皂苷挥发油.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第三节 三萜皂苷成分分析,三萜皂苷的结构特征,三萜皂苷是由六个异戊二烯以头尾相接或尾尾相接而成，一般由,30,个碳原子组成。,可分为,五环三萜与四环三萜两类。,五环三萜,有齐墩果烷型（甘草次酸、柴胡皂苷元、桔梗皂苷元）、,四环三萜,大多具有环戊烷骈多氢菲的基本母核,有达玛烷型（人参二醇、三醇。酸枣仁皂苷元）,三萜皂苷大多无紫外吸收，,少数例外，如甘草酸、远志皂苷。,三萜皂苷分布：双子叶植物分布较普遍，有五加科、伞形科、夹竹桃科、萝摩科、菊科等。,单子叶植物较少，仅禾本科,裸子植物、低等植物也较少含有,常用的中药有：人参、三七、甘草、地榆、酸枣仁、紫菀、桔梗、商陆等。,皂苷的理化性质,1,、皂苷分子量较大，不易结晶，大多为无色或乳白色无定型粉末，而皂苷元大多有完好的结晶，,皂苷多数具有苦辛辣味，其粉末有强烈刺激性，大多具有吸湿性。,2,、,大多数皂苷极性较大，易溶于水、热甲醇和乙醇，难溶于丙酮、乙醚，在含水丁醇中有较大溶解度，常作为皂苷提取溶剂。,皂苷类成分的定性分析,（一）泡沫反应,（二）显色反应,（,1,）醋酐,-,浓硫酸反应,(,Libermann-Burchard,反应,):,（,2,）三氯醋酸反应,（,Rosen-,Heimer,反应,）,（,3,）氯仿,-,浓硫酸反应,（,Salkowski,反应,）,（,4,）冰醋酸,-,乙酰氯反应,(,Tschugaf,反应,),（,5,）五氯化锑反应,(,Kahlenberg,反应,),（,6,）香草醛,-,硫酸或高氯酸反应,（三）薄层色谱法,1,、,吸附剂的选择,皂苷：一般极性较大，用分配层析较好,常用吸附剂有硅胶、氧化铝、硅藻土,皂苷元：极性较小，吸附、分配薄层均可,常用硅胶,在应用硅胶和氧化铝时，有时为了分离的需要加入一定的硝酸银。这样可以将相似极性但在分子中带有不同数目双键或双键位置不同的化合物分开。,2,、展开剂的选择,（,1,）,化合物的分子结构与展开剂的极性,选择展开剂要考虑到分子中羟基、羧基或其它极性基团的数目多少和有无，极性基团数目越少越不易被吸附剂吸附，,Rf,值越大，因此在分离极性小的混合物时就不能用极性大的展开剂。,（,2,）,化合物的酸碱性,当化合物具有酸性或碱性时，使用中性的溶剂系统往往产生拖尾或分离不好，当化合物具有酸性时，在展开系统中加入少量酸就能得到很好的分离。,（,3,）,展开剂中极性溶剂的量对,Rf,值的影响,皂苷常用溶剂系统有,：氯仿,-,甲醇,-,水（,13,：,7,：,2,下层）、水饱和的正丁醇、正丁醇,-,乙酸乙酯,-,水（,4,：,1,：,5,）、氯仿,-,甲醇（,7,：,3,）、正丁醇,-,乙酸,-,水（,4,：,1,：,5,上层）,皂苷元常用溶剂系统有：,环已烷,-,乙酸乙酯（,1,：,1,）、苯,-,乙酸乙酯（,1,：,1,）、氯仿,-,乙酸乙酯（,1,：,1,）、氯仿,-,丙酮（,19,：,1,）、氯仿,-,乙醚（,1,：,1,）,3,、,显色剂的选择,(,1)25,磷钼酸乙醇溶液,：,(2),三氯化锑的浓盐酸或氯仿溶液,：,(3),硫酸,-,甲醇,(11),：,(4),氯磺酸,-,乙酸,(12),溶液,：,(5),碘蒸气,：,其它常用显色剂有,三氯醋酸、浓硫酸、,50%,及,20%,硫酸乙醇、浓硫酸,-,醋酸酐、香草醛,-,浓硫酸等,四、,皂苷类成分的定量分析,薄层色谱法、比色法、高效液相色谱法,皂苷类成分的定量分析可分为,总皂苷测定、皂苷元测定和单体皂苷测定,总皂苷测定,：提取可用各种浓度的甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇、戊醇。分离可用水饱和的正丁醇萃取、大孔树脂洗脱。测定最常用的有比色法、重量法。,皂苷元的测定,：可用总皂苷加酸水解或将样品先水解再用有机溶剂提取皂苷元。测定有薄层色谱法、高效液相色谱法、比色法。,单体皂苷的测定,：有薄层色谱法、高效液相色谱法（需要有单体皂苷对照品比较）。,比色法,皂苷类成分加入适当显色剂，如浓硫酸、高氯酸、香草醛,-,冰醋酸等，使其呈色，于可见光区进行比色测定或用紫外分光光度法测定样品中总皂苷或总皂苷元的含量,浓硫酸,硫酸,-,醋酐、硫酸,-,冰醋酸试剂,芳香醛,-,硫酸或芳香醛,-,高氯酸,对,-,二甲氨基苯甲醛,常用显色剂,薄层色谱法,可排除其他组分的干扰，常用于测定中药制剂中的皂苷元或单体皂苷，定量方法有斑点面积法、薄层洗脱,-,比色法、薄层扫描法。,高 效 液 相 色 谱 法,第五节 含挥发性成分制剂的分析,挥发性成分：中药中一类具有芳香气并易挥发的成分,包括挥发油类成分及其它分子量较小、易挥发的化合物。,挥发油的概念、分布,概念：是指存在于植物体中一类可随水蒸气蒸馏得到的与水不相混溶的油状液体。它们在常温下能挥发，大部分具有香气。,分布：,主要存在于植物的花蕾、茎、叶及根茎中。,含挥发油较丰富的有,木兰科,（如,辛夷、厚朴、八角茴香、五味子）,樟科（肉桂,、樟、乌药）,芸香科（如橙、桔、枳实、吴茱萸、,降香、花椒）,伞形科（防风、白芷、川芎、当归、,）,唇形科（薄荷、藿香,、紫苏、荆芥、香糯）,含 量 特 点：,1,、同一品种不同生长环境或采收季节其含量和品质（包括成分、香气等）有显著差异,全草类药材一般以开花前期或含苞待放之时含量最高如薄荷、紫苏、荆芥、藿香等。而根、根茎类以秋天成熟后，含量高。,2,、同一植物不同部位含量也不同,3,、同一植物的药用部位不同其含量也有差异,其它挥发性成分：,一些小分子化合物如,冰片、樟脑,。,多为结晶性固体,挥发油的性质,（,3,）,在常温下可以挥发，与脂肪油区别,：,当把挥发油涂在纸片上经挥散后不留下持久性的油斑。而且挥发油能随水蒸气挥发而不分解,（,4,）,可溶于浓乙醇及多数有机溶媒,（如乙醚、氯仿及脂肪油中），能完全溶于无水乙醇中，极难溶于水,（,5,）,各种挥发油的折光率各不相同，,折光率通常在,1.43-1.61,之间。,在一定情况下挥发油中如有杂质存在，折光率就会有所改变,（,6,）,不同的挥发油具有各自的旋光度,（,7,）,挥发油暴露于空气和日光下逐渐氧化变质而分解，致使其比重增加，颜色变深，甚至树脂化,（萜类的聚合、氧化等）生成具有不愉快臭味的化合物，同时失去挥发性，因此挥发油应,装于棕色瓶内，密闭、低温、避光保存,（,9,）,由于挥发油是混合物，不同的成分其沸点不同，故可利用此性质纯化,挥发油的提取方法,水蒸气蒸馏法、浸取法,水蒸气蒸馏：挥发油通常可用水蒸气蒸馏法提取，收集馏水液，放冷后，挥发油即浮于上层，下层的水液加入氯化钠饱和，原溶解于水中的少量挥发油又可析出。,二、挥发油的定性分析,（一）化学反应法,含双键的萜类成分能与氢卤酸起加成反应,内酯类挥发油与羟胺反应成羟肟酸，与三氯化铁呈色,含不饱和挥发油可用高锰酸钾氧化呈色,酚类：加三氯化铁试剂，呈兰色、蓝紫色或绿色；,羰基化合物：银镜反应、苯肼及苯肼衍生物、氨基脲、羟胺等反应,（二）薄层色谱法,挥发油中各化合物极性顺序,烃（萜）,醚,酯,醛、酮,醇、酚,酸,固定相：硅胶、氧化铝、硝酸银,展开系统选择：最常用的有正己烷、石油醚，另外也有苯、乙醚、四氯化碳、氯仿、乙酸乙酯及混合展开剂,薄层显色剂,茴香醛,-,浓硫酸试剂,：喷后,105,加热，挥发油中各成分显不同颜色。,异羟肟酸铁试剂,：斑点显淡红色，可能是酯和内酯。,2,，,4-,二硝基苯肼试剂,：如产生荧色斑点，则表明含醛或酮类化合物。,三氯化铁试剂,：斑点显绿色或蓝色，可能是酚性化合物。,（三）、气相色谱法,三、挥发油的定量分析,（一）气相色谱,色谱柱的选择,：,可用填充柱，也可用毛细管柱（分离效果更好）,担体基本都用白色担体，并经硅烷化,固定相的选择,：,1,、非极性的饱和烃润滑油类，如角鲨烷、阿皮松、硅酮类、甲基硅油等。,利用各成分沸点的差异而分离，对沸点相近的单萜类成分分离较差。,2,、极性固定相,聚酯类的,FFAP,、,HZ-HFF-8BP,，温度,可达,250,度,聚乙二醇类的高聚体，温度可达,280,度,柱温的选择,：,单萜类可在,130,度或低于,130,的柱温下进行层析,倍半萜烃类在,170-180,度或更高一些温度,含氧萜烃类一般要求在,130-190,度,检测器的选择,：,氢焰离子化检测器,FID,定量方法：,（二）、薄层色谱法,