资源描述
2026年山东省东营市河口区一中高三生物试题教学情况调查(一)生物试题
注意事项:
1.答卷前,考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型(B)填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。
2.作答选择题时,选出每小题答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑;如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。
3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答,答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上;如需改动,先划掉原来的答案,然后再写上新答案;不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。
4.考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后,请将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)
1.下列有关动物或人体生命活动调节的叙述,正确的是( )
A.正常人大量饮用水后,胃肠腔内渗透压下降,抗利尿激素分泌减少
B.寒冷环境中,机体通过增强细胞代谢和收缩毛细血管来增加产热
C.花粉等作为过敏原引发的免疫反应,不具有一定的特异性、记忆性
D.胰岛素随体液运输与靶细胞结合后直接参与细胞内多种生命活动
2.下列有关生命现象及其生物学意义的叙述,不正确的是( )
A.明显缩短DNA 分子复制所需要的时间主要是依靠半保留复制方式
B.基因突变、基因重组和染色体变异都可为生物进化提供原材料
C.捕食者捕食个体数量多的物种,能避免生态系统中出现占绝对优势的物种
D.高等动物体内性激素的分泌存在负反馈调节,能使性激素的含量不至于过高
3.下列关于生物进化的叙述,正确的是( )
A.种群间的双向迁移,会使种群间的遗传差异变大
B.只要种群的个体间存在变异,自然选择就发生作用
C.生物界在类型上具有多样性,模式上具有统一性
D.达尔文在自然选择的基础上发现了人工选择
4.下列关于免疫细胞或免疫过程的叙述,正确的是( )
A.牛痘病毒进入人体能诱发出抵抗天花病毒的免疫力
B.巨噬细胞呈递抗原时需要将抗原降解成抗原-MHC复合体
C.B淋巴细胞的致敏需要来自辅助性T细胞的白细胞介素-2刺激
D.效应细胞毒性T细胞发挥免疫作用后脱分化为细胞毒性T细胞
5.科罗拉多大峡谷中的松鼠被一条河流分隔成两个种群,经过长期演化已经形成两个物种,演化过程如图,相关叙述错误的是( )
A.a 表示地理隔离,b 表示自然选择使种群的基因频率定向改变,c 表示生殖隔离
B.自然界中物种的形成只能通过 a 到达 c
C.①~⑥的存在说明变异是不定向的
D.物种 1 和物种 2 的基因库不同
6.猫叫综合征是第5号染色体短臂上缺失一段染色体片段引起的变异。该变异属于
A.基因突变 B.基因重组 C.染色体结构变异 D.染色体数目变异
二、综合题:本大题共4小题
7.(9分)回答下列I、II两小题。
I.抗虫的转基因植物,含有Bt蛋白,也叫毒蛋白,Bt蛋白本身其实没有任何毒性,但是鳞翅目幼虫的肠道壁上有一种特别的蛋白,喜欢与Bt蛋白结合,引起肠道壁穿孔,导致幼虫死亡。
注: Cef, Carb 抑菌类抗生素
(1)抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关,用________________ 作为抗原,通过制备________________ 作为特异探针,对Bt蛋白表达进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有________________ 和________________ 等。
(2)在农杆菌转化过程中,防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后,转化组织需要________________ 处理,据图分析,选择抗生素的________________ 很关键。光电比色法可用于细菌细胞密度的吸光值的测定,OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比,通常用于细菌细胞密度(OD600)测量;在测量过程中要保持溶液中的细菌处于____状态。 如图可知,________________ (填Cef或Carb)在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。
II.回答与泡菜制作有关的问题:
(1)泡菜发酵过程中的主要菌种是________________, 在________________ 条件下,微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、________________ 和________________ 等。
(2)在泡菜制作过程中________________ ,________________ 两部操作主要是为了减少杂菌,还可以采用________________ ,________________ 两种方法缩短腌制时间。
8.(10分)神经纤毛蛋白-1(NRP-1)能在肿瘤细胞内表达,是血管内皮生长因子家族成员的受体,通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。研究人员从肿瘤细胞中扩增出NRP-1基因并将其导入大肠杆菌体内进行发酵培养,分离提纯相应NRP-1,并将其免疫小鼠,以制备抗NRP-1的单克隆抗体(NRP-1MAb)。分析回答下列回题:
(1)利用PCR技术可以从肿瘤细胞的基因组中分离扩增得到完整的NRP基因,其原因是__________。将扩增后的目的基因构建成表达载体后,导入用__________处理的大肠杆菌体内完成转化。
(2)研究人员将分离提纯的NRP-1免疫小鼠后,取其脾脏中B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用特定的选择培养基进行筛选,在该培养基上不能存活的是__________。选取检测抗体阳性的杂交瘤细胞进行体外培养时需要的气体环境是__________。
(3)为进一步确定NRP-1MAb靶向治疗时的用药方式,研究人员将直肠癌组织块制成单细胞悬液,等量注入4组裸鼠右前腋下,接种3后天开始向培养液中施加NRP-1MAb药物,每隔10天给药1次,共4次。给药后测算一次肿瘤体积,结果如下图所示:
分析上图可以得出的结论是__________。根据实验结果,请给出使用NRP-1MAb进行靶向治疗癌症时的临床建议:__________。
9.(10分)人类甲病和乙病均为单基因遗传病, 并且分别由B、b和A、a两对等位基因控制,(不考虑同源染色体的交叉互换)某家族遗传家系图如下, 其中一个为伴性遗传病,回答以下相关问题。
(1)根据该遗传系谱图分析,甲病和,乙病的遗传方式为___________________,_________________________。
(2)在遗传系谱图中I3、Ⅱ2、Ⅱ3、Ⅲ7 的基因型分别为_____________、_____________、_____________、_________。
(3)Ⅱ3与Ⅱ4的后代中理论上共有_______种基因型和________种表现型。
(4)假设Ⅱ1 为甲病的携带者,Ⅱ1与Ⅱ2 再生一个同时患两种病男孩的概率为________________
(5)在Ⅱ3与Ⅱ4的后代个体中基因b的频率为_____________。
10.(10分)下图为夏季晴朗的一天,生长状况相同的油桃在露天和温室大棚两种种植模式下的净光合速率 (P0)变化曲线图。请据图分析回答下列问题:
(l)c点时,油桃叶肉细胞中产生ATP的场所有____mn段,油桃体内的有机物 ___(填“增多”“减少”或“不变”),理由是____。
(2)bc段、ef段、mn段和op段的净光合速率均下降,从光合作用过程分析,其中下降原因相同的是_________。
(3)7时~8时,ab段光合速率上升得比曲段快的原因主要为 ___。
11.(15分)番茄红素具有一定的药用价值,但普通番茄合成的番茄红素易发生转化(如图甲),科学家设计了一种重组DNA(质粒三),该DNA能表达出双链RNA(发卡),番茄细胞能识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解,从而提高果实中番茄红素的含量(如图乙)。请分析回答下列问题:
(1)在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技术,该技术的原理是________________________。
(2)根据图甲推知,转录出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的________________基因,上述过程通过阻止该基因在细胞内的_______________(填“转录”或“翻译”),提高了果实中番茄红素的含量。
(3)为保证图中的片段A反向连接,处理已开环质粒所用的两种限制酶是______________________。
(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________,该DNA分子仍可以和目的基因连接,形成缺少___________个磷酸二酯键的重组质粒,随后在细胞中被修复。
(5)可利用___________________法将质粒三导入植物细胞。
参考答案
一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)
1、A
【解析】
体温调节的过程是产热量等于散热量,是神经调节和体液调节共同作用的结果,其中参与调节的激素主要是甲状腺激素和肾上腺素;无机盐调节也是神经调节和体液调节共同作用的结果,其中参与调节的主要激素是抗利尿激素;过敏反应属于体液免疫,有抗体和记忆细胞的产生;激素既不作为细胞结构,也不能参与细胞内多种生命活动,只是调节细胞代谢活动。
【详解】
A、当正常人大量饮用水后,胃肠腔内渗透压下降,经胃肠吸收进入血浆的水量增多,血浆渗透压降低,抗利尿激素分泌减少,A正确;
B、毛细血管收缩可以减少散热,而非增加产热的途径,B错误;
C、过敏反应属于非首次免疫,是特异性免疫,机体对过敏原具有记忆性,C错误;
D、胰岛素等激素既不作为细胞结构,也不能参与细胞内多种生命活动,D错误。
故选A。
激素的作用特点:微量高效,随体液运输,作用于靶细胞、靶器官。
2、A
【解析】
生命现象的正常高效进行与反馈调节、多种种间关系等有密切关系。
【详解】
A、半保留复制方式可以保证亲子代间遗传物质的连续性,DNA多起点复制缩短了复制所需要的时间,A错误;
B、可遗传变异(基因突变、基因重组和染色体变异)可为生物提供进化的原材料,B正确;
C、捕食者往往捕食个体数量多的物种,因此捕食者的捕食对被捕食种群的发展起促进作用,能避免生态系统中出现占绝对优势的物种,C正确;
D、当高等动物体内性激素含量偏高时,可通过负反馈调节使性激素水平降低,以保证性激素的含量不至于过高,D正确。
故选A。
解答此题需熟悉常见的生命活动活动及其调节过程和机制,并能结合选项分析作答。
3、C
【解析】
现代生物进化理论认为:生物进化的单位是种群,生物进化的实质是种群基因频率的改变,引起生物进化的因素包括突变、自然选择、迁入和迁出、非随机交配、遗传漂变等;可遗传变异为生物进化提供原材料,可遗传变异包括基因突变、染色体变异、基因重组,基因突变和染色体变异统称为突变;自然选择决定生物进化的方向;隔离导致新物种的形成。
【详解】
A、种群之间的双向迁移,即种群间互有迁出和迁入,会弓|起种群间遗传差异的减少,种群内变异量增大,A错误;
B、只有个体的变异性状影响了个体的存活和繁殖,自然选择才会发生作用,B错误;
C、生物界在类型上具有多样性,模式上具有统一性,C正确;
D、达尔文的自然选择学说研究的是自然条件对生物的选择,达尔文并没有研究人工选择的作用,D错误。
故选C。
4、A
【解析】
免疫接种或预防接种是以诱发机体免疫应答为目的,预防某种传染性疾病的方法。18 世纪,詹纳用接种牛痘来预防天花。牛痘病毒能在人体内诱发出抵抗天花病毒的免疫力。现有的疫苗有三种类型:①灭活的微生物;②分离的微生物成分或其产物;③减毒的微生物。这三类疫苗通过注射或口服进入体内,使体内产生初次免疫应答,再次接种则引发二次免疫应答。两次或更多次数的接种可以使机体产生更多的效应细胞和记忆细胞,提供对相关疾病的长期保护。这种免疫方式称为主动免疫。 另一种免疫方式是被动免疫,就是通过接种针对某种病原体的抗体(抗血清)而获得免疫力。
【详解】
A、由分析可知,牛痘病毒进入人体能诱发出抵抗天花病毒的免疫力,A正确;
B、巨噬细胞吞噬入侵的病原体并将它们消化,病原体上的抗原分子被降解成肽,然后与巨噬细胞的 MHC蛋白结合,形成抗原—MHC复合体,然后这种复合体移动到细胞的表面呈递出来,B错误;
C、当B淋巴细胞的受体分子两臂遇到相应的抗原并将它锁定在结合位点后,这个B淋巴细胞便被致敏了,同时还需要来自活化的辅助性T细胞的白细胞介素-2刺激,以促进致敏B淋巴细胞分裂,C错误;
D、效应细胞毒性T细胞发挥免疫作用后不会脱分化为细胞毒性T细胞,D错误。
故选A。
5、B
【解析】
分析题图可知,a表示地理隔离,阻断种群间的基因交流,b表示自然选择,c表示生殖隔离,生殖隔离是新物种产生的标志;①~⑥表示物种形成的过程中产生的不定向变异。
【详解】
A、根据题图可知,a表示地理隔离,b表示自然选择,c表示生殖隔离,A正确;
B、自然界中物种的形成大部分是通过地理隔离再形成生殖隔离,但也存在例如环境变化导致产生的多倍体,则没有经过地理隔离而产生了生殖隔离,B错误;
C、①~⑥的变异主要来源于基因突变、染色体变异和基因重组,是不定向的,C正确;
D、物种1和物种2是原物种因地理隔离最终导致生殖隔离形成的,基因库不同,D正确;
故选B。
6、C
【解析】
生物的变异包括可遗传变异和不可遗传的变异,可遗传变异,遗传物质发生了改变,包括基因突变,基因重组和染色体变异,不可遗传的变异是指生物的性状发生改变,但是遗传物质并没有发生改变。
【详解】
基因突变是指基因的结构发生改变,染色体没有变化,A错误;基因重组是指控制不同性状的基因重新组合,染色体结构不变,B错误;染色体结构的变异包括染色体片段的增添、重复、易位和倒位,C正确;猫叫综合征是第5号染色体短臂上缺失,染色体数目没有改变,D错误。
染色体变异包括染色体结构的变异和染色体数目的变异,结构的变异包括染色体片段的缺失、重复、易位和倒位,染色体数目的变异包括个别染色体数目的增加或者减少,也包括染色体组成倍的增加和减少。
二、综合题:本大题共4小题
7、Bt蛋白 单克隆抗体 农秆菌转化法 基因枪法 脱菌 种类和浓度 悬浮 Carb 假丝酵母和乳酸菌 无氧 醇类物质 亚硝酸(HNO2) 热水洗坛壁两次 加白酒 入坛前用开水浸泡一下蔬菜 加入腌制过的泡菜汁
【解析】
1.光电比色法是通过测量菌悬液的光密度(OD600)值来估算细菌数,吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比。据图可知,浓度为300mg/L时两种抗生素都可以完全抑制农杆菌的生长,所以头孢霉素(Cef)和羧苄青霉素(Carb)对农杆菌都有很好的抑制效果。
2.基因工程的基本操作程序有四步:①目的基因的获取,②基因表达载体的构建,③将目的基因导入受体细胞,④目的基因的检测与鉴定。
3. 制作泡菜的实验原理:
(1)乳酸菌在无氧条件下,将糖分解为乳酸。
(2)利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。
温度过高,食盐用量不足10%、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后,亚硝酸盐的含量开始下降。
(3)测定亚硝酸盐含量的原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料,与已知浓度的标准显色液目测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】
I.(1)抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关,可用Bt蛋白作为抗原,通过制备单克隆抗体作为特异探针,利用抗原-抗体杂交方法对Bt蛋白表达量进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和基因枪法等。
(2)在农杆菌转化过程中,防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后,转化组织需要脱菌处理,选择合适的抗生素和使用的抗生素浓度是实验成败的关键。光比色法可用于细菌细胞密度的测定,在测量过程中要保持溶液中的细菌处于悬浮状态。分析图示可知,Cef(头孢霉素)和Carb(羧苄霉素)两种抗生素对农杆菌有很好的抑制效果;当Carb浓度为50mg/L时,OD600几乎降为0,即细菌细胞数目为0,说明抗生素Carb浓度为50mg/L时可以完全抑制农杆菌的生长,Carb在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。
II.(1)泡菜发酵过程中的主要菌种是假丝酵母和乳酸菌; 在无氧条件下,微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、醇类物质和亚硝酸(HNO2)等。
(2)在泡菜制作过程中热水洗坛壁两次(去除杂菌)、加白酒(抑制杂菌生长)两部操作主要是为了减少杂菌污染;还可以采用入坛前用开水浸泡一下蔬菜(杀死植物细胞)、加入腌制过的泡菜汁(可以提供菌种)两种方法缩短腌制时间。
本题考查基因工程及泡菜制作的相关知识,要求考生识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各操作步骤中需要注意的细节问题;了解基因工程技术的相关应用和泡菜制作的应用,能结合所学的知识准确作答。
8、使用与NRP-1基因两端特异性结合的引物可以从模板DNA中扩增出该基因 Ca2+ 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 95%的空气和5%的CO2 NRP-1MAb能有效的降低肿瘤的体积,中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著 使用中剂量给药
【解析】
1、利用PCR技术扩增目的基因时,由于DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链,因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增;引物I延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合,进行DNA的延伸,这样,DNA聚合酶能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列。
2、分析图可知,实验组与对照组比较,NRP-1MAb能有效的降低肿瘤的体积;低、中、高剂量组比较可知,中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著。
【详解】
(1)由分析可知,使用与NRP-1基因两端特异性结合的引物,可以从模板DNA中扩增出处于两个引物之间的该基因。将目的基因导入大肠杆菌,最常用的转化方法是,用Ca2+处理细胞使其处于感受态。
(2)用特定的选择培养基进行筛选,在该培养基上不能存活的是B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B淋巴细胞与B淋巴细胞融合的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞。进行动物细胞培养时,通常将培养基放置于95%的空气和5%的CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
(3)由图示可以看出,与对照组比较,NRP-1MAb能有效的降低肿瘤的体积;低、中、高剂量组比较可知,中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著,因此使用NRP-1MAb进行靶向治疗癌症时采用中剂量给药,用药量少,效果明显。
本题考查PCR扩增目的基因和单克隆抗体的相关知识,要求考生识记PCR技术的原理、动物细胞培养的条件;识记制备单克隆抗体的原理及过程,能结合所学的知识准确答题。
9、X染色体隐性遗传 常染色体隐性遗传 aaXBXB/aaXBXb AaXbY AaXBXb AaXbY 8 4
【解析】
根据题意和图示分析可知:
分析乙病:由于Ⅱ1和Ⅱ2个体不患乙病,而Ⅲ1患乙病,所以乙病为隐性遗传病,又由于Ⅲ1患乙病,而父亲不患乙病,故乙病为常染色体隐性遗传病(用A、a表示)。
分析甲病:Ⅱ3与Ⅱ4没有甲病而儿子Ⅲ7患甲病,说明甲病为隐性遗传病,又由于题干信息判断甲、乙病中“其中一个为伴性遗传病”,故甲病为伴X隐性遗传病(用B、b表示)。
【详解】
(1)根据该遗传系谱图分析,由于Ⅱ1和Ⅱ2个体不患乙病,而Ⅲ1患乙病,所以乙病为为常染色体隐性遗传病,Ⅱ3与Ⅱ4没有甲病而儿子Ⅲ7患甲病,说明甲病为隐性遗传病,又由于题干信息判断甲、乙病中“其中一个为伴性遗传病”,故甲病为伴X隐性遗传病;(2)I3患乙病不患甲病,其基因型为aaXBXB/aaXBXb,Ⅱ2患甲病不患乙病,其女儿患乙病,则Ⅱ2基因型为AaXbY,Ⅱ3为正常女性,其女儿患乙病,儿子患甲病,所以Ⅱ3的基因型为AaXBXb、Ⅲ7 为患甲病男性,由于父亲Ⅱ4为患乙病男性(aaXBY),则Ⅲ7基因型为AaXbY;
(3)Ⅱ3与Ⅱ4(AaXBXb × aaXBY)的后代中理论上共有2×4=8种基因型和2×2
=4
种表现型;
(4)假设Ⅱ1 为甲病的携带者,有一个患乙病的女儿,则Ⅱ1基因型为AaXBXb,Ⅱ1与Ⅱ2 (AaXBXb × AaXbY)再生一个同时患两种病男孩的概率为×=;
(5)Ⅱ3与Ⅱ4(AaXBXb × aaXBY)共有XB、Xb、XB基因,其中基因b的频率为,后代个体中基因b的频率同样为。
本题考查遗传病方式的判断、概率的计算、基因的自由组合定律等相关知识,熟悉遗传系谱图准确判断遗传病的遗传方式是快速答题的关键。
10、细胞质基质、线粒体、叶绿体 增多 从m点到n点,油桃的净光合速率均大于0,有机物会逐渐积累 bc段和mn段,ef段和op段 该时间段内温室大棚中的温度比露天的高,随着光照强度增加,光合速率上升得快
【解析】
光合作用包括光反应阶段和暗反应阶段。
(1)光反应阶段在叶绿体囊状结构薄膜上进行,此过程必须有光、色素、化合作用的酶。具体反应步骤:①水的光解,水在光下分解成氧气和还原氢。②ATP生成,ADP与Pi接受光能变成ATP。此过程将光能变为ATP活跃的化学能。
(2)暗反应在叶绿体基质中进行,有光或无光均可进行,反应步骤:①二氧化碳的固定,二氧化碳与五碳化合物结合生成两个三碳化合物。②三碳化合物的还原,三碳化合物接受还原氢、酶、ATP生成有机物。此过程中ATP活跃的化学能转变成化合物中稳定的化学能。光反应为暗反应提供了[H]和ATP,[H]和ATP能够将三碳化合物还原形成有机物。
【详解】
(1)分析题意可知,c点时,叶肉细胞同时进行有氧呼吸和光合作用,此时产生ATP的场所有细胞质基质、线粒体、叶绿体。据题图可知,mn段,油桃的净光合速率均大于0,有机物逐渐积累、增多。
(2)bc段和mn段净光合速率下降都主要是CO2浓度降低导致的,ef段和op段净光合速率下降都主要是光照强度降低导致的。
(3)7时~8时,外界温度较低,影响了光合速率,而清晨温室大棚中温度较露天的要高,因此随着光照强度的增加,ab段比gh段光合速率上升快。
本题主要考查细胞呼吸和光合作用,考查学生的理解能力和综合运用能力。
11、PCR DNA双链复制 番茄红素环化酶 翻译 Ecl和BamH1 自身成环 2 农杆菌转化(或基因枪、花粉管通道)
【解析】
分析图一:番茄红素可以转化为胡萝卜素。
分析图二:图二位重组DNA(质粒三)的构建过程,该质粒能表达出双链RNA(发卡),番茄细胞可以识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解,提高了果实中番茄红素的含量。
【详解】
(1)在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用PCR技术,该技术的原理是DNA双链复制。
(2)根据图二可知,目的基因是番茄红素环化酶基因,因此表达出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的番茄红素环化酶基因;“发卡”能导致双链RNA、mRNA被降解,而mRNA为翻译的模板,因此“发卡”阻止了其在细胞内的翻译过程,所以提高了果实中番茄红素的含量。
(3)为保证第二个目的基因片段反向连接,应该用两种限制酶切割。由图可知,第二个目的基因片段两侧的限制酶识别序列为Ecl 和 BamHⅠ,因此处理已开环质粒所用的两种限制酶是Ecl 和BamHⅠ。
(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成环(自身环化);构建重组质粒三时,要用限制酶Ecl 和 BamHⅠ切割,这样会去除黏性末端最外侧缺少磷酸基团的脱氧核苷酸,因此形成的重组质粒缺少2个磷酸二酯键。
(5)将目的基因导入植物细胞,采用最多的方法是农杆菌转化法,因此可利用农杆菌转化法将质粒三导入植物细胞。
解答第(5)题,关键能理清将目的基因导入受体细胞的方法,总结如下:
1、将目的基因导入植物细胞,采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和 花粉管通道法等。
2、将目的基因导入动物细胞,最常用的方法是 显微注射技术。
3、将目的基因导入微生物细胞,最常用的原核细胞是 大肠杆菌,其转化方法是:先用 Ca2+处理细胞,使其成为 感受态细胞,再将 重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。
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