实验一-常用仪器的基本操作和使用课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,常用基本度量仪器的使用,Department of life science,生物化学实验室规则,1,、自觉遵守实验室纪律，严禁在实验室饮食、吸烟、大声谈笑，或进行与实验无关的活动。,2,、进入实验室后不要擅自乱动仪器和药品，使用前必须经过实验教师的指导。,3,、必须熟悉实验室及周围的环境，如水、电、灭火器放置的位置。,4,、爱护仪器、设备，严格遵守操作方法。,生物化学实验室规则,5,、使用药品、试剂及其它物品必须注意节约，仪器损坏应如实向教师报告，并填写损失登记表。,6,、药品仪器应整齐摆放在一定位置，用后放回原位。,7,、实验完毕后立即关闭水龙头、拔下电源，切断电源。最后离开实验室前，两次认真检查，杜绝一切隐患。,8,、不能用手直接取药品。加热、浓缩液体时，不能俯视加热液体，加热试管时，试管口不能对着自己或他人。,实验要求,1,、,4,人一小组，自由组合，组合后把每个小组名单上交。,2,、每组都要参与准备实验，配制相应的试剂及准备实验过程中需要的物品。,3,、实验前一定要写好预习报告，熟悉实验原理及步骤，杜绝看一眼书作一步。,4,、实验过程中，尊重实验事实，记录原始数据，决不允许私自乱改实验数据。,5,、出现异常情况也要做好记录，分析原因。,6,、实验过程中，争取每个人都能动手操作，同组成员注意互相协作、配合。,7,、实验结束后，值日生打扫卫生，物品，试剂归位。,8,、做完实验签名，作为出勤考核的依据,9,、认真填写实验报告，结合自己的实验过程分析实验结果，要独立思考，认真完成课后思考题。,10,、必须穿实验服。,实验要求,实验室常用仪器,试管，试管夹，试管架,移液管，移液管架,量筒，量杯,烧杯，三角瓶,容量瓶,玻璃棒，磁力搅拌器,分析天平,酒精灯，水浴锅,离心机,超声波破碎仪,酸度计,分光光度仪,实验室常用仪器,磁力搅拌器的使用,分析天平的使用,离心机的使用,超声波破碎仪的使用,量筒的使用,量筒是度量,液体体积,的仪器。,根据不同的需要，来选用不同的容量。,读取量筒的刻度值，一定要使视线与量筒内液面,(,半月形弯曲面,),的最低点处于同一水平线上,。否则会增加体积的测量误差。,量筒不能做反应器用，不能装热的液体。,量筒的使用,量筒的使用,2.,刻度移液管,（,1,）刻度达尖端刻度移液管,（,2,）刻度不达尖端刻度移液管,说明：国际标准化组织统一规定在分度吸管的上方印上各种彩色环，其容积标志如下：,标称容量（,mL,）,色标,标注方式,0.1,红,单,0.2,黑,单,0.25,白,双,0.5,红,双,1,黄,单,2,黑,单,5,红,单,10,桔红,单,25,白,单,50,黑,单,（,1,）用右手拇指，中指拿住移液管上端，把它的下端插入液体深处，用橡皮球小心吸取液体。,（,2,）当移液管内的液面上升到稍高于刻度线时，用拇指迅速堵紧移液管上口，并把移液管垂直提起，使移液管尖端离开液面，但不要从容器中取出。,（,3,）视线与标线成水平，左右移动拇指和中指，使移液管在拇指和中指之间移动，但食指仍然轻轻按住管口，液面缓慢下降，到液体弯月面与标线相切时，立即停止转动并按紧食指，使液体不再流出。,2.,使用移液管吸取液体,（,1,）垂直地拿移液管，下口靠受液容器的内壁，受液容器与移液管成,45,。,（,2,）放开食指，使液体自由流出。,（,3,）液体自由流完后，停,10s,再把移液管拿开。,3.,使用移液管放出液体,在调定零点和排放溶液的过程中，移液管都要保持垂直，其流液口必须接触倾斜的器壁并保持不动；等待,15s,后，流液口内残留的一点，除特别注明,“吹”,字以外，溶液绝不能用外力使其被振出或吹出。另外，移液管用完应放在管架上，不要随便放在实验台上，尤其防止管颈下端被沾污。,移液管使用,注意事项,滴定管的使用,（一）按构造分类,1.,酸式滴定管,下端有玻璃活塞，用来装酸。（因为,NaOH,和,KOH,等强碱溶液能腐蚀玻璃，是活塞粘牢，不能转动，故不能装碱溶液）,2.,碱式滴定管,下端有一橡皮管（用弹簧或玻璃球来控制流量），用来装碱。,滴定管的使用,滴定管是容量分析中最基本的量器，多用来测定滴定时所能消耗溶液体积。,（三）用途,1.,滴定管的读数,（,1,）液体在滴定管内的液面呈弯月形，读数时，应使视线与弯月面最低点处相平，读取与最低点相切的刻度。,（,2,）有的滴定管后壁有一条乳白底兰线，在液面处兰色变细，使读数准确。读法是读液面上下两兰线的焦点处，若没有白底兰线，可以用一张白纸为背景，便于读数。,（四）滴定管的用法,（,1,）滴定管的选择和修理,根据要装的液体选择酸式或碱式滴定管,检查滴定管是否漏水,2.,滴定前的准备,方法,酸式滴定管时，关闭活塞，用水充满至“,0”,线以上，直立约,2min,观察有无水滴滴下或从活塞隙缝渗出，然后将活塞转,180,，重复以上操作一次。碱式滴定管只需装水直立,2min,即可。,修理,如果发现滴定管漏水或酸式滴定管活塞转动不灵，则碱式滴定管需换玻璃球及橡皮管。酸式滴定管需拆下活塞涂油。涂油时要涂均匀的一薄层，即转动活塞，从外面观察时，全部为透明。,（,2,）蒸馏水洗涤,一共洗涤,2-3,次，第,1,次,10mL,，以后几次可各用,5,毫升。洗涤时边转动边倾斜，使水布满全管，并稍微振荡，立起以后，打开活塞使水流出一些冲洗管口，然后关闭活塞，将其余的水从上部管口倒出。,（,3,）洗净滴定管滴定前，用少量待装溶液润洗,3-4,次，每次约,5-10mL,。,（,4,）把溶液由试剂瓶直接倒入滴定管，直到液面略高于刻度“,0”,为止。,不要用漏斗或烧杯，以保证在转移过程中溶液的浓度不变。,（,5,）出口管中气泡的清除。,酸式滴定管,滴定管倾斜约,30,，左手迅速打开活塞使溶液冲出即可。,碱式滴定管,橡皮管向上弯曲，出口斜向上方，用两指挤压玻璃球稍上侧边橡皮管，使溶液从出口管喷出，气泡便逸出，继续一边挤玻璃球，一边放直橡皮管，则气泡可以完全除去。,滴定管必须保持垂直的夹在夹子上。,控制溶液流速的,3,种方式滴加法：连续式滴加、间隙式滴加、液滴悬而不落。,3.,滴定管的操作法,（,1,）排出气泡后，调整液面至零刻度线或零刻度以下附近处，记下读数，是为初读数。观察滴定管尖端是否悬有液滴，若有，应除掉。,（,2,）滴定时锥形瓶口接近滴定管尖端，不断摇动锥形瓶，使溶液混合均匀。,（,3,）滴定时不应太快，每秒,3-4,滴为宜，滴定将近终点时更要慢，确保每一滴都充分混合均匀。,（,4,）滴定到终点后，关闭活塞，等,1-2min,可读数，为终读数。完毕后，剩余液不能倒回原瓶，用少量蒸馏水洗滴定管,2-3,次，装满蒸馏水至“,0”,以上，用试管罩好。,4.,滴定,5.,滴定方法,容量瓶的使用,一,构造,1.,有磨口塞子,2.,细颈上有标线,表示在所指温度，一般为,20,，当液体充满到标线时，液体体积恰好与瓶上所注明的体积相等。,二,用途,配制一定体积的溶液。（只能配制溶液，保存溶液需移到细口瓶中去）,1.,检查是否漏水,注入水至标线，左手按住塞子，右手指尖握住瓶底边缘。把瓶子倒立,2min,，观察有无漏水现象。,2.,将溶液从烧杯转入容量瓶,3.,注入蒸馏水,4.,滴加水至标线（用洗瓶或滴管）注意视线平行标线。,5.,重复倒转容量瓶十余次，使瓶中溶液混合均匀。,三,容量瓶使用,三,容量瓶使用,1.,为了避免打破塞子，应该用一根线绳把塞子系在瓶颈上。,2.,假如固体经加热溶解，则必须待冷却后才能转移到容量瓶中。,3.,假如把浓溶液稀释，则用移液管吸取一定体积的浓溶液放入容量瓶中，操作同上。,四,注意,分光光度计的原理及使用,原理：,是溶液中的物质在光的照射下，发生了对光的特定吸收的效应。不同的物质具有各自不同的吸收光谱。,当一波长一定的单色光通过有色溶液时，光的一部分被溶液吸收，一部分则透过溶液。如果入射光的强度为,I0,，吸收光的强度为,Ia,，透过光的强度为,It,，则：,I0=It+Ia,透过光的强度,It,入射光强度,I0,之比叫做透光率，以,T,表示，它是溶液光程度的度量，其有意义的取值范围为,0-1,：,T=It/I0,透光率的负对数为吸光度：,A=-lgT,吸光度,A,是溶液吸光程度的度量，其有意义的取值范围为,-1,。,T,A,I,说明,T=0,A,I,t,=0,入射光全部被溶液所吸收，以至透光强度，吸收程度最大,T=1,A=0,I,t,=I,0,入射光全部透射过溶液，根本未被吸收，吸收程度最小,当一束平行单色光垂直通过某有色溶液时，溶液的吸光度,A,与吸光物质的浓度,c,及液层厚度,b,成正比。这一规律称做朗伯,比耳定律，即：,A=Kbc,系数,K,是常数。当液层厚度,b,以,cm,、吸光物质的质量浓度,c,以,g/L,为单位时，吸数,K,就以,a,表示，称为吸光系数。此时朗伯,比耳定律表示为：,A=abc,吸光系数,a,的单位,L/gcm,。当液层厚度,b,以,cm,、吸光物质的浓度,c,以,mol/L,为单位时，吸数,K,就以,表示，称为摩尔吸光系数。此时朗伯,比耳定律表示为：,A=bc,摩尔吸光系数,的单位为,L/molcm,。它与入射光的波长、溶液的性质、温度等因素有关。当入射光的波长一定、溶液的温度和比色皿（溶液的厚度）均一定时，则吸光,A,只与溶液的浓度,c,成正比。,溶液对光的吸收有选择性，通常用光的吸收曲线来描述。将不同波长的光依次能过一定浓度的待测溶液，分别测定吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，所得的曲线为光的吸收曲线。吸收曲线上最大吸收峰处的波长称为最大吸收波长。选最大吸收波长进行测量，光的吸收程度最大，测定的灵敏度和准确度都高。,在测定样品前，首先要做工作曲线，即在样品测定相同的条件下，测量一系列已知准确浓度的标准溶液的吸光度，作出吸光度,浓度曲线，即得工作曲线。测出样品得吸光度后，就可以从工作曲线上求出浓度。,当,和,l,一定时，溶液的吸光度,A,和浓度成正比。因此通过测定标准溶液及待测样品溶液的吸光度，可以求出待测样液的浓度。,分光光度计操作方法,1,使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。,Abs.,T%,Con.,Factor,A/T/C/F,SD,0%,0A/100%,操作方法,2,开启电源，指示灯亮，选择开关置于“,T”,，波长调至测试用波长。仪器预热,2030,分钟。,3,打开试样室盖（光门自动关闭），按“,0%”,按钮，使数字显示为“,00.0”,，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“,100%”,旋钮，使数字显示为“,100.0”,。,4,预热后，按步骤,(3),连续几次调整“,0”,和“,100%”,，直至打开和关闭试样室盖的读数都正确且稳定，仪器即可进行测定工作。,5,吸光度,A,的测量按,(3),调整仪器的“,00.0”,和“,100%”,，将选择开关置于“,A”,，按吸光度调零按钮，使得数字显示为“,.000”,，然后将被测样品移入光路，关闭试样室盖，显示值即为被测样品的吸光度值。,操作方法,操作方法,6,如果大幅度改变测试波长时，在调整“,0”,和“,100%”,后稍等片刻，（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“,0”,和“,100%”,即可工作。,7,每台仪器所配套的比色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。,用已知浓度的标准溶液，进行梯度稀释，对不同稀释浓度的标准样的吸光度进行测定，以溶液浓度为横坐标，吸光度,A,为纵坐标，划出标准曲线。测出待测样的吸光度，在标准曲线中找到相应的横坐标位置即待测样的浓度。,标准曲线的制作,试 管 号,标准磷溶液（,mL,）,水,(mL),相当于无机磷量（,ug,）,定磷试剂,(mL),1,0.0,3.0,0.0,3.0,2,0.2,2.8,2.0,3.0,3,0.4,2.6,4.0,3.0,4,0.6,2.4,6.0,3.0,5,0.8,2.2,8.0,3.0,6,1.0,2.0,10.0,3.0,无机磷标准曲线制作数据,试管号,无机磷量（,u g,）,吸光值,A,660nm,1,0,2,2,3,4,4,6,5,8,6,10,无机磷标准曲线制作表格,磷含量,吸光值,A,O,无机磷标准曲线,思考题,试述分光光度计的使用原理？,离心机使用时应注意哪些事项？,分析天平的平衡泡作用？,常用基本度量仪器的使用,Department of life science,