G 蛋白偶联受体介导的信号通路.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,G,蛋白偶联受体介导的信号通路,我自己做的，呜呜,什么是生命活动,?,贝时璋教授,:,根据生物物理学的观点,无非是自然界三个量综合运动的表现,即物质、能量和信息在生命系统中无时无刻地在变化,这三个量有组织、有秩序的活动是生命的基础。信息流起着调节控制物质和能量代谢的作用。,薛定谔,:“,生命的基本问题是信息问题”,细胞不是孤立的生活，它与周围环境与细胞除了物质、能量的交换外，还有对信号的接收和处理。细胞的基因表达及增殖、分化、生长、衰老、死亡、代谢、神经传导、免疫等基本生命活动都与细胞信号转导有关，对细胞信号转导的研究，有利于了解基因调控网络，继而揭示基因活动与细胞行为之间的关系。细胞信号转导是当前分子生物学中三大研究内容之一。,信息与信号,信息与“不确定”相联系,信息是认识主体（人、生物、机器）所感受的或所表达的事物运动的状态和运动状态变化的方式。信息的特征为：（,1,）接收者在收到信息之前，对它的内容是不知道的，所以信息是新知识、新内容。（,2,）信息是能使认识某一事物的未知性或不确定性减少的有用知识（,3,）信息可以产生。也可以消失。同时信息可以被携带、贮存及处理（,4,）信息是可以量度的，信息量有多少的差别。,信号是信息的载体，它是物理性的。,G,蛋白偶联受体介导的信号传导系统,G,蛋白偶联受体的信号转导途径由四部分组成：,a,细胞膜受体,b G,蛋白,c,第二信使,d,效应物,受体及跨膜信号转换,受体的定义：,是细胞表面或亚细胞组分中的一种分子，可以识别并特异地与有生物活性的化学信号物质（配体）结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。,两个功能：,1,、识别特异的配体；,2,、把识别和接受的信号准确无误的放大并传递到细胞内部，产生特定的细胞反应。,结合特点,1,、同一配体可能有两种或两种以上的不同受体,2,、配体与受体结合的饱和性,受体数目恒定；但是相对的,细胞膜受体分类,胞内受体：甾类激素,细胞表面受体：水溶性多肽激素,G,蛋白耦联受体家族：肾上腺素受体、多巴受体、视紫红蛋白,酪氨酸激酶受体家族：多数生长因子受体,(,如,IGF,，,EGF,，,PDGF,，,NGF,，,SCF,，,HGF,等生长因子的受体,),，除胰岛素受体外，这类受体均由一条肽链组成,细胞因子受体家族,离子通道受体,:,神经突触，如,ACH,，,5-HT,受体,G,蛋白偶联型受体,如,2,与,肾上腺素受体，毒蕈碱型乙酰胆碱受体（,mAchR,）和视网膜视紫红质,(,Rh,),受体等,与,G,蛋白偶联后产生胞内信使如,cAMP,、,cGMP,、,DG,、,IP3,等，将信号传导胞内。,典型结构：一个单肽链，形成,7,个,螺旋的跨膜结构，每个疏水跨膜区段由,2025,个氨基酸组成，但各区段之间由数目不等的氨基酸组成的环状结构连接，其中,1-2,，,3-4,，,5-6,环在胞内侧,2-3,，,4-5,，,6-7,环在胞外侧。,N,端由,30-50,个氨基酸组成，位于胞外侧，,C,端氨基酸残基相差很大，位于胞内侧。,跨膜信号转导过程包括：,胞外信号被质膜上的特异性受体蛋白识别，受体被活化；,通过胞内信号转导物,(,蛋白激酶，第二信使等,),的相互作用传递信号；,信号导致效应物蛋白的活化，引发细胞应答，如激活核内转录因子（调节基因表达）。,G,蛋白,G-,蛋白,(G-protein),是一种鸟苷酸结合蛋白，是由,、,和,三个亚基组成的异三聚体，,和,亚基总是紧密结合在一起作为一个功能单位,G,G-,蛋白介导的信号转导的机制：,G-,蛋白循环。,G,亚基可分为,Gs,Go,Gi,Gq,等，其活性可被霍乱毒素（,CT,）或百日咳毒素（,PT,）修饰。,G-pr,的效应物：离子通道、腺苷酸环化酶、磷脂酶,C,、磷脂酶,A2,等,G,蛋白的基本结构,G,蛋白的基本结构：,100kD,左右，由,、,、,三种亚基组成，在天然电泳中,与,仍紧密结合在一起。,亚基分子量在,39-46kD,之间，差别最大，被用作,G,蛋白的分类依据。其共同的特点是，具有一个,GTP,结合位点，本身具有,GTP,酶的活性，即可以把,GTP,水解成,GDP,和无机磷酸；在某些,G,蛋白的,亚基上，有些特殊的氨基酸（,Arg,或,Cys,）残基可被特定的细胞毒素所修饰，从而调节其生理功能。在一级结构中有几个高度保守的结构域，即,P,区域、,G,区域和,G,区域。,P,与,G,区域都与,GTP,结合及,GTP,酶活力有关，,G,区域则与,GTP,结合，并与腺苷酸环化酶相互作用有关。另外，与受体接触的是,G,的,C,端的,螺旋等。,亚基分子量为,36kD,左右，各种,G,蛋白的,亚基在肽图和免疫化学特性及氨基酸序列方面很相似，,亚基分子量在,7-8kD,之间，各种,G,蛋白之间,亚基也比较相似但个别的也有些区别；它与,亚基非共价紧密结合。,细胞内信使（,intracellular messenger,）,cAMP,cGMP,IP3,和,DAG,Ca,2+,NO,第二信使,细胞内信使一般具有以下三个特点：,(1),多为小分子，且不位于能量代谢途径的中心；,(2),在细胞中的浓度或分布可以迅速地改变；,(3),作为变构效应剂可作用于相应的靶分子，已知的靶分子主要为各种蛋白激酶。,G,蛋白在结构上没有跨膜蛋白的特点，它们能够固定于细胞膜内侧，主要是通过对起亚基上氨基酸残基的脂化修饰作用，这些修饰作用把,G,蛋白锚定在细胞膜上。能够激活腺苷酸环化酶的,G,蛋白称为,Gs,对该酶有抑制作用的称为,Gi,。当,Gs,处于非活化态时，为异三聚体，,亚基上结合着,GDP,，此时受体及环化酶亦无活性；激素配体与受体结合后导致受体构象改变，其上与,Gs,结合位点暴露，受体与,Gs,在膜上扩散导致两者结合，形成受体,-Gs,复合体后，,Gs,亚基构象改变，排斥,GDP,，结合了,GTP,而活化，,亚基从而与,亚基解离，同时暴露出与环化酶结合位点；,亚基与环化酶结合而使后者活化，利用,ATP,生成,cAMP,；一段时间后，,亚基上的,GTP,酶活性使结合的,GTP,水解为,GDP,亚基恢复最初构象，从而与环化酶分离，环化酶活化终止，,亚基从新与,亚基复合体结合。重复此过程。,在上述模型中，,Gs,穿梭于膜上两个蛋白质,-,受体与腺苷酸环化酶之间，起了一个信号传递者的作用，而,Gs,上结合,GTP-GDP,循环在激活,-,灭活环化酶中起了关键作用。,激素配体与,G,蛋白偶联受体结合后导致受体构象改变，其上与,Gs,结合位点暴露，受体与,Gs,在膜上扩散导致两者结合，形成受体,-Gs,复合体后，,Gs,亚基构象改变，排斥,GDP,，结合了,GTP,而活化，,亚基从而与,亚基解离，同时暴露出与环化酶结合位点；,亚基与环化酶结合而使后者活化，利用,ATP,生成,cAMP,。,cAMP,产生后，与依赖,cAMP,的蛋白激酶（,PKA,）的调节亚基结合，并使,PKA,的调节亚基和催化亚基分离，活化催化亚基，催化亚基将代谢途径中的一些靶蛋白中的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化，将其激活或钝化。这些被磷酸化共价修饰的靶蛋白往往是一些关键调节酶或重要功能蛋白，因而可以介导胞外信号，调节细胞反应。,信号传导的终止是依赖于,cAMP,信号的减少完成的。在,G,蛋白活化一段时间后，,亚基上的,GTP,酶活性使结合的,GTP,水解为,GDP,亚基恢复最初构象，从而与环化酶分离，环化酶活化终止，,亚基从新与,亚基复合体结合。这样减少了,cAMP,的产生，同时,cAMP,的磷酸二酯酶（,PDE,）的催化下降解生成,5-AMP,。当,cAMP,信号终止后，靶蛋白的活性则在蛋白质脱磷酸化作用下恢复原状。,谢谢欣赏！,