山西省永济中学2026年高三下学期期末联考生物试题试卷含解析.doc

山西省永济中学2026年高三下学期期末联考生物试题试卷
注意事项:
1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。
2．答题时请按要求用笔。
3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。
4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。
5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1．法囊藻（一种海水绿藻）细胞液成分与海水很不相同，二者离子浓度比较如下图。叙述正确的是（ ）

A．细胞膜的结构特点能保证细胞按照生命活动的需要主动选择吸收矿质离子
B．细胞内 K+和 Cl-含量较高，而 Ca2+和 Mg2+含量较低表明细胞对矿质离子的吸收具有选择性
C．Na+、K+、Cl-进入细胞及 Ca2+、Mg2+排出细胞的方式都是主动运输
D．细胞膜上载体蛋白的种类和数量是细胞内外离子浓度差异的根本原因
2．下图是反射弧的模式图（a、b、c、d、e表示反射弧的组成部分，I、Ⅱ表示突触的组成部分），说法正确的是

A．切断d、刺激b，不会引起效应器收缩
B．兴奋在结构c和结构b的传导速度相同
C．正常机体内兴奋在反射弧中的传导是单向的
D．II处发生的信号变化是电信号→化学信号→电信号
3．下列有关微生物培养的叙述，正确的是（ ）
A．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
B．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
C．纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养
D．观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征
4．甲图表示不同浓度生长素对某植物生长的影响，乙图表示将盆栽植物横放时植物的生长状况，下列分析正确的是（ ）

A．甲图示生长素的生理作用两重性，图乙中 b、c 点与图甲对应 P 值相同
B．乙图中茎的背地性与胚芽鞘的向光性中生长素的作用机理不同
C．乙图中根的向地生长与生长素分布不均有关，不能体现生长素的两重性
D．用不同浓度的生长素溶液处理扦插枝条，生根的数量有可能相同
5．某同学做了以下实验：取A、B两支试管，在A中加入煮熟的蚕豆子叶，B中加入发芽的蚕豆子叶。在两试管中分别加入亚甲基蓝溶液（亚甲基蓝氧化态为蓝色，还原态为无色），一段时间后倒出溶液，两试管中的子叶都呈蓝色。然后两试管分别加水淹没子叶，抽气，在水面覆盖适量石蜡油，适宜温度下保温一段时间后，A管子叶蓝色深度不变，B管子叶蓝色变浅。取出两管子叶放在滤纸上一段时间，A管子叶蓝色深度不变，B管子叶蓝色深度一定程度恢复。下列分析不合理的是（ ）
A．该实验中抽气并在水面覆盖适量石蜡油的目的是隔绝空气，制造无氧环境
B．保温后A管子叶蓝色深度不变的原因是高温导致酶失活，细胞无呼吸作用
C．保温后B管子叶蓝色变浅的原因是亚甲基蓝被无氧呼吸产生的[H]还原
D．滤纸上B管子叶蓝色深度恢复的原因是子叶进行有氧呼吸将亚甲基蓝氧化
6．除去番茄未成熟花的雄蕊，再用适宜浓度的生长素处理雌蕊可获得无子番茄，不处理则花蕾凋落。下列相关叙述错误的是（ ）
A．所结无子番茄的细胞中染色体数目加倍
B．生长素的生理作用主要是促进细胞生长
C．生长素可以诱导植物体中有机物的分配
D．生长素溶液浓度过大也会导致花蕾凋落
二、综合题：本大题共4小题
7．（9分）斑马鱼的HuC基因在早期胚胎神经细胞中选择性表达，研究人员构建了HuC基因的表达载体，并导入到斑马鱼细胞中研究其作用，请回答：

（1）为获取HuC基因，研究人员从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA，通过_________获得大量的DNA，进而构建出HuC基因的______________。
（2）DraⅢ， SnaBⅠ等是质粒上不同限制酶的切割位点。为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体，需要对HuC基因和质粒选用图中的____________酶进行切割，这样做的原因是_________。不选择NotⅠ酶切割的原因是_____________。
（3）用Ca2+处理大肠杆菌，大肠杆菌细胞即能够______________。实验过程中可以采用在荧光显微镜下观察________________________或者在培养基中添加______________，筛选出导入表达载体的大肠杆菌。
8．（10分）沙漠蝗虫大部分时间生活在干旱的沙漠中，以各自分散的方式生活，通常在晚上单独行动，对人类危害不大。但当降水增多时，植物骤然生长，以此为食的蝗虫也随之大量繁殖，数量骤增，沙漠蝗虫会发展为群居模式，体内含有毒素，外表呈鲜艳的黄、黑相间，这些恐怖的蝗虫会集结成群，四处飞行寻找食物并在迁飞过程中吃掉地表植被，所经之处植被受到严重破坏。研究发现蝗虫种群数量的增长受多种因素的影响，图1是在35℃下沙漠蝗虫的产卵量受相对湿度影响的曲线；图2为在不同温度和湿度条件下，沙漠蝗虫的种群数量的变化曲线；图3表示某沙漠生态系统中几种生物所形成的食物网。

（1）沙漠蝗虫身体表面的角质层和外骨骼中含有______，是广泛存在于自然界的一种含氮多糖类生物大分子，真菌类细胞的_______结构中也富含这种成分。
（2）由图1和图2可知，在干旱的气候条件下，沙漠蝗虫种群数量的变化趋势是____________，可能的原因是______________________________。当雨量充沛、气候潮湿时，沙漠蝗虫的数量随着湿度的增大而减少，从种间关系的角度分析可能的原因是______________________________。
（3）由图2可知，温度为________时，沙漠蝗虫对湿度的适应范围最宽。独居状态下的沙漠蝗虫呈浅褐色，与周围环境融为一体，是一种保护色，但仍会被鸟等天敌捕食一部分，这说明了__________________。
（4）图3中，若蛇的食物1/2来自沙鼠，其余的食物来源占1/2，则蛇的体重每增加1kg，理论上至少需要消耗青草______kg。
9．（10分）豆酱是大豆经过发醇制成的一种食品。某小组为了研究影响豆酱发酵效果的因素，将等量的a、b两菌种分别接入等量的甲、乙两桶煮熟大豆中并拌匀，再将两者置于适宜条件下进行发醇，在32h内定期取样观测发酵效果。回答下列问题：
（1）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的要好的多，说明该发酵菌是__________。
（2）如果在实验后，发现32h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系。有同学认为“据此实验结果，无法确定发酵的最佳时间”。这位同学的判断依据是__________。应怎样改进，请简述改进实验的基本思路__________。
（3）本实验前，需要对a、b两菌种进行分离，可以采用_____法来接种，培养后可以根据__________的特征来判断a、b两菌种的种类。
（4）a、b两菌种均能产生降解M（有机物）的酶。为了比较a、b两菌种降解M能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度M的固体培养基上，A处滴加含有a菌种的培养液，B处滴加含有b菌种的同种培养液，C处滴加________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出观透明圈，说明__________，若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明__________。
10．（10分）如图是利用转基因技术生产干扰素的简化流程。回答下列问题：

（1）进行过程I的前提是要根据干扰素基因的____________设计引物。
（2）过程I需加热至90~95℃，然后冷却至55~60℃，如此操作的目的是____________。据图可知欲获得干扰素基因，至少需要复制____________次。
（3）图中A的名称是___________，A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为___________。
（4）为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用_____________作探针，与从细胞中提取的____________进行分子杂交。
11．（15分）我国科学家从长白猪胎儿皮肤中分离出成纤维细胞，通过体外培养，然后将水母荧光蛋白基因导入成纤维细胞，并培育出转基因克隆猪。请回答下列问题。
（1）科学家依据_______原理，应用PCR技术______水母荧光蛋白基因。
（2）为确保水母荧光蛋白基因在成纤维细胞中表达，须在水母荧光蛋白基因的______添加启动子。
（3）体外培养成纤维细胞时，会出现接触_________________现象，为解决该问题，可用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理，然后继续_______________。
（4）科学家将水母荧光蛋白基因导入成纤维细胞，但其不能直接发育成猪。请以转基因成纤维细胞为材料，设计培育转基因克隆猪的一种简要思路___________________________________________________。
参考答案

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1、B
【解析】
细胞内外不同离子的浓度不同，说明细胞的生命活动对不同离子的需要不同，细胞能选择吸收其生命活动需要的离子，故这些离子在细胞液中的浓度高于海水中的浓度，如K+和Cl-在细胞内的积累；对于细胞生命活动需要量小的，就要不断的排出体外，如Na+、Ca2+和Mg2+排出细胞的情况，导致细胞内离子浓度低于海水中的浓度。
【详解】
A、细胞膜的功能特性是具有选择透过性，主动运输能保证细胞按照生命活动的需要主动地选择吸收营养物质，A错误；
B、不同离子在细胞内外分布不均衡，说明细胞对矿质元素离子的吸收具有选择性，B正确；
C、Na+进入法囊藻细胞是顺浓度梯度，不是主动运输，C错误；
D、细胞膜上载体蛋白的种类和数量是细胞内外离子浓度差异的直接原因，细胞内有控制载体蛋白合成的基因才是细胞内外离子浓度差异的根本原因，D 错误。
故选B。
本题考查物质运输相关知识，意在考查考生识图和判断物质跨膜运输的特点。
2、C
【解析】
A、d处有神经节故e是感受器，刺激b能引起肌肉收缩，但不属于反射，A错误；
B、兴奋在c处传递需要经过突触，有信号的转变比在b神经纤维上的速度慢些，B错误；
C、在反射弧中因为有突触的存在，兴奋传递方向是单向的，C正确；
D、II处发生信号转变是化学信号到电信号，D错误。
故选C。
3、A
【解析】
进行微生物培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基，根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作，如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。筛选目的微生物需要使用选择培养基。接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。
【详解】
A、分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，A正确；
B、接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，B错误；
C、摇床应对液体培养基培养微生物时操作，纯化培养时，培养皿中的是固体培养基，C错误；
D、观察菌落时，不需要将培养皿盖拿掉，D错误。
故选A。
4、D
【解析】
生长素对植物生长的双重作用，即低浓度促进生长，高浓度抑制生长，体现在根的向地性、顶端优势上。生长素的双重作用与浓度和器官有关，如根比芽敏感，芽比茎敏感。
【详解】
A、根据题意和图示分析可知：甲曲线表明生长素的生理作用具有两重性，P点表示促进作用最大时对应的浓度；乙图中b点表示低浓度的生长素促进根的向地生长，高浓度的生长素促进茎的背地生长，但b、c 点并不一定对应根和茎的最适生长浓度，A错误；
B、由于受重力影响，乙图中c点生长素浓度较高，促进茎背地生长，胚芽鞘的向光性是由于生长素的横向运输，导致背光侧生长素浓度较高，促进其向光生长，二者作用机理都是生长素的促进作用，B错误；
C、根对生长素浓度敏感性强，近地侧的生长素浓度高，抑制根的生长，远地侧生长素浓度低，促进了根的生长，所以根向地生长，体现了生长素的两重性，C错误；
D、根据图示曲线，当浓度不同但促进作用相同时，用不同浓度的生长素溶液处理扦插枝条，生根数量可能相等，D正确。
故选D。
5、D
【解析】
该题是一道关于呼吸作用实验分析题，呼吸作用的实质是氧化分解有机物，释放能量。有氧呼吸的总反应式：C6H12O6+6O2+6H2O 6CO2+12H2O+能量（大量）；无氧呼吸的总反应式：C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量（少量）。
【详解】
A、实验中加水淹没子叶、抽气，在水面上覆盖适量石蜡油，创设无氧环境，A正确；
B、A管放入的是煮熟的蚕豆子叶，高温处理子叶细胞酶已失活，不能进行呼吸作用，所以A管子叶37℃保温后不变色，B正确；
C、保温后B管子叶细胞进行无氧呼吸，产生的 [H] 能使亚甲基蓝还原，B管子叶蓝色变浅，C正确；
D、取出子叶放在滤纸上，创设有氧环境，通过子叶有氧呼吸将还原的亚甲基蓝氧化，使滤纸上B管子叶蓝色变深，D错误。
故选D。
本实验将实验过程和实验结果全部呈现出来，要求学生分析A、B两试管中的子叶颜色发生变化及不变色的原因。另外，题干中有“亚甲基蓝氧化态为蓝色，还原态后为无色”的信息提示，能起到引导学生辨别答题方向的作用。
6、A
【解析】
生长素可以促进果实发育，用生长素涂抹得到的无子番茄是不可遗传的变异。
【详解】
A、生长素促进果实的发育，并不能使细胞染色体数目加倍，A项错误；
B、生长素主要促进细胞伸长生长，B项正确；
C、依据题意，生长素能促进果实发育，而果实发育需要有机物，所以生长素能诱导植物体中有机物的分配（生长素和赤霉素能抑制筛孔处胼胝质的合成和沉积，利于有机物从光合作用部位运输到储存部位，比如在果实中），C项正确。
D、生长素的作用具有两重性，低浓度促进生长发育，防止落花落果，高浓度能疏花疏果，抑制生长发育，D项正确。
故选A。

二、综合题：本大题共4小题
7、逆转录和PCR技术扩增 cDNA文库 EcoRⅠ酶和BamHⅠ 可以防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接 破坏标记基因无法筛选（且没有启动子） 吸收周围环境中的DNA分子 表达的绿色荧光蛋白菌落 卡那霉素
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
（1）从早期胚胎神经细胞中提取HuC基因的mRNA，通过逆转录过程合成目的基因，并通过PCR技术在体外扩增可获得大量的目的基因，进而构建出HuC基因的cDNA文库。
（2）构建基因表达载体时，不能破坏运载体上的启动子、复制原点，以及运载体上需要保留标记基因，为了防止目的基因和质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接，常用不同的限制酶切割质粒和目的基因，结合图示中各种限制酶的酶切位点可知，为获得HuC基因——绿色荧光蛋白基因的表达载体，需要对HuC基因和质粒选用图中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶进行切割。卡那霉素抗性基因为标记基因，若用NotⅠ酶切割，将会导致卡那霉素抗性基因被破坏，且切割后的质粒会失去启动子，使基因表达载体中缺少标记基因无法选择，且没有启动子无法转录，所以不选择NotⅠ酶切割质粒。
（3）用Ca2+处理大肠杆菌使之成为感受态细胞，易于吸收周围环境中的DNA分子。由于绿色荧光蛋白表达后会发绿光，所以实验过程中可以采用在荧光显微镜下观察表达的绿色荧光蛋白菌落或者在培养基中添加卡那霉素，筛选出导入表达载体的大肠杆菌。
本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。
8、几丁质（壳多糖） 细胞壁 天气越干燥，沙漠蝗种群数量越少；相对湿度越低，沙漠蝗产卵数量越少，且孵化、成活率越低 湿度大，蛙、鸟等天敌多，捕食可抑制沙漠蝗的种群数量 真菌、丝虫等寄生生物大量繁 殖抑制沙漠蝗的种群数量 40℃ 生物适应环境具有相对性 75
【解析】
由图分析：由图1可知，雨量充沛、空气相对湿度在70%左右时，蝗虫产卵数最多。由图2可知，蝗虫种群数量随不同温度和不同湿度下变化而变化，在湿度为80%，温度40℃时，蝗虫种群数量最多。图3表示某沙漠生态系统中几种生物所形成的食物网。
【详解】
（1）沙漠蝗虫身体表面的角质层和外骨骼中含有几丁质（壳多糖），几丁质（壳多糖）是一种含氮多糖类生物大分子，真菌类细胞的细胞壁结构中也富含几丁质（壳多糖）。
（2）图1是在35℃下沙漠蝗虫的产卵量受相对湿度影响的曲线；图2为在不同温度和湿度条件下，沙漠蝗虫的种群数量的变化曲线；由图1和图2分析可知，在干旱的气候条件下，沙漠蝗虫种群数量的变化趋势是：天气越干燥，沙漠蝗种群数量越少；相对湿度越低，沙漠蝗产卵数量越少，且孵化、成活率越低，导致的可能原因是：湿度大，蛙、鸟等天敌多，捕食可抑制沙漠蝗的种群数量。当雨量充沛、气候潮湿时，沙漠蝗虫的数量随着湿度的增大而减少，从种间关系的角度分析可能的原因是真菌、丝虫等寄生生物大量繁殖抑制沙漠蝗的种群数量。
（3）由图2的曲线图可以看出，温度为40℃时，沙漠蝗虫对湿度的适应范围最宽。独居状态下的沙漠蝗虫呈浅褐色，与周围环境融为一体，是一种保护色，但仍会被鸟等天敌捕食一部分，这说明了生物适应环境具有相对性。
（4）图3中，最后求至少需要青草的量，则能量传递效率按20%计算。青草→沙鼠→蛇这条食物链，蛇增重1/2kg，至少需要青草的量：1/2÷20%÷20%=12.5kg；蛇再增重1/2kg，至少需要青草的量只能沿最短的食物链进行计数，由于青草→蝗虫→蛙→蛇和青草→蝗虫→沙云雀→蛇两条食物链营养级一样多，就任选一条进行计算：1/2÷20%÷20%÷20%=62.5kg，至少共需要的青草量为：12.5＋62.5=75kg。
本题旨在考查学生理解种群的数量变化，理解种群的特征和种间关系，把握知识的内在联系，形成知识网络，并应用相关知识结合题图信息进行推理、解答问题。
9、需氧菌 因“32 h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系”，说明发酵的最佳时间可能超过32 h。 继续延长发酵时间，定期取样观测发酵效果，以确定最好的发酵效果所对应的最佳发酵时间 稀释涂布平板法或平板划线法 根据菌落（大小、形状、色泽） 空白的同种培养液 培养液不能降解M a、b菌种降解M的能力相近
【解析】
根据题干信息可知，该实验的自变量是菌种和发酵时间。通常是细菌在固体培养基上（内）生长发育，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞的集团，称之为菌落。
【详解】
（1）上层氧气较多，上层大豆的发酵效果比底层的要好的多，说明该发酵菌是需氧菌。
（2）如果在实验后，发现32h内的发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵的最佳时间。若要确定最佳发酵时间，还需延长发酵时间继续进行实验，直到看到下降的点。
（3）本实验前，可以采用稀释涂布平板法或平板划线法来接种，对a、b两菌种进行分离。培养后可以根据菌落（大小、形状、色泽）的特征来判断a、b两菌种的种类。
（4）为了比较a、b两菌种降解M能力的差异，需设计实验，实验设计需遵循等量、单一变量、对照等原则。①实验分三组，A处滴加a菌液，B处滴加b菌液，C处滴加空白的同种培养液，作为对照。②a、b两菌种均能产生降解M（有机物）的酶，降解能力越强，透明圈的直径越大。
本题借a、b两菌种考查学生对微生物的培养与鉴定方面的知识，需要学生理解微生物的筛选，如通过透明圈的大小来筛选降解能力有差异的菌株。
10、核苷酸序列 使DNA解链，然后使引物结合到互补DNA链上 3 重组质粒 启动子 放射性同位素、生物素或荧光染料等标记的干扰素（目的）基因 mRNA
【解析】
1.基因工程的基本操作程序：第一步：目的基因的获取；第二步：基因表达载体的构建；第三步：将目的基因导入受体细胞；第四步：目的基因的检测和表达。
2.PCR的过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。
3.题图分析：Ⅰ是利用PCR技术扩增目的基因，Ⅱ是构建基因表达载体，Ⅲ是将重组质粒导入到酵母菌细胞中。
【详解】
（1）PCR的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物，因此进行过程Ⅰ的前提是要根据干扰素基因的核苷酸序列设计引物。
（2）PCR过程中需加热至90〜95℃，然后冷却至55〜60℃，如此操作的目的是使DNA解旋，然后使引物结合到互补DNA链上。根据PCR复制的特点，结合图示可知，图示中干扰素基因的两条链应是第二次复制才能形成的子链，所以至少需要复制三次才能形成图中的干扰素基因。
（3）图中A是干扰素基因和质粒连接形成的重组质粒（基因表达载体），A上与RNA聚合酶识别和结合的部位称为启动子。
（4）基因转录的产物为mRNA，由于转录过程中遵循碱基互补配对原则，所以为检测干扰素基因在酵母菌细胞中是否转录，可用放射性同位素、生物素或荧光染料等标记的干扰素（目的）基因作探针，与从细胞中提取的mRNA进行分子杂交。
本题结合利用转基因技术生产干扰素的简化流程，考查基因工程的技术及原理、应用，要求考生识记基因工程的原理及技术，能准确判断图中各过程的名称，能运用所学的知识结合图中信息准确判断各题。
11、DNA双链复制 扩增 首端 抑制 分瓶培养 将转基因成纤维细胞的细胞核导入去核卵母细胞，并进行体外培养和胚胎移植
【解析】
PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
原理：DNA双链复制。
胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，这是胚胎工程的最后一道工序。
【详解】
（1）由分析可知，PCR技术的原理是DNA双链复制，应用PCR技术可以实现扩增水母荧光蛋白基因的目的。
（2）因为启动子是位于基因首端的一段特殊结构的DNA片段，所以，为确保水母荧光蛋白基因在成纤维细胞中表达，须在水母荧光蛋白基因的首端添加启动子。
（3）体外培养成纤维细胞时，培养的细胞会出现贴壁生长、接触抑制的现象，为解决接触抑制的问题，可用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理制成单细胞悬液，然后继续分瓶培养。
（4）要获得含水母荧光蛋白基因的转基因猪，现在已经获得了转基因成纤维细胞，接下来需要将转基因成纤维细胞的细胞核导入去核卵母细胞（处于减数第二次分裂中期），并设法促进重组细胞的核质融合，并进行体外培养获得早期胚胎，然后通过胚胎移植将早期胚胎转入同期发情的受体猪的子宫内完成转基因猪的培育过程。
熟知PCR技术的原理和应用是解答本题的关键！掌握核移植、早期胚胎培养和胚胎移植的操作程序是解答本题的另一关键，动物细胞培养过程中呈现的特征以及培养过程也是解答本题的必备知识。