GB 23200.1-2016 （代替SN∕T 1737.1-2006）食品安全国家标准 除草剂残留量检测方法 第1部分：气相色谱-质谱法测定 粮谷及油籽中酰胺类除草剂残留量.pdf

ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB GB 23200.12016 代替SN/T 1737.12006 食品安全国家标准 除草剂残留量检测方法 第 1 部分：气相色谱-质谱法测定 粮谷及油籽中酰胺类除草剂残留量 National food safety standards Determination of acetanilide herbicide residues in cereals and oil seeds Gas chromatography-mass spectrometry 2016-12-18 发布 2017-06-18 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 发布 国家食品药品监督管理总局 GB 23200.12016 I 前前 言言 本标准代替SN/T 1737.1-2006 除草剂残留量检测方法 第1部分：气相色谱串联质谱法测定粮谷及油籽中酰胺类除草剂残留量。 本标准与SN/T 1737.1-2006相比，主要变化如下： 标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式； 标准名称中“进出口食品”改为“食品”。 标准范围中增加“其它食品可参照执行”。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： SN/T 1737.1-2006。 GB 23200.12016 1 食品安全国家标准食品安全国家标准 除草剂残留量检测方法除草剂残留量检测方法 第第 1 1 部分：部分：气相色谱气相色谱- -质质谱法测定谱法测定 粮谷及油籽中粮谷及油籽中酰胺类除草酰胺类除草剂残留量剂残留量 1 1 范围范围 本标准规定了粮谷及油籽中酰胺除草剂残留量检验的抽样、制样和气相色谱-质谱联用测定方法。 本标准适用于大米、大豆中酰胺除草剂残留量的定量测定，其它食品可参照执行。 2 2 规范性引用文件规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 3 原理原理 试样中除草剂用丙酮和水提取，把提取液中丙酮减压去除后，加入氯化钠溶液，用正己烷反萃取，浓缩正己烷提取液，然后用乙腈提取，弗罗里硅土固相萃取柱净化，样液供气相色谱-质谱测试，外标法定量。 4 4 试剂和材料试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。 4.1 4.1 试剂试剂 4.1.1 正己烷（C6H14） ：色谱纯。 4.1.2 乙腈（CH3CN） ：色谱纯。 4.1.3 丙酮(CH3COCH3)：色谱纯。 4.1.4 乙醚(C2H5)2O)：色谱纯。 4.1.5 无水硫酸钠（Na2SO4）：经 650C 灼烧 4 h，冷却后置于干燥器中备用。 4.1.6 氯化钠(NaCl)：分析纯。 4.2 4.2 溶液配制溶液配制 4.2.1 氯化钠溶液：10 %（m/V）,将 100 g 氯化钠溶于水中，并稀释至 1000 mL。 4.2.2 提取剂 I：乙腈加入少量正己烷饱和，摇匀。 4.2.3 提取剂：正己烷加入少量乙腈饱和，摇匀。 4.2.4 正己烷-乙醚（85+15）：取 85 mL 正己烷和 15 mL 乙醚，混匀。 4.3 4.3 标准品标准品 4.3.1 毒草胺、莠去津、乙草胺、二甲吩草胺、甲草胺、嗪草酮、异丙甲草胺、敌稗、丁草胺、丙草胺、敌草胺标准品（具体信息见附录 A） ，纯度大于 98%。 4.4 4.4 标准溶液配制标准溶液配制 4.4.1 分别准确称取 25 0.1 mg 标准品于 50 mL 容量瓶中， 用丙酮溶解并定容， 得到浓度为 500 g/mL单标储备液，此溶液在 04 中可保存 3 个月。根据需要再用丙酮稀释储备液，配制成适当浓度的混合标准工作液，此溶液在 04 中可保存 1 个月。 4.5 4.5 材料材料 4.5.1 弗罗里硅土固相萃取柱：125 mg，3 mL，或相当者。使用前依次用 5 mL 正己烷-乙醚溶液和 5 mL正己烷预淋洗柱子，流速 1 d/sec。 5 5 仪器和设备仪器和设备 GB 23200.12016 2 5.1 气相色谱-质谱仪。 5.2 分析天平：感量0.01 g和0.0001 g。 5.3 旋转蒸发仪。 5.4 固相萃取装置。 5.5 吹氮浓缩仪。 5.6 旋涡混合器。 5.7 均质机。 5.8 离心机。 5.9 茄形瓶：100 mL，250 mL。 5.10 离心管：15 mL，50 mL。 5.11 微量注射器：10 L。 6 6 试样制备与保存试样制备与保存 6.1 6.1 试样制备试样制备 将样品按四分法缩分至 1 kg，样品取样部位按GB 2763附录A执行，全部磨碎并通过 40 目筛，混匀，均分成两份，装入洁净的容器内，密封，标明标记。 6.2 6.2 试样保存试样保存 将试样于-5 以下避光保存。 在抽样和制样过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 7 7 分析步骤分析步骤 7.1 7.1 提取提取 称取约 10 g（精确至 0.01 g）样品于 50 mL 离心管中，加入 10 mL 水和 20 mL 丙酮，均质 3 min，于 4000 r/min 离心 4 min，将提取液移入 250 mL 茄形瓶中，离心管中残渣再用 30 mL 2 丙酮提取，提取液并入茄形瓶中。在 38 下，减压蒸发去除丙酮，残液（约 10 mL）转移至另一 50 mL 离心管中。依次用 10 mL 10 %氯化钠溶液和 15 mL 正己烷洗涤茄形瓶，洗涤液一并移入离心管中，振荡 3 min，于2500 r/min 离心 3 min，收集正己烷相。离心管中的水相中再用 15 mL 2 正己烷提取，合并正己烷相。 7.2 7.2 液液- -液分配净化液分配净化 正己烷相中加入适量无水硫酸钠脱水，将正己烷相完全转移至另一 250 mL 茄形瓶中，于 50oC，减压蒸发至干。残余物用 5 mL 2 提取液溶解，一并转移至 50 mL 离心管中。加入 10 mL 3 提取液I，混匀、分层，乙腈相转移至另一 50 mL 离心管中。加入 10 mL 提取液，混匀、分层后弃去正己烷相，乙腈相转移至 100 mL 茄形瓶中，在 50 oC 下，减压蒸发至干，残余物用 5 mL 正己烷溶解。 7.3 7.3 固相萃取净化固相萃取净化 将上述正己烷溶液移入弗罗里硅土固相萃取柱中，液体过柱流速保持 0.5 d/sec，用 15 mL 正己烷-乙醚溶液润洗茄形瓶并转移至柱中进行洗脱， 流速为 1 d/sec， 收集全部洗脱液于定量试管中， 于 40 oC，在氮气流下吹至近干，加入正己烷溶解残渣并定容至 1.0 mL，供 GC-MS 测定。 7.4 7.4 测定测定 7.4.1 7.4.1 气相色谱参考条件气相色谱参考条件 a）色谱柱：HP-1701 MS, 30 m 0.25 mm (内径) 0.25 m（膜厚），或相当者； b）载气：氦气(纯度大于 99.999%)，流量:1.0 mL/min。 c）色谱柱程序升温条件：初始温度：70 （保持 1 min） ；15 /min，升温至 160 （保持 1 min） ； 2 /min 的速度，升温至 200 （保持 2 min） ；20 /min，升温至 280 （保持 8 min） 。 d）进样口温度：270 。 e）进样方式：不分流进样，1 min 后打开分流阀，分流比 100：1。 f）进样量：1 L； 7.4.2 7.4.2 质谱参考条件质谱参考条件 a）离子源温度：230 C b）传输线温度：280 c）离子化模式：EI d）扫描范围：50 - 400 amu GB 23200.12016 3 e）电子倍增管电压：自动调谐电压 200 V； f）测试方式：选择离子监测。 7.4.3 7.4.3 色谱色谱测定与确证测定与确证 7.4.3.1 定量测定 根据样液中除草剂含量情况， 选定峰面积相近的标准工作溶液， 标准工作溶液和样液中除草剂的响应值均应在仪器检测的线性范围内。 以单点或多点外标法定量， 标准工作液和样液应等体积参插进样测定。 7.4.3.2 定性测定 定性测定的两个依据为： （1）被测样品峰与标准样品峰的色谱保留时间相同； （2）被测样品与标准样品的质谱图相似，被测样品的监测离子的相对丰度应与标准样品一致，二者之差不大于 10 （EI模式） 。各除草剂的监测离子及定量离子参见附录 A。 在上述色谱、质谱条件下，毒草胺、莠去津、乙草胺、二甲吩草胺、甲草胺、嗪草酮、异丙甲草胺、敌稗、丁草胺、丙草胺、敌草胺的保留时间分别为 11.2 min、13.2 min、13.8 min、14.9 min、15.3 min、15.7 min、15.9 min、16.9 min、19.3 min、20.6 min、21.9 min。选择离子色谱图参见附录 B，质谱图参见附录 C 中 C1 至 C4。 7.5 7.5 空白实验空白实验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 8 8 结果计算和表述结果计算和表述 用色谱工作站或按下式（1）计算试样中除草剂的含量，计算结果须扣除空白值。 A c V X= （1） AS m 式中: X 试样中除草剂含量，mg/kg； A 试样中除草剂峰面积； AS标准溶液中除草剂峰面积； c 标准溶液浓度,mg/L； V 样品溶液最终定容体积，mL； m 样品称重，g。 注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。 9 9 精密度精密度 9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。 9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录 E 的要求。 10 10 定量限和回收率定量限和回收率 10.1 10.1 定量限定量限 毒草胺、莠去津、乙草胺、异丙甲草胺、丙草胺、敌草胺、二甲吩草胺、嗪草酮、敌稗的定量限为0.02 mg/kg; 甲草胺、丁草胺的定量限为 0.05 mg/kg。 10.2 10.2 回收率回收率 10.2.1 大米中除草剂添加浓度及其回收率的实验数据： 毒草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 90.3 % - 94.5 %; 莠去津添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 89.8 % - 95.5 %; 乙草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 84.5 % - 93.5 %; GB 23200.12016 4 二甲吩草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 84.5 % - 93.8 %; 甲草胺添加浓度为 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 83.7%- 93.9 %; 嗪草酮添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 88.3 % 95.6 %; 异丙甲草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 88.1 % - 93.8 %; 敌稗添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 83.7 % - 95.8 %; 丁草胺添加浓度为 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 76.8 % - 89.5 %; 丙草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 86.9 % - 97.5 %; 敌草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 94.2 % - 101.9 %。 10.2.2 大豆中除草剂添加浓度及其回收率的实验数据： 毒草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 78.1 % - 92.0 %; 莠去津添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 80.8 % - 92.8 %; 乙草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 80.8 % - 88.6 %; 二甲吩草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 78.7 % - 90.9 %; 甲草胺添加浓度为 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 76.1 % - 86.4 %; 嗪草酮添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 81.7 %91.5 %; 异丙甲草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 81.6 %90.3 %; 敌稗添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 82.9 % - 92.5 %; 丁草胺添加浓度为 0.05 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 72.8 % - 83.6 %; 丙草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 86.4 % - 92.7 %; 敌草胺添加浓度为 0.02 mg/kg - 2.0 mg/kg 范围内，回收率为 88.4 % - 96.0 %。 GB 23200.12016 5 附附 录录 A A （资料性附录）（资料性附录） 表表 A.1 除草剂的定量离子和监测离子除草剂的定量离子和监测离子 *为定量离子，对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。 中文名称 英文名称 CAS 号 分子式 分子量 监测离子，m/z 及其相对丰度 毒草胺 Propachlor 1918-16-7 C11H14ClNO 211.69 *120 （100） ， 176 （37） ， 196 （10） ，211（8） 莠去津 Atrazine 1912-24-9 C8H14ClN5 215.68 *200 （100） ， 215 （62） ， 172 （15） ，173（35） 乙草胺 Acetochlor 34256-82-1 C14H20ClNO2 269.80 *146 （100） ， 223 （53） ， 174 （48） ，162（83） 二甲吩草胺 Dimethenamid 87674-68-8 C12H18ClNO2S 275.79 154 （100） ， 203 （42） ， 230 （58） ，232（20） 甲草胺 Alachlor 15972-60-8 C14H20ClNO2 269.77 *160（100） ，188（93） ，237（24）,269(6) 嗪草酮 Metribuzin 21087-64-9 C8H14N4OS 214.28 *198（100） ，199(19), 144（14） ，214（4） 异丙甲草胺 Metolachlor, Acetamide 51218-45-2 C15H22ClNO2 283.79 *162（100） ，238（47） ，240(15), 211（7） 敌稗 Propanil 709-98-8 C9H9Cl2NO 218.08 *161 （100） ， 163 （71） ， 217 （18） , 219（12） 丁草胺 Butachlor 23184-66-9 C17H26ClNO2 311.85 *176（100） ，160（86） ，188（49）,237（27） 丙草胺 Pretilachlor 51218-49-6 C17H26ClNO2 311.85 162 （100） ， 202 （38） ，*238 （69） ，262（27） 敌草胺 Napropamide 15299-99-7 C17H21NO2 271.36 72 （100） ， 100 （39） ，*128 （63） ，271（26） GB 23200.12016 1 附附 录录 B B （资料性附录）（资料性附录） 标准品色谱图标准品色谱图 图图 B.1 B.1 酰胺除草剂标准混合液的酰胺除草剂标准混合液的SISSIS色谱图（浓度均为色谱图（浓度均为0.1 mg/L0.1 mg/L） 1.毒草胺毒草胺：11.2min；2.莠去津莠去津：13.2 min ；3.乙草胺乙草胺：13.8 min ；4.二甲吩草胺二甲吩草胺：14.9 min ；5.甲草胺甲草胺：15.3 min ；6.嗪草酮嗪草酮：15.7 min ；7.异丙甲草胺异丙甲草胺：15.9 min ；8.敌稗敌稗：16.9 min ；9.丁草胺丁草胺：19.3 min ；10.丙草胺丙草胺：20.6 min ；11.敌草胺敌草胺：21.9 min 。 GB 23200.12016 2 附录附录 C C （资料性附录）（资料性附录） 标准品质谱图标准品质谱图 图图C.1 C.1 毒草胺、莠去津和二甲吩草胺的毒草胺、莠去津和二甲吩草胺的SIMSIM质谱图质谱图 GB 23200.12016 3 图图C.2 C.2 嗪草酮、敌稗、乙草胺的嗪草酮、敌稗、乙草胺的SIMSIM质谱图质谱图 GB 23200.12016 4 图图C.3 C.3 丁草胺、甲草胺、异丙甲草胺的丁草胺、甲草胺、异丙甲草胺的SIMSIM质谱图质谱图 GB 23200.12016 5 图图C.4 C.4 丙草胺、丙草胺、敌草胺敌草胺的的SIMSIM质谱图质谱图 敌草胺 napropamide GB 23200.12016 6 附附 录录 D （规范性规范性附录）附录） 实验室内实验室内重复性要求重复性要求 表表 D.1 实验室内实验室内重复性要求重复性要求 被测组分含量被测组分含量 mg/kg 精密度精密度 % 0.001 36 0.0010.01 32 0.010.1 22 0.11 18 1 14 GB 23200.12016 7 附附 录录 E （规范性规范性附录）附录） 实验室间实验室间再现性要求再现性要求 表表 E.1 实验室间实验室间再现性要求再现性要求 被测组分含量被测组分含量 mg/kg 精密度精密度 % 0.001 54 0.0010.01 46 0.010.1 34 0.11 25 1 19