sysmexXN原理.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,XN,检测原理,XN,机型,机型,细胞检测通道,B4,DIFF+WNR,B3,B4,+,RET,B2,B4,+PLT-F,B1,B4,+,RET,+PLT-F,A2,B4,+,WPC,+,RET,A1,B4,+,WPC,+,RET,+PLT-F,基本原理,WNRWDFWPCRETPLT-F,通道,半导体激光,+,流式细胞术,+,核酸荧光染色,溶血剂,：,Lysercell,WNR,染色液,：,Fluorocell,WNR,WNR,散点图,SFL,：,侧向荧光,FSC,：,前向散射光,BASO,WBC,NRBC,Debris,项目,WBC,NRBC,BASO,报警信息,PLT Clumps?,NRBC Present,WBC Abnormal Scattergram,原理,：,WNR,通道,New,嗜碱性,粒细胞,淋巴细胞,单核细胞,粒细胞,（中性粒细胞,嗜酸性粒细胞等）,有核红细胞,红细胞,弱,中,强,极弱,极弱,中,中,强,侧向荧光,(,SFL),前向散射光,(,FSC),细胞膜通过,溶血,荧光,NRBC,为常规报告参数的临床意义,自动修正白细胞计数,新生儿白细胞计数的正确,溶血性贫血病人的诊断、治疗,放化疗,病人的治疗监测,重症,ICU,病人的预后,有效降低推片复检率,由于在,CBC,模式下该通道用于,WBC,测定，因此可以在全体样本中测得,NRBC,计数，以及由,NRBC,数修正过的,WBC,数据,。,但是如果遇到白细胞散点图异常，仍然需要显微镜检查,由于采用荧光染色进行检测，红细胞没有被染色，所以不存在红细胞溶血不良所造成的影响。,没有采用荧光染色的仪器做出来的结果会偏高,卫生部临检中心下发质控品的,WBC,结果上报：,WBC+NRBC,#,（因为非配套质控品中的白细胞固化比较严重，不能正常染色，部分白细胞当成了,NRBC,检测）,WNR,通道的要点,原理,：,WDF,通道,溶血剂,：,Lysercell,WDF,染色液,：,Fluorocell,WDF,WDF,散点图,SSC,：,侧向散射光,SFL,：,侧向荧光,项目,NEUT,LYMPH,MONO,EO,IG,报警信息,Atypical lymph,?,Blast/Abn Lymph,?,IG present,PLT,C,lumps,?,WBC Abnormal Scattergram,淋巴细胞,单核细胞,中性粒,细胞,嗜酸性,粒细胞,异型淋巴粒细胞,幼稚,白细胞,溶血,染色,侧向散射光,(,SSC),侧向荧光,(,SFL),中,中,弱,弱,中强,弱,弱,中,强,弱中,EO,NEUT,LYNPH,Debris,MONO,IG,Aty_Lymph,(HFLC),Blast,Abn_Lymph,异淋出现在领域的细胞数可以参考,HFLC,(,参考参数项目,),等同于,XE-2100,中的,Other,HFLC,代表什么细胞？,HFLC,代表什么细胞？,异型淋巴（正常白细胞分类散点图正常，异常报警,Atypical lymph,?,）,异常淋巴（散点图异常，没有完整的五分类结果，有灰色散点，仪器报警,Blast/Abn Lymph,?,）,原始细胞（髓系）（散点图异常，没有完整的五分类结果，有灰色散点，仪器报警,Blast/Abn Lymph,?,）,IG,代表什么细胞？,部分杆状核、晚幼粒细胞、中幼粒细胞、早幼粒细胞（深蓝色散点，仪器报警,IG present,，,该报警需要在,IPU,中打开）,8,血小板聚集,PLT Clumps,Negative,WDF ch,Width-FSC,大量血小板聚集在一起,血小板聚集，直方图异常,白细胞聚集,仪器报警：,Difference between WNR and WDF,对策：,采用,3R,功能，自动检测,LW,模式，采用,WDF,通道检测,WBC,水浴重检,WNR(FSCW-FSC),WDF(FSCW-SFC),可以监测大量血小板聚集和白细胞聚集,可以定量检测原始细胞和异型淋巴细胞（,HFLC,）、幼稚粒细胞,(IG),低值白细胞模式可以提高精密度为临床提供准确的停药时机，提高幼稚细胞的灵敏度,WDF,通道的要点,原理,：,WPC,通道,溶血剂,：,Lysercell,WPC,染色液,：,Fluorocell,WPC,WPC,散点图,SSC,：,侧向散射光,SFL,：,侧向荧光,FSC,：前向散射光,WBC,WBC,Blast,Abn Lymph,Blast,Abn Lymph,项目,HPC(,参考参数,),标志,Abnormal lymph,?,Blasts?,Atypical lymph?,异常淋巴细胞,原始细胞,成熟,白细胞,溶血,染色,侧向散射光,(,SSC),侧向荧光,(,SFL),前向散射光,(FSC),中强,弱,中,强,弱中,弱,弱,弱强,弱强,HPC,HPC,在,WPC,通道，采用荧光染色可以区分,Abnormal Lymph,和,Blast,的异常细胞,。,主要作用：,1,）白血病的初步筛选，,2,）降低复检率，,3,）,HPC,的定量检测，用于,PBSCT,干细胞采集时间的判断,WPC,通道的要点,原理：,RET,通道,稀释剂,：,CELLPACK DFL,染色液,：,Fluorocell RET,RET,散点图,SFL,：,侧向荧光,FSC,：,前向散射光,RBC,PLT-O,LFR,HFR,MFR,项目,RET,RET-He,标志,RET Abnormal scattergram,Fragments?,白细胞,网织红细胞,红细胞,侧向荧光,(,SFL),前向散射光,(FSC),染色,弱,中,强,强,强,强,15,FRC#,，,FRC%,原来没有红细胞,碎片没有,标准,现在需要报告裂片红细胞的百分比需要镜检至少,500,个红细胞,主要见于血栓性血小板减少性紫癜、,DIC,、微血管病性溶血性贫血、心源性溶血性贫血、化学中毒、肾功能不全,FRC Gate,Corrected area for small RBC,ICSH,的形态学标准,-2014,年,16,现在需要报告裂片红细胞的百分比，需要镜检至少,500,个红细胞,高,EPO,浓度加速,RET,在骨髓中的释放速度，,RET,在骨髓中带网时间缩短，在外周血中带网时间延长，造成外周血,RET,增高的假象。,绝大部分贫血疾病，,EPO,与,HCT,或,HGB,呈规律性的反比，根据贫血程度对网织红细胞进行纠正，即,RPI,（网织红细胞生成指数）,RPI(,网织红细胞生成指数,),RPI,的计算公式,Hematocrit,Retis,-residence in the Blood,45%,1 day,35%,1,5daysShift,25%,2 days,15%,2,5 days,RPI,=,Reti%x Hct,0,45(Ideal Hct)x,residence,Retis in the Blood,RPI,的临床意义,正常人,RPI,为,1.0,（建议建立适合自己的参考范围）,若,RPI,为,0.1,，表示骨髓有效造血能力为正常的,10%,，如重度再障、巨细胞性贫血。,若,RPI,为,3.0,，表示骨髓有效造血能力为正常的,3,倍，这是诊断溶血状态的可靠依据。,若,RPI,为,2.0,左右，表示造血代偿能力不足，或贫血治疗有效后的恢复过程中。,可以定量检测红细胞碎片,。,增加了,RET-He,报告参数。,可以检测,RPI,（网织红细胞生成指数）,PLT-O,可以排除大部分碎片的干扰，用于报告,PLT,RET,通道的要点,稀释剂,：,CELLPACK DFL,染色液,：,Fluorocell PLT,PLT-F,散点图,SFL,：,侧向荧光,FSC,：,前向散射光,RBC,PLT-F,IPF,WBC,项目,PLT,IPF,标志,P,LT Abnormal scattergram,PLT Clumps?,原理：,PLT-F,通道,红细胞,血小板,IPF,(,未成熟血小板,）,侧向荧光,(,SFL),前向散射光,(FSC),强,弱中,弱,染色,弱中,中强,中,Fluorocell PLT,主要对含核酸丰富的细胞内构造进行染色,小胞体,（,核糖体,RNA,）,线粒体,（,MtDNA,）,红细胞,红细胞,1m,开放小管系,血小板特殊颗粒,(,颗粒,),糖原颗粒,微丝,致密颗粒,小胞体,线粒体,原理,：,PLT-F,通道,PLT-F,IPF,SFL,SFL,FSC,PLT-O(XE),PLT-F(XN),FSC,PLT-F,PLT-O,IPF,IPF,Lower size PLT,Lower size PLT,PLT-F,与,PLT-O,的差异,PLT-F,通道的染液对,PLT,的染色效果更敏感,检测颗粒数是,PLT-O,或,PLT-I,的,5,倍,24,IPF,（,RP,）的临床意义,血小板减少症的病因学诊断,生成减少：再障、白血病及肿瘤，由于骨髓受抑制，血小板总数减少，,RP,比例大致正常，而,RP,绝对值明显低于正常。,破坏增加：,ITP,，骨髓生成血小板加快，外周血中新生血小板增多，使,RP,比例升高。但由于血小板寿命缩短，使,RP,绝对值减少。脾亢虽有血小板减少，但,RP,比例接近正常，,RP,绝对值亦低于正常水平,消耗增加：,TTP,，,DIC,，虽有血小板减少，但,RP,比例接近正常，,RP,绝对值亦低于正常水平。,血小板聚集,25,血小板聚集散点图,血小板未聚集散点图,由于选择性染色血小板，故网织红细胞难以染色,。,另外，也不会受到红细胞碎片的影响,。,5,倍计数，即使是血小板低值样本，也可高精度检测,。,结果与参考方法几乎一致,IPF,仅在,PLT-F,通道可以检测,。,鉴别血小板减少的原因,敏感的监测血小板聚集,PLT-F,通道的要点,血细胞通过,电阻值发生变化,脉冲被检测,当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号,信号的大小与通过的细胞体积呈正比,电阻变化的次数,细胞数,感应区域,(,感应电阻变化的区域,）,时 间,电阻值,红细胞,血小板,基本原理：直流阻抗法,通道：,RBC/PLT,计数粒子较多，重复性好,正确测定体积信息,阻抗法的优点,RBC/PLT,通道,鞘流电阻抗法,直接测量,：,RBC:,红细胞数,PLT:,血小板数,根据脉冲信号,解析测量,：,HCT:,红细胞压积,PCT,：血小板压积,根据直方图,解析测量,：,RDW-SD,：红细胞分布宽度,RDW-CV,：红细胞分布宽度,PDW,：血小板分布宽度,P-LCR,：大血小板比率,计算：,MCV:,平均红细胞体积,MCH:,平均血红蛋白含量,MCHC:,平均血红蛋白浓度,MPV:,平均血小板体积,RDW-CV,点,L1,和,L2,在总分布区域中的出现频率为,68.26%,，使用下列方程计算,RDW-CV,：,RDW-SD/RDW-CV,RDW-SD,假设峰值高度为,100%,，在,20%,频率水平上的分布宽度即为,RDW-SD,。单位用,fL,表示，其中,1fL=10,-15,L,。,RDW-CV(%)=,100,L2-L1,L2+L1,MCV/MCH/MCHC,MCV(,红细胞平均体积,)=HCT/RBC,MCH(,平均红细胞血红蛋白含量,)=HGB/RBC,MCHC(,平均红细胞血红蛋白浓度,)=HGB/HCT,血小板直方图,分布范围：,LD(2,6)Fl;UD(12-30,）,fl,之间,反映参数：,PLT,、,MPV,、,PDW,高位干扰：小,RBC,、大血小板，血小板聚集,低位干扰：电流、尘埃等,PL,PU,100,%,20,%,10 fl,20 fl,30 fl,40 fl,12 fl,PDW/P-LCR,PDW,假设峰值高度为,100%,，在,20%,频率水平上的分布宽度即为,PDW,。单位用,fL,表示，其中,1 fL=10,-15,L,。,P-LCR,P-LCR,为由,12 fL,界标或更大界标得到的巨型血小板的比值。计算时，将固定界标与高界标之间的粒子数，同低界标与高界标之间的粒子数相比而得到一个比值。,2-2.,基本原理,：,SLS-,血红蛋白法,HGB,通道,血红蛋白（四聚体）,亲水基,疏水基,（,月桂基硫酸钠,）,SLS,的疏水基作用于,珠蛋白,（第,2,阶段）,SLS,的亲水基与,Fe3+,结合,（第,4,阶段）,珠蛋白,亚铁血红素,珠蛋白的,结构改变,（变性）,亚铁血红素的铁（,Fe2+,）,被氧化（,Fe2+Fe3+,）,（第,3,阶段）,白细胞通道监测疟原虫,34,WDF-ch,散点图,(SSC-SFL),WDF-ch,扩展散点图,(SSC-FSC),疟原虫散点,疟原虫区域,RET,通道监测疟原虫,35,