混合。 4.2.3 氢氧化钠溶液（1 mol/L）：称 20 g 氢氧化钠，用水溶解并定容至 500 mL。 4.3 4.3 标准品标准品 4.3.1 农药标准物质：参见附录 A。 4.4 4.4 标准溶液配制标准溶液配制 4.4.1 有机磷农药标准溶液 4.4.1.1 有机磷农药标准储备溶液：准确称取适量的敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷，分别用丙酮溶解并定容至棕色容量瓶中，浓度相当于 1 000 mg/L，储备液于-18以下保存。 4.4.1.2 有机磷混合标准中间溶液：准确吸取适量敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、对硫磷标准储备溶液于棕色容量瓶中，用丙酮定容至刻度，各种有机磷农药标准溶液的浓度为 10 mg/L，此中间溶液于-18以下保存。 4.4.1.3 有机磷混合标准工作溶液：用乙酸乙酯将混合标准中间溶液按需要逐级稀释，配制为 4 种有机磷农药混合标准工作溶液，混合标准工作溶液在 0 4保存。 4.4.2 有机氯农药标准溶液 4.4.2.1 有机氯农药混合标准中间溶液：移取适量体积的七氯、六氯苯、六六六混合标准溶液、五氯GB 23200.402016 2 硝基苯标准溶液于棕色容量瓶中，用正己烷定容至刻度，各种有机氯农药标准溶液的浓度为 10 mg/L，此中间溶液于-18以下保存。 4.4.2.2 有机氯混合标准工作溶液：用正己烷将混合标准中间溶液按需要逐级稀释，配制为有机氯农药混合标准工作溶液，混合标准工作溶液于 0 4保存。 4.5 4.5 材料材料 4.5.1 HLB固相萃取小柱：60 mg，3 mL，或相当者。 5 5 仪器和设备仪器和设备 5.1 气相色谱仪，配电子俘获检测器（ECD）和火焰光度检测器（FPD）磷滤光片，波长 525 nm。 5.2 分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。 5.3 离心机：5 000 r/min。 5.4 吹氮浓缩仪。 5.5 固相萃取装置。 5.6 旋转蒸发装置。 5.7 分液漏斗：500mL。 5.8 磨口玻璃圆底烧瓶：500mL。 5.9 玻璃砂芯漏斗。 5.10 聚丙烯具塞离心管：15mL。 5.11 旋涡混合器。 6 6 分析步骤分析步骤 6.1 6.1 提取提取 取可乐样品于烧杯中，放置 60 min，并用玻璃棒搅拌排气。准确称取 150 g（精确至 0.01 g）可乐样品，加入 1 mol/L 的氢氧化钠溶液调节溶液 pH 值至 7 左右。将调节至中性的可乐样品转移至 500 mL分液漏斗中，加入 15 g 氯化钠和 100 mL 乙酸乙酯，剧烈振荡 2 min 并不时排气，静置 10 min 后，取上层有机相，过预先填充的无水硫酸钠柱（在玻璃砂芯漏斗中装入 15 g 左右无水硫酸钠，并用 20 mL 乙酸乙酯淋洗） ，收集于 500 mL 圆底烧瓶中。在分液漏斗中分两次加入 200mL 乙酸乙酯，每次 100 mL，重复以上提取步骤，合并提取液于 40水浴下旋转蒸发至 3 mL 4 mL，转移至 15 mL 离心管中，用 9 mL 正己烷分三次洗涤圆底烧瓶，合并洗涤液于 15mL 离心管中，40水浴下吹氮至近干。 6.2 6.2 净化净化 6.2.1 6.2.1 有机磷农药测定样品溶液净化有机磷农药测定样品溶液净化 HLB 固相萃取柱使用前分别用乙酸乙酯 3 mL 淋洗一次，3 mL 甲醇和 3 mL 水预处理两次，保持柱体湿润。将 6.1 中提取液用 5 mL 10甲醇水溶液溶解，以 1 滴/秒速率过 HLB 固相萃取柱，弃去流出液，再用 10 mL 5甲醇水溶液润洗离心管并上 HLB 柱，弃去从 HLB 柱流出的润洗液，真空排干小柱10 min。 用 9 mL 乙酸乙酯进行洗脱， 收集洗脱液于 15 mL 离心管中， 加入 3 g 无水硫酸钠， 振荡 3 min，5000 r/min 条件下离心 2 min，将溶液转移至另一离心管中，于 40水浴中吹氮浓缩至近干，用乙酸乙酯定容至 1.0 mL，供气相色谱 FPD 测定。 6.2.2 6.2.2 有机氯农药测定样品溶液净化有机氯农药测定样品溶液净化 将 6.1 中提取液用 1mL 正己烷溶解，加入 0.5 mL 浓硫酸，手动轻摇混匀，5000 r/min 离心 5 min后，取上层有机相进气相色谱 ECD 测定，如净化效果不充分，可再加入浓硫酸净化一次。 6.3 6.3 测定测定 6.3.1 6.3.1 气相色谱电子俘获检测仪器参考条件气相色谱电子俘获检测仪器参考条件 a） 色谱柱：DB-5石英毛细管柱：30 m0.32 mm（内径），膜厚0.25 m，或相当者。 b） 色谱柱温度： 80 （1 min）30/min. 180 3/min 205 （4 min）2/min 210 （1 min） ， postrun：280（1min） ； c） 进样口温度：250。 d） 检测器温度：300。 e） 载气：氮气，纯度99.999 %，恒压0.135Mpa。 f） 进样量：1 L。 g） 进样方式：分流进样，分流比121。 6.3.26.3.2 气相色谱火焰光度检测仪器参考条件气相色谱火焰光度检测仪器参考条件 GB 23200.402016 3 a） 色谱柱：DB-1701石英毛细管柱：30 m0.32 mm（内径），膜厚0.25 m，或相当者。 b） 色谱柱温度：90（1 min）30/min. 210（8 min）10/min 240，postrun：280（5min） 。 c） 进样口温度：250。 d） 检测器温度：250 。 e） 载气：氮气，纯度99.999 %，恒压0.071Mpa。 f） 进样量：1 L。 g） 进样方式：不分流进样，1.0 min后打开分流阀，吹扫流量50 mL/min。 6.3.3 6.3.3 色谱测定与确证色谱测定与确证 待测溶液分别进气相色谱电子俘获检测和气相色谱火焰光度检测， 根据样液中被测有机磷或有机氯残留的含量情况， 选定峰面积相近的标准工作溶液。 标准工作溶液和样液中有机磷或有机氯残留的响应值均应在仪器的检测线性范围内。 对混合标准工作溶液和样液等体积分组分参差进样测定， 外标法定量。在6.3.1与6.3.2色谱条件下，有机磷与有机氯农药的保留时间参见附录A。10 g/L有机磷和有机氯混合标准工作溶液色谱图分别参见附录B中图B.1，图B.2。 6.4 6.4 空白实验空白实验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 7 7 结果计算和表述结果计算和表述 按下式（1）计算试样中有机磷、有机氯农药化合物的含量。 msVCsAX.（1） 式(1)中: X- 样品中有机磷、有机氯农药化合物含量, 单位为毫克每千克，mg/kg； A- 样液中有机磷、有机氯农药化合物峰面积； AS- 标准工作溶液中有机磷、有机氯农药化合物峰面积； Cs- 标准工作溶液中有机磷、有机氯农药化合物浓度, 单位为毫克每升，mg/L； m- 称取的试样量， 单位为克，g； V- 样液最终定容体积，单位为毫升，mL。 注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。 8 8 精密度精密度 8.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值 （百分率） ，应符合附录D的要求。 8.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录 E 的要求。 9 9 定量限和回收率定量限和回收率 9.1 9.1 定量限定量限 本方法有机磷、有机氯农药定量限均为 0.0001 mg/kg。 9.2 9.2 回收率回收率 当添加水平为0.0001 mg/kg、0.0002 mg/kg、0.0005 mg/kg时，有机磷、有机氯农药化合物的添加回收率参见附录C。 GB 23200.402016 4 附附 录录 A A （资料性附录）（资料性附录） 有机磷、有机氯农药有机磷、有机氯农药的基本信息和保留时间的基本信息和保留时间 表表 A.1 A.1 有机磷农药的有机磷农药的基本信息和保留时间基本信息和保留时间 序号 农药中文 名称 农药英文 名称 CAS 号 分子式 分子量 保留时间min 1 敌敌畏 Dichlorvos 62-73-7 C4H7Cl2O4P 220.98 4.750 2 毒死蜱 Chlorpyrifos 2921-88-2 C9H11Cl3NO3PS 350.59 11.246 3 马拉硫磷 Malathion 121-75-5 C10H9O6PS2 330.36 12.028 4 对硫磷 Parathion 56-38-2 C10H14NO5PS 291.26 13.250 表表A.2 A.2 有机氯农药有机氯农药的基本信息和保留时间的基本信息和保留时间 序号 农药中文 名称 农药英文 名称 CAS 号 分子式 分子量 保留时间min 1 -六六六 -HCB 319-84-6 C6H6Cl6 290.83 9.657 2 六氯苯 hexachlorobenzene 118-74-1 C6Cl6 284.78 9.924 3 -六六六 -HCB 319-85-7 C6H6Cl6 290.83 10.378 4 -六六六 -HCB 58-89-9 C6H6Cl6 290.83 10.591 5 五氯硝基苯 Quintozene 82-68-8 C6Cl5NO2 295.34 10.749 6 -六六六 -HCB 319-86-8 C6H6Cl6 290.83 11.284 7 七氯 Heptachlor 76-44-8 C10H5Cl7 373.32 13.072 GB 23200.402016 1 附附 录录 B B （资料性附录）（资料性附录） 有机磷、有机氯类农药标准物质色谱图有机磷、有机氯类农药标准物质色谱图 图图 B.1 10 B.1 10 g/g/L L 有机磷农药标准溶液色谱图有机磷农药标准溶液色谱图 1 1：敌敌畏敌敌畏；2 2：毒死蜱毒死蜱；3 3：马拉硫磷马拉硫磷；4 4：对硫磷对硫磷。 图图 B.2. 10 B.2. 10 g/g/L L 有机氯农药标准溶液色谱图有机氯农药标准溶液色谱图 1：-六六六六六六；2：六氯苯六氯苯；3：六六六六六六；4：五氯硝基苯五氯硝基苯；5：-六六六六六六；6：六六六六六六；7：七氯七氯 GB 23200.402016 1 附附 录录 C C （资料性附录）（资料性附录） 可乐中有机磷、有机氯类农药可乐中有机磷、有机氯类农药的添加回收率的添加回收率 表表C.1 C.1 可乐中有机磷、有机氯类农药可乐中有机磷、有机氯类农药的添加回收率的添加回收率 序号 化合物名称 回收率范围，% 1 敌敌畏 72.0%105.0 2 毒死蜱 75.8%98.0 3 马拉硫磷 64.0%88.0 4 对硫磷 75.0%92.0 5 -六六六 81.5%99.0 6 六氯苯 85.0%106.0 7 -六六六 73.0%98.0 8 -六六六 84.0%104.6 9 五氯硝基苯 81.5%98.0 10 -六六六 76.0%97.0 11 七氯 81.0%109.0 GB 23200.402016 2 附附 录录 D （规范性规范性附录）附录） 实验室内实验室内重复性要求重复性要求 表表 D.1 实验室内实验室内重复性要求重复性要求 被测组分含量被测组分含量 mg/kg 精密度精密度 % 0.001 36 0.0010.01 32 0.010.1 22 0.11 18 1 14 GB 23200.402016 3 附附 录录 E （规范性规范性附录）附录） 实验室间实验室间再现性要求再现性要求 表表 E.1 E.1 实验室间再现性要求实验室间再现性要求 被测组分含量被测组分含量 mg/kg 精密度精密度 % 0.001 54 0.0010.01 46 0.010.1 34 0.11 25 1 19