1、*医院 2011级泌尿外科研究生 开 题 报 告 2012-12膝关节周围滑膜囊的分布题目:*导导 师:师:*教授教授 研研 究究 生:生:*研究方向:泌尿外科研究方向:泌尿外科学学膝关节周围滑膜囊的分布目录膝关节周围滑膜囊的分布研究研究背景背景一一.概况概况1.膀胱癌是泌尿系最常见的恶性肿瘤,其中90以上为移行细胞癌2.膀胱癌具有易复发和晚期恶性加重的特点,给患者及其家庭带来沉重的心理压力及经济负担膝关节周围滑膜囊的分布研究研究背景背景二二.发病率发病率1.膀胱癌发病率在全球恶性肿瘤中位居第十一位,其中在男性恶性肿瘤中排名第七位2.虽然在我国膀胱癌发病率远低于西方发达国家水平,但是近年我国部
2、分城市报告膀胱癌发病率有增高趋势3.城市居民膀胱癌死亡率明显较农村为高膝关节周围滑膜囊的分布研究研究背景背景膀胱癌中非肌层浸润性膀胱癌予:经尿道膀胱肿瘤电切术后+膀胱内灌注化疗或免疫治疗仍易复发三.治疗膝关节周围滑膜囊的分布研究研究背景背景四.治疗1.至今,术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段2.但由于化疗药物本身的毒副作用以及肿瘤易产生抗药性,从而使其疗效显著降低3.近些年来,寻找安全、有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向膝关节周围滑膜囊的分布研究研究背景背景四.治疗1.至今,术后膀胱内灌注化疗和全身化疗仍是最重要的辅助治疗手段2.但由于化疗药物本身的毒副
3、作用以及肿瘤易产生抗药性,从而使其疗效显著降低3.近些年来,寻找安全、有效的防治膀胱癌复发的治疗方法一直众人关注的热点研究方向膝关节周围滑膜囊的分布研究背景曲古抑菌素A(TSA)简介:1.源自链霉菌代谢产物,最先作为抗真菌药物使用2.一种氧肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂,近来研究表明其具有抑制组蛋白去乙酰化酶的活性膝关节周围滑膜囊的分布研究背景曲古抑菌素A对肿瘤的作用:1.其被证明可在小剂量,低浓度情况下导致肿瘤分化,并选择性地抑制肿瘤生长而对正常细胞无毒副作用2.其日益受到临床医学界重视,而对TSA抑制膀胱癌生长的具体作用机制和途径尚未明确膝关节周围滑膜囊的分布研究背景概念:PTEN(phos
4、phatase and tensin homolog deleted on chromosome ten):为人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的抑癌基因膝关节周围滑膜囊的分布研究背景作用:在体内、外均可使FAK 脱磷酸,从而阻碍整合素介导的肿瘤细胞扩散、转移、侵袭和骨架蛋白组装膝关节周围滑膜囊的分布研究背景pten特异性使PIP3脱3C磷酸PI3K/AKt信号转导途径细胞中Akt磷酸化水平显著细胞生长周期关键激酶抑制因子P27kipl干扰细胞生长信号使细胞阻滞于G1期并增加细胞对凋亡的敏感性膝关节周围滑膜囊的分布研究背景概念:RUNX3(human runt2related tran
5、scription fac2 tor3):人RUNT相关转录因子3,是属于 RUNT家族成员的肿瘤抑制基因膝关节周围滑膜囊的分布研究背景作用:在Runx蛋 白 作 用 下Smad复合物从细胞质内转入特定的靶位点,当Runx基因表达受抑制时,影响TGF2信号通路的转导,从而诱导肿瘤的发生。膝关节周围滑膜囊的分布研究背景现状:已证实在胃癌等恶性 肿 瘤 中 都 出 现 了Runx3基因转录和翻译水平的下调,但在泌尿系肿瘤尤其是膀胱癌中有关Runx3的研究报道相对较少膝关节周围滑膜囊的分布相关概念半半定定量量反反转转录录聚聚合合酶酶链反应链反应 (SqRT-PCRSqRT-PCR)是是近近年年来来常
6、常用用的的一一种种简简捷捷、特特异异 的的定定量量RNARNA测定方法测定方法膝关节周围滑膜囊的分布相关概念SqRT-PCRSqRT-PCR基本原理:基本原理:1.1.通通过过mRNAmRNA反反转转录录成成cDNAcDNA,再再进进行行PCRPCR扩扩增增,并并测测定定PCRPCR产产物物的的数数量量可可以以推推测测样样品中特异品中特异mRNAmRNA的相对数量的相对数量2.2.以以半半定定量量RT-PCRRT-PCR为为基基础础建建立立起起来来的的mRNAmRNA含含量量测测定定技技术术,较较含含内内标标化化的的RT-RT-PCRPCR定定量量测测定定的的mRNAmRNA的的方方法法更为简
7、便可行更为简便可行 膝关节周围滑膜囊的分布研究目的和意义TSA膀胱移行细胞癌BIU-87细胞株PTEN 表达情况Runx3表达情况作用于探讨:TSA抗癌的可能的作用机制和途径膝关节周围滑膜囊的分布实验方案RPMI-1640培养基酶解并配成1x105/ml细胞悬液膝关节周围滑膜囊的分布可行性分析1.本课题人员具备扎实的理论和实验技术基础,导师刘久华主任在膀胱癌研究领域具有较深造诣,其丰富的专业背景和知识将有助于指导本项目的顺利开展,保证该项目的顺利进行。2.*科研中心实验室仪器配置保证了试验顺利进行及指标检测。3.大量阅读文献,加深对相关基因的作用机制的认识,跟随导师所习得的关于细胞培养和半定量
8、RT-PCR技术让试验的进行更加有保障。膝关节周围滑膜囊的分布预期目标1.SqRT-PCR结果可能显示TSA处理能明 显诱导PTEN和Runx3基因表达增加并呈现浓度与时间依赖性2.故而可以得出:TSA体外抗膀胱癌作用机制可能与其诱导PTEN、Runx3 mRNA的表达上调有关膝关节周围滑膜囊的分布经费预算试验细胞及培养 3500元购买试剂 4500元仪器使用及台租 2500元科室协调费1500元合计12000元膝关节周围滑膜囊的分布进度安排第一阶段(2012.10-2013.3)查阅文献、选题开题、掌握实验基本步骤。按课题设计申购实验用的各种试剂(盒)及实验细胞株第二阶段(2013.3-2013.9)按照课题设计,完成全部实验,处理样本,检测指标第三阶段(2013.9-2013.11)整理资料,处理数据第四阶段(2013.11-2014.5)发表论文,论文答辩 谢 谢!谢