湖南省常宁市第一中学2026年高三4月月考生物试题试卷含解析.doc

湖南省常宁市第一中学2026年高三4月月考生物试题试卷
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型（B）填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。
2．作答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑；如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。
3．非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答，答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上；如需改动，先划掉原来的答案，然后再写上新答案；不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。
4．考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1．科学家发现，当神经元兴奋时神经细胞上的Ca2+通道开放，Ca2+进入细胞内引起细胞内Ca2+浓度升高。囊泡上的突触结合蛋白是游离Ca2+的受体，Ca2+和突触结合蛋白结合后，使囊泡融合蛋白与突触前膜上某种物质结合形成稳定的结构，这样囊泡和突触前膜融合，使神经递质释放到突触间隙（图）。下列有关叙述正确的是（ ）

A．乙酰胆碱与突触后膜受体的结合过程主要由①提供能量
B．突触前膜所在神经元特有的基因决定了囊泡和突触前膜的融合位置
C．②兴奋时，膜内电位由负电位变为正电位，并将电信号转化为化学信号
D．若突触前膜上的Ca2+通道被抑制，刺激突触前神经元，会使③的膜电位发生变化。
2．某植物的抗性（R）对敏感（r）为显性，下图表示甲、乙两个地区在T1和T2时间点，RR、Rr和rr的基因型频率。下列叙述正确的是（ ）

A．乙地区基因型频率变化不大，所以该植物种群并没有发生进化
B．突变率不同是导致甲、乙地区基因型频率不同的主要原因
C．T2时刻，甲地区该植物种群中R基因的频率约为75%
D．甲地区基因型频率变化更大，T2时刻产生了新的物种
3．某小组为解决粮食贮存通风散热问题，利用下图所示装置测定小麦种子呼吸作用强度（底物为葡萄糖）。气体自动分析仪用于测定密闭容器中O2和CO2的含量变化。下列相关叙述错误的是（ ）

A．该装置可用于探究温度对小麦种子呼吸作用强度的影响
B．小麦种子呼吸作用释放的能量部分储存在ATP中，其余的以热能形式散失
C．当装置中小麦种子同时存在有氧呼吸和无氧呼吸时，不能测出无氧呼吸强度
D．通过O2与CO2的含量变化可推算出小麦种子呼吸作用释放的热能
4． “要金山银山，更要青山绿水”，环境治理与经济可持续发展将是时代的主旋律。根据这一思想和生态学知识，下列说法错误的是（ ）
A．生物圈是一个在物质和能量上都能自给自足的系统
B．面对温室效应加剧问题主要通过各国节能减排来解决
C．生态农业利用的主要生态学原理是物质循环再生和能量多级利用
D．低碳生活方式有助于维持生物圈中碳循环的平衡
5．结合下图分析，下列说法正确的是（ ）

A．若判断甲是否为需氧型生物，依据的是细胞中是否含有结构①
B．若判断乙是否为植物细胞，并不能仅依据细胞中是否含有结构②
C．用电子显微镜观察不能区分细胞甲和细胞乙是否为原核生物
D．根据细胞中是否含有结构③，可将甲、乙、丙三种生物分为真核生物和原核生物两个类群
6．如图是表示人体和人体细胞内某些信息的传递机制的模式图。下列有关叙述中不正确的是（ ）

A．若该图表示细胞内遗传信息的表达过程，则e过程发生于核糖体中
B．若该图表示膝跳反射的过程，则b表示大脑皮层，c表示相应肌肉
C．若图表示内环境中成分的单方向联系，a为组织液，b为淋巴，c为血浆
D．若该图中a为下丘脑，b为垂体，c为甲状腺，则d和e为不同物质
二、综合题：本大题共4小题
7．（9分）草甘膦是一种除草剂，科研人员利用基因工程技术获得抗草甘膦转基因水稻。操作过程如下图所示。请回答下列问题：

注：GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色
（1）构建基因表达载体首先需用能产生不同________的限制性核酸内切酶分别处理草甘膦抗性基因和Ti质粒，这种处理的目的是________________________，再用________________处理。Ti质粒的功能是________________________________________。
（2）用含潮霉素的培养基进行图中筛选1的目的是________________________，筛选2的目的是_________________________。
（3）取某品种水稻的幼胚，先进行________处理，然后接种到含________的培养基中，诱导形成愈伤组织，用于获得目的植株。
（4）将大肠杆菌用Ca2+溶液处理，是否完成了转化？________（填“是”或“否”），理由是________________________________________________________。
8．（10分）将银边天竺葵（叶边缘呈白色，中央为绿色）预先放在黑暗中48h小时，选取植株上若干生长良好、大小相同的叶片，采用适当的方法杀死韧皮部细胞阻断有机物转移，再用不透光的黑纸遮蔽左侧叶片后把植株放在阳光下照射一段时间，用打孔器分别在叶片中的①、②、③部位取下相同面积的圆片。
请回答：

（1）叶圆片①的叶肉细胞中能产生ATP的场所是______________。
（2）若将叶圆片①②③放在酒精中加热脱色，用清水漂洗后滴加碘液。能验证“光是光合作用必要条件”的组别是___________（填写序号），实验结果是___________；能验证“光合作用场所是叶绿体”的组别是_____________（填写序号），实验结果是_____________。
（3）若将叶圆片①②③烘干称重，计算该植物叶片总光合速率时应该用①②的干重，而不用②③的干重，理由是______________________。
9．（10分）某实验小组在适宜的二氧化碳浓度条件下，用小球藻做了有关光合作用的实验（假设实验过程中呼吸速率不变）。图1和图2表示实验结果，其中图l表示光照强度为e时测定的温度对光合速率的影响，图2表示温度条件是25℃下测定的光照强度对光合速率的影响。根据实验结果分析回答下列问题：

（1）该实验的自变量是____，从图2中可以判断小球藻的呼吸速率的相对值是____。
（2）当小球藻处于图l中温度条件为35℃时，小球藻____（填“能”或“不能”）表现生长，做出判断的依据是____。
（3）小球藻进行光合作用的场所是叶绿体，内部有许多基粒，每个基粒都含有两个以上的类囊体，多者可达100个以上，从结构决定功能的角度分析，叶绿体中有如此多的基粒和类囊体的意义是 ____。
10．（10分）心肌细胞不能增殖，基因ARC在心肌细胞中的特异性表达，能抑制其凋亡，以维持正常数量。细胞中另一些基因通过转录形成前体RNA，再经过加工会产生许多非编码RNA，如miR﹣223（链状），HRCR（环状）。结合图回答问题：

（1）启动过程①时，_____酶需识别并与基因上的启动部位结合。进行过程②的场所是_____，该过程最终合成的T1、T2、T3三条多肽链的氨基酸顺序_____（填“相同”或“不同”），翻译的方向是_____（填“从左到右”或“从右到左”）。
（2）当心肌缺血、缺氧时，会引起基因miR﹣223过度表达，所产生的miR﹣223可与ARC的mRNA特定序列通过_____原则结合，形成核酸杂交分子1，使ARC无法合成，最终导致心力衰竭。与基因ARC相比，核酸杂交分子1中特有的碱基对是_____。
（3）根据题意，RNA除了具有为蛋白质合成提供模板外，还具有_____功能（写出一种即可）。
（4）科研人员认为，HRCR有望成为减缓心力衰竭的新药物，原因是_____。
11．（15分）为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞，获得转基因油葵新品种。
（1）为获取目的基因，可从花生细胞中提取_________，经逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板通过PCR技术扩增目的基因。
（2）构建重组DNA分子（如图所示）最好选用_________限制酶，目的是可避免_________。

（3）普通大肠杆菌细胞中没有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，将构建的重组DNA分子导入农杆菌中,将获得的农杆菌接种在含_________的固体平板上培养得到含重组质粒的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。
（4）剪取油葵的叶片放入浸染液中一段时间后，经过筛选获得转基因油菜细胞。最后经过__________________
培育成转基因油葵植株。此种技术的原理是_________。
（5）研究发现，如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造，所需步骤有_________。
a．蛋白质的结构设计 b．蛋白质的结构和功能分析
c．蛋白质结构的定向改造 d．酶A基因的定向改造
e．将改造后的酶A基因导入受体细胞 f．将定向改造的酶A导入受体细胞
（6）经过种植转基因油葵发现，虽然转基因油葵种子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丢失，其原因是_________。
参考答案

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）
1、C
【解析】
神经元之间接触的部位，由一个神经元的轴突末端膨大部位--突触小体与另一个神经元的细胞体或树突相接触而形成；突触包括突触前膜、突触间隙和突触后膜三部分；神经递质存在于突触小体的突触小泡中，由突触前膜以胞吐的形式释放到突触间隙，作用于突触后膜，兴奋在突触处传递的形式是电信号→化学信号→电信号。
【详解】
A、乙酰胆碱和受体的结合不需要能量，A错误；
B、神经元内的基因和其他细胞的基因相同，所以决定囊泡和突触前膜融合位置的基因并不是突触前膜所在神经元特有的基因，B错误；
C、②是突触前膜，兴奋时膜内电位由负电位变为正电位，促进递质的释放，并在此将电信号转化为化学信号， C正确；
D、若突触前膜上的Ca2+通道被抑制，Ca2+不能内流，使乙酰胆碱不能正常释放，阻碍了兴奋的传递，不能使突触后膜③的电位发生变化，D错误。
故选C。
本题需要考生掌握兴奋在神经元之间的传递过程，结合题干中“Ca2+”的作用进行解答。
2、C
【解析】
现代生物进化理论认为：生物进化的基本单位是种群，突变和基因重组为生物进化提供原材料，自然选择通过定向改变种群基因频率而使生物朝着一定的方向进化，隔离是新物种形成的必要条件，生殖隔离是新物种形成的标志，生物进化是共同进化，通过漫长的共同进化形成生物多样性。
【详解】
A、生物进化的实质是种群基因频率的改变，而不是看基因型频率改变的大小，A错误；
B、甲乙地区基因型频率不同的主要原因是自然选择的结果，B错误；
C、甲地区T2时刻，RR约为0.6，rr约为0.1，Rr约是0.3，因此R的基因频率是（0.6+0.3÷2）×100%=75%，C正确；
D、新物种形成的标志是产生生殖隔离，甲地区T2时间不一定产生生殖隔离，D错误。
故选C。
3、C
【解析】
小麦种子有氧呼吸的产物为CO2、H2O，并释放大量的能量，无氧呼吸的产物为CO2和酒精，并释放少量的能量。10g葡萄糖中约有160KJ的能量，有氧呼吸彻底氧化分解，30%的能量储存在ATP中，70%以热能的形式释放。本题可通过O2的吸收量确定葡萄糖的消耗量进而确定热能的释放量，也可通过CO2和O2的差值确定无氧呼吸消耗葡萄糖的量，进而确定热能的释放量。
【详解】
A、该装置可通过调节恒温箱的温度，用于探究温度对小麦种子呼吸作用强度的影响，A正确；
B、小麦种子呼吸作用释放的能量小部分储存在ATP中，大部分以热能形式散失，B正确；
C、当装置中小麦种子同时存在有氧呼吸和无氧呼吸时，可以通过CO2释放量与O2吸收量的差值测出无氧呼吸强度，C错误；
D、通过O2与CO2的含量变化可推算出小麦种子呼吸作用释放的热能，D正确。
故选C。
4、A
【解析】
1. 生态农业是按照生态学原理和经济学原理，运用现代科学技术成果和现代管理手段，以及传统农业的有效经验建立起来的，能获得较高的经济效益、生态效益和社会效益的现代化农业，生态农业利用的生态学原理主要是物质循环再生和能量多级利用。
2.导致温室效应的主要原因是化石燃料的大量开采利用，排放到大气中的二氧化碳增大引起的全球性环境问题，因此应通过各国节能减排，开放新的清洁型能源，降低二氧化碳的排放。
3. 生物圈是生物与环境构成的一个统一的整体，是最大的生态系统。生态系统的组成包括非生物部分和生物部分。非生物部分有阳光、空气、水、温度、土壤（泥沙）等；生物部分包括生产者（绿色植物）、消费者（动物）、分解者（细菌和真菌）。
【详解】
A、生物圈的能量需要从外界源源不断输入，生物圈的物质可以循环利用，A错误；
B、节能减排的生活方式有助于维持生物圈中碳循环的平衡，降低温室效应，B正确；
C、根据以上分析可知，生态农业利用的生态学原理主要是物质循环再生和能量多级利用，以获得较高的经济效益、生态效益和社会效益，C正确；
D、低碳生活方式减少二氧化碳的排放，有助于维持生物圈中碳循环的平衡，D正确。
故选A。
5、B
【解析】
分析题图：甲细胞没有被核膜包被的成形的细胞核，属于原核细胞；乙细胞含有液泡、叶绿体和细胞壁，属于植物细胞；丙为病毒；①为线粒体，是有氧呼吸的主要场所；②是叶绿体，是光合作用的场所。③是细胞核。
【详解】
A、结构①为线粒体，甲是原核生物，细胞没有线粒体，因此判断甲是否为需氧型生物，不能依据细胞中是否含有结构①，A错误；
B、若判断乙是否为植物细胞，并不能仅依据细胞中是否含有结构②叶绿体，因有些植物细胞如根部细胞无叶绿体，B正确；
C、电子显微镜可以观察到细胞器和细胞核，能区分真核细胞和原核细胞，C错误；
D、结构③是细胞核，原核细胞和真核细胞最主要的区别是有无核膜包被的细胞核，丙没有细胞结构，既不属于原核细胞，也不属于真核细胞，D错误。
故选B。
本题结合几种细胞和细胞器的结构模式图，考查原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同、细胞结构和功能，要求考生识记原核细胞和真核细胞的形态和结构的异同，识记动植物细胞结构的异同，能准确判断图中各细胞和细胞器的名称，再结合所学的知识答题。
6、B
【解析】
翻译即蛋白质合成的过程，核糖体是合成蛋白质的机器。非条件发射是先天的，不需要大脑皮层的参与。细胞外液组成的液体环境即内环境，细胞外液相互联系。上图也可表示甲状腺激素的分级调节，下丘脑和垂体都是内分泌腺。
【详解】
A、若该图表示细胞内遗传信息的表达过程，则e过程为翻译过程，发生于核糖体中，A正确；
B、膝跳反射中枢在脊髓不在大脑皮层，B错误；
C、组织液、淋巴、血浆的流动方向是血浆通过毛细血管动脉端进入组织液，少部分组织液可通过毛细血管静脉端回渗入血浆，组织液可穿过淋巴管壁进入淋巴液，淋巴液通过淋巴循环通过左右锁骨下静脉进入血浆，C正确；
D、若该图中a为下丘脑，b为垂体，c为甲状腺，则d表示促甲状腺激素释放激素和e表示促甲状腺激素，D正确。
故选B。
基因的表达包括转录和翻译的过程，对于真核生物来说，转录发生在细胞核，而翻译发生在细胞质中，对于原核生物来说，转录和翻译都发生在细胞质中，拟核周围。组织液、淋巴、血浆三种细胞外液间的流动关系如下：

二、综合题：本大题共4小题
7、黏性末端 防止经同一种限制酶切割后，具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相连接 、Ti质粒和Ti质粒相连接 DNA连接酶 Ti质粒有T-DNA片段，将目的基因整合到受体细胞染色体DNA 获得含基因表达载体的农杆菌 筛选目的基因表达的愈伤组织 消毒 植物激素 否 大肠杆菌用Ca2+ 溶液处理，只成为了感受态细胞，无目的基因进入受体细胞、维持稳定和进行表达的过程
【解析】
1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。
【详解】
（1）在构建基因表达载体时，为了避免因用同一种限制酶切割后，具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相连接 、Ti质粒和Ti质粒相连接的情况出现，所以用能产生不同黏性末端的限制性核酸内切酶分别处理草甘膦抗性基因和Ti质粒，再用DNA连接酶处理以便获得目的基因和质粒正确连接的基因表达载体，Ti质粒有T-DNA片段，能将目的基因整合到受体细胞染色体DNA，这样目的基因就可以随着受体细胞染色体DNA的复制而复制。
（2）为了获得含基因表达载体的农杆菌，根据目的基因表达载体上含有的标记基因，用含潮霉素的培养基进行筛选1，由于含有目的基因表达载体的农杆菌具有对潮霉素的抗性，因此能在该培养基上生长，筛选2的目的是要筛选出目的基因表达的愈伤组织，然后用该愈伤组织经过组织培养获得目的植株。
（3）为获得目的植株，首先取某品种水稻的幼胚进行消毒处理，然后接种到含植物激素的培养基中，诱导形成愈伤组织，然后再分化成目的植株。
（4）大肠杆菌经Ca2+溶液处理之后，成为了感受态细胞，此时细胞处于能够吸收周围环境中DNA分子的生理状态，因此时无目的基因进入受体细胞、维持稳定和进行表达的过程，故并未完成了转化。
熟知基因工程的原理和基本步骤是解答本题的关键！明确转化的概念是解答最后一问的关键！
8、细胞质基质、线粒体（线粒体基质、线粒体内膜） ①② ①呈黄白色（不呈蓝色），②呈蓝色 ②③ ②呈蓝色，③呈黄白色（不呈蓝色） ③部位的细胞结构与①、②部位的不同，材料存在差异
【解析】
植物进行光合作用形成有机物，而有机物的积累可使叶片单位面积的干物重增加，采用适当的方法杀死韧皮部细胞阻断有机物转移，将待测叶片的一半遮黑，测量相同时间内叶片被遮黑的一侧单位面积干重的减少值，作为呼吸消耗量的估测值。这就是经典的“半叶法”测定光合速率的基本原理，测定时须选择对称性良好、厚薄均匀一致的两组叶片，一组叶片用于测量干重的积累，另一组（半叶遮黑的）叶片用于测定干重的消耗。
【详解】
（1）叶圆片①处于遮光条件下，不能进行光合作用，只能进行呼吸作用，故叶肉细胞中能产生ATP的场所是细胞质基质、线粒体，即呼吸作用进行的场所。
（2）要验证“光是光合作用必要条件”，则实验设计中的自变量为是否照光，因变量是是否有淀粉生成，可以通过检测叶圆片是否变蓝来得出结论，据此可知，①②对照就可以达到上述目的，该实验结果是①呈黄白色（不呈蓝色），②呈蓝色；要验证“光合作用场所是叶绿体”应该设置有、无叶绿体的对照，然后检测叶圆片是否变蓝即可，符合条件的组别是②③，应该得到的实验结果是②呈蓝色，③呈黄白色（不呈蓝色）。
（3）若将叶圆片①②③烘干称重，来计算该植物叶片总光合速率，根据总光合速率=净光合速率+呼吸速率来分析，假设①②实验前的干重为a，则实验一段时间之后，①的减少表示呼吸速率，即a-①的干重，②的增加表示净光合速率，即②的干重-a，故叶圆片总光合速率=②的干重-a+a-①的干重=②的干重-①的干重，这时不用②③干重的理由是③部位的细胞结构与①、②部位的不同，材料存在差异，正因如此③的减少不能代表正常叶肉细胞的呼吸速率，故不能选用。
学会分析实验目的中包含的自变量、因变量和无关变量是解答本题的关键！掌握半叶法测光合速率的方法是解答本题的另一关键，另注意关注半叶法测光合速率的适用条件。
9、温度和光照强度 5 能 35℃时小球藻的净光合速率大于0，有机物积累增加 极大地扩展了受光面积，并且增加光合色素和有关酶的附着面积
【解析】
解答本题的关键是抓住问题的实质：图示的横坐标表示自变量，纵坐标表示因变量；温度通过影响光合作用相关酶的活性影响光合作用的速率。抓住了问题的实质，结合题意并题图信息，围绕光合作用的过程及其影响因素等相关知识即可对各问题进行解答。
【详解】
（1）图中的横坐标表示的是自变量，因此温度和光照强度是实验的自变量。光照强度为0时，小球藻只进行呼吸作用，因此根据图2可知小球藻的呼吸速率的相对值是5。
（2）温度条件为35℃时，小球藻的净光合速率大于0，有机物积累增加，小球藻能表现出生长。
（3）叶绿体类囊体薄膜是光合作用光反应的场所，叶绿体中分布较多的基粒和类囊体，极大地扩展了受光面积，并且增加光合色素和有关酶的附着面积。
本题采用图文结合的形式考查学生对光合作用过程、影响光合作用的因素等知识的理解能力以及对实验结果的分析能力。
10、RNA聚合 核糖体 相同 从左到右 碱互补配对 A-U 形成核酸杂变分子，调控基因的表达 HRCR与miR-223互补配对，清除miR-223，使ARC基因的表达增加，抑制心肌细胞的凋亡
【解析】
分析题图：图中①为转录过程，②为翻译过程，其中mRNA可与miR-233结合形成核酸杂交分子1，miR-233可与HRCR结合形成核酸杂交分子2。
【详解】
（1）①是转录过程，催化该过程的酶是RNA聚合酶，所以启动过程①时，RNA聚合酶需识别并与基因上的启动子结合。②是翻译过程，其场所是核糖体。由于控制合成的三条多肽链是同一个模板mRNA，所以最终合成的T1、T2、T3三条多肽链的氨基酸顺序相同。根据肽链的长短可知，翻译的方向是从左到右。
（2）当心肌缺血、缺氧时，某些基因过度表达产生过多的miR-223，miR-233与mRNA特定序列通过碱基互补配对原则结合形成核酸杂交分子1，导致过程②因模板的缺失而受阻，最终导致心力衰竭。与ARC基因（碱基配对方式为A-T、C-G）相比，核酸杂交分子1（碱基配对方式为A-U、T-A、C-G）中特有的碱基对是A-U。
（3）根题意RNA除了具有为蛋白质合成提供模板外，还具有形成核酸杂交分子，调控基因的表达功能。
（4）科研人员认为，HRCR有望成为减缓心力衰竭的新药物，其依据是HRCR与miR-223碱基互补配对，清除miR-223，使ARC基因的表达增加，抑制心肌细胞的凋亡。
本题结合图解，考查遗传信息的转录和翻译，要求考生识记遗传信息转录和翻译的过程、场所、条件及产物等基础知识，能正确分析题图，再结合图中信息准确答题。
11、mRNA BamHⅠ和 PstⅠ 质粒自身的黏性末端连接或目的基因与质粒反向连接 氨苄青霉素 植物组织培养技术 植物细胞的全能性 b、a、d、e 抗灰霉菌基因没有表达（或丢失等）
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
（1）逆转录过程需要从供体细胞内提取出的 mRNA 为模板，以脱氧核苷酸为原料合成 cDNA。
（2）构建重组 DNA 分子时选用的限制酶要不破坏目的基因，所以不能用 EcoR I，同时尽量防止质粒自身的黏性末端连接或目的基因与质粒反向连接，所以最好选用两种限制酶， 即 BamHⅠ和 PstⅠ。
（3）根据限制酶的切割位点，由于使用 BamHⅠ和 PstⅠ会破坏抗四环素标记基因，但抗氨苄青霉素的标记基因是完整的所以只能用含氨苄青霉素的培养基筛选含重组质粒的单菌落。
（4）得到转基因细胞后，要培养转基因植株，需要用植物的组织培养技术才能实现，其依据的原理是植物细胞的全能性。
（5）蛋白质工程的步骤是：蛋白质的结构和功能分析→蛋白质的结构设计→酶 A 基因的定向改造→将改造后的酶 A 基因导入受体细胞→获得所需蛋白质。
（6）转基因油葵种子中含油量上升，但抗灰霉菌的能力丢失，原因可能是抗灰霉菌基因未表达或丢失。
本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。