临床生化AFU检测.ppt

<p>,-,岩藻糖苷酶(,AFU),试剂介绍,新一代单一稳定液体试剂,四川迈克科技有限公司,-L-,岩藻糖苷酶(,-L-,FUCOSidase,，AFU),是一种溶酶体酸性水解酶，早期测定本酶主要用于遗传性,AFU,缺乏症的诊断，并借以与其它遗传性粘多糖贮积病的鉴别。1980年法国学者,Deugnier,等研究发现，原发性肝癌(,PHC),患者血清,AFU,升高，并被众多的研究所证实。故有人提出,AFU,可作为,PHC,的肿瘤标志物，与,AFP,联合或参照应用大大提高了诊疗价值。近年来研究发现，,AFU,对某些疾病的发生、发展均具有重要意义。,国内外早期文献报道,AFU,在原发性肝癌患者血清中活性显著升高,测定,AFU,对诊断原发性肝癌具有重要价值,AFU,测定有利于原发性肝癌（,PHC）,的诊断、疗效观察、手术后随访、以及肝癌普查。在,AFP,阴性的病例中，大约有70-85%出现,AFU,的阳性结果，在小肝癌病例血清,AFU,的阳性率高于,AFP，,因此同时测定,AFU,与,AFP,可使,PHC,的阳性检出率从单测的,AFP70%，,提高至90-94%,。,目前，国内大多数医院使用的商品试剂为终点法试剂，该法由于酶底物本身的抗干扰性差，对溶血、黄疸表现出明显的基质效应。我们根据市场需要，从国外引进新型底物（,MCPNP），,并优化反应体系，加入合成溶血抗干扰剂和采用抗黄疸缓冲体系,，,使试剂具有抗干扰性强、精密度较好，基质效应不明显。历时近两年的试验室和临床应用评价，结果稳定,性能达到设计要求，现正式向国内市场独家推出新一代的单一稳定,AFU,测定试剂。该试剂采用连续检测法，适用于各种半/全自动分析仪器。,概 述,主要性能指标,单一液体试剂:,直接使用，不占试剂位。,连续检测法:,方便简捷，抗干扰性强,高稳定性:,28避光密闭贮存稳定12个月,28避光开瓶稳定性 30天,检测范围:,高感度方式(原倍)300,U/L,低感度方式(减量)600,U/L,精 密 度:,平均,CV%=1.14,相 关 性:,与终点法比较,r=0.976,适 用 性:,适用于各种半/全自动分析仪,灵 敏 度:,高感度方式0.0100,/,min(,约20,U/L),反应线性期：,7分钟,稳定的试剂空白:,监测期内空白稳定,仪器:7060分析仪,精 密 度,灵敏度(,S2,反应曲线),试剂空白,主要测定方法及部分性能比较,方 法,反应时间,灵敏度,CV%,抗干扰性,试剂,比色法,3760分钟,低,1.80,差;收溶血/黄疸/脂血影响大,干粉,自动分析法,37 5分钟,中等,2.46,较好;受溶血和黄疸影响,液体,连续检测法,3760秒,中等,6.20,较好;胆红素/溶血/脂血影响较小,液体/干粉,CPNP,法,3760秒,高,2.10,较好;胆红素/溶血/脂血影响较小,干粉,MGCPNP,法,3760秒,高,1.13,较好;对溶血/脂血/黄疸有良好的抗干扰性.,单一液体,ELISA,法,37 60分钟,极高,荧光法,极高(0.06,U/L),临床意义,AFU,测定有利于原发性肝癌（,PHC）,的诊断、疗效观察、手术后随访、以及肝癌普查；在,AFP,阴性的病例中，大约有70-85%出现,AFU,的阳性结果，在小肝癌病例血清,AFU,的阳性率高于,AFP，,因此同时测定,AFU,与,AFP,可使,PHC,的阳性检出率从单侧,的,AFP70%，,提高至90-94%,AFU,广泛存在于人体各组织细胞溶酶体和体液中，胎盘、胎儿组织、脑、肺、肝、胰、肾以及血清、尿液、唾液和泪液中均含有,AFU。,早期测定本酶主要用于遗传性,AFU,缺乏症的诊断，并借以与其它遗传性粘多糖贮积病的鉴别。1980年法国学者,Deugnier,等研究发现，原发性肝癌（,PHC）,患者血清,AFU,升高，并被众多研究所证实。故有人提出,AFU,可作为,PHC,的肿瘤标志物，与,AFP,联合或参照应用大大提高了诊疗价值。近年来，国内外学者又作了许多研究，发现,AFU,对某些疾病的发生、发展均有重要意义。,临床资料表明，在肝癌诊断中，,PHC,患者,AFU,活性不仅显著高于正常对照，而且也显著高于转移性肝癌、肝硬化、先天性肝囊肿、恶性血管内皮瘤、胆管细胞癌和其它良性占位性病变。对,PHC,诊断的阳性率为70-85%，特异性达90%左右。,Marotta,等对,PHC、,肝硬化后肝癌患者进行,AFU、AFP,检测，发现,PHC,和肝硬化后肝癌患者,AFU、AFP,均增高。慢性肝炎和肝硬化患者血清,AFU,也增高，其阳性率分别为3.8%和5.6%,可能与肝细胞损伤,酶逆流入血有关。也有血清,AFU,在,PHC,和肝硬化等非,PHC,疾病组重叠的报道，但后者一般轻度升高，且随疾病的治愈和好转而下降；而,PHC,则血清,AFU,持续升高，且升高幅度较大。因此,AFU,测定还有鉴别诊断的意义。,AFU,活性升高与肝功能受损和肝细胞破坏无关，是由于癌细胞本身代谢所致。有研究提示,AFU,诊断肝细胞癌（,HCC）,的敏感性好，而特异性较,AFP,为低。血清,AFU,的活性和阳性率与肝癌直径大小无明显相关性。血清,AFU,活性与,AFP,水平无相关性，,AFP,阴性和,AFP,升高而不足以诊断,PHC,患者，其血清,AFU,的阳性率达80.8%。肝组织活检证实为,PHC,者，血清,AFU,的阳性率67%为,AFP,阳性率（20%）三倍以上。因此,AFU,测定对,AFP,阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。,AFU,与,AFP,联合检测可提高肝癌的检出率。,Giadina,等对肝硬化患者进行随访研究，结果表明，血清,AFU,活性是早期发现,HCC,的有用指标，血清,AFU,明显增加的肝硬化患者应及时检测其它肝癌标志明确诊断。,临床意义,测定,AFU,活性还有有利于不同类型白血病分化程度的认识，从而指导临床诊断和治疗。,Besly,等报道，,B,细胞性慢性淋巴细胞白血病患者白细胞,AFU,活性明显低于其它类型白血病，认为这与,B,细胞属性无关，而是恶性细胞的增殖产物。,研究表明，随妊娠周数增加血浆,AFU,递增，在分娩或人工终止妊娠后，迅速下降，5天后降至正常。胎儿、胎盘组织也可影响妊娠时血浆,AFU,活性，故测定,AFU,可作为妊娠的监测指标。卵巢癌患者血清,AFU,活性下降。,胃癌患者血清,AFU,升高，急性胰腺炎不升高，囊性纤维变性伴发胰腺炎时则下降。,临床意义,PHC,与,HCC,时,AFU,阳性率,67.8%,HCC,87%,82.0%,75.%,76.0%,81.2%,PHC,翟,飞,等,报 道,王,晓玲等,报 道,Dongnier,等,报 道,谭欣诚,等,报 道,张世民等,报 道,杨申海,报 道,两百例病人血清,AFU,活性(,U/L),正常对照 137 0 0 6.06,1.31,PHC 25 18 72.0,14.679.55,急性肝炎 45 6 13.3 6.87,2.93,慢性肝炎 69 7 10.1 6.23,2.74,肝硬化 45 5 11.1 6.51,2.91,其他消化系统肿瘤 16 1 12.5 6.75,2.58,组 别 例数 异常数 异常率,Xs,健康人与肝病患者血清,AFP,浓度,AFU,活力测定结果,组 别,n AFP(,ug,/L)AFU(,nmol,/ml.h,AFU,阳性率(%),正常对照 114 10.2,2.1,214,87 0,PHC 46 264124 884364,82,肝硬化 28 13.1,3.1 22694,5,.6,急性肝炎 42 10.4,2.2,214,89,0,慢性肝炎 38 11.2,2.4,226,92,3,.8,七例,PHC,患者术前、术后,AFU,活力测定结果,代 号,年龄 术前,AFU,活力(,nmol,/ml。h),术后,AFU(,nmol,/ml.h,1 36 896 398,2 38 776 386,3 64 541 260,4 59 596 254,5 70 492 194,6 35 964 410,7 52 524 304,注意事项,1.本法禁止使用肝素和橼酸盐血浆.可使用,EDTA-Na2、,草酸盐、,NaF,血浆。,2.试剂应注意避光密闭低温保存(2-8或-20)。,3.本试剂反应线性期长,为了更好的发挥试剂性能,建议用户在设置参数时反应开始读数时间(延滞时间)应大于90秒,以更好的减少共存物质的基质效应。,4.本法由于使用理论校准因素(,F=2012),建议用户根据各自的情况建立期望值(参考值)范围。,</p>