灭菌技术入门知识1.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,灭菌：用物理或化学方法杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。,灭菌法：杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的方法或技术。,无菌：指在任一指定物体、介质或环境中，不存在活的微生物。,无菌操作法：整个操作过程中利用或控制一定的条件，使产生避免被微生物污染的一种操作方法或技术。,防腐：指用物理或化学的方法抑制微生物生长与繁殖的手段，亦称抑菌。,消毒：指用物理或化学方法杀灭或除去病源微生物的手段。,灭菌的相关概念,射线灭菌法,滤过灭菌法,气体灭菌法,物理灭菌法,湿热灭菌法,灭菌法,干热灭菌法,化学灭菌法,药液灭菌法,热压灭菌法,煮沸灭菌法,微波灭菌法,流通蒸气灭菌法,紫外线灭菌法,低温间歇灭菌法,干热空气灭菌法,火焰灭菌法,辐射灭菌法,灭菌方法的分类,利用蛋白质和核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和过滤方法，杀灭或除去微生物的技术。,火焰灭菌法,干热灭菌,干热空气灭菌法,热灭菌法 热压灭菌法,流通蒸气灭菌法,湿热灭菌,煮沸灭菌法,低温间歇灭菌法,物理灭菌技术,适于耐火焰材质（金属、玻璃及陶器等）,适于耐高温的玻璃和金属制品,适于消毒及不耐高热的物品的灭菌，但不能保证杀灭芽孢,用于注射器等的灭菌，必要时加入抑菌剂,适于不耐热、热敏物料的灭菌,干热灭菌法:是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。,原理：高热使蛋白质凝固变性；水分缺失使微生物原浆电解质浓缩死亡。火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等）物品与用具的灭菌,干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品的灭菌，不适合橡胶、塑料及的灭菌。在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强，必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此。干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，一般规定：135-140灭菌3-5h；160-170 灭菌2-4h；180-200 灭菌0.5-1h。,干热灭菌法,湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。湿热灭菌法可分为：热压灭菌法、煮沸灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法、巴氏消毒法。,湿热灭菌法,用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。,能杀灭所有微生物和芽孢。,适于耐高热和耐高压蒸气的所有玻璃容器，金属器械，瓷器和橡胶塞。,116（67kPa）：40min；121（97kPa）：30min；126（139kPa）：15min,影响湿热灭菌的因素：,微生物的种类和数量：,各细菌对热的抵抗力相差很大，处于不同发育阶段，所需灭菌的湿度与时间也不相同，繁殖期的微生物对高温比衰老时期的抵抗力小得多,蒸气性质,灭菌器物的性质和灭菌时间,温度，压力,热压灭菌法,辐射灭菌法,微波灭菌法,紫外线灭菌法,射线灭菌法,射线,穿透力强，灭菌效率高，但设备费用较高。,适用于热敏性器物,波长200-300nm，最强为254nm,紫外线使核酸蛋白变性而杀灭微生物,适于物体表面和无菌室,能穿透介质和器物的深部，低耗能、低温、无污染、易操作,适于不耐热器物的灭菌,适于对热不稳定的溶液、气体、水等物品的灭菌,滤器孔径须小于芽孢体积（小于0.5微米）,除菌滤膜分疏水和亲水，孔径一般不超过0.22微米,过滤效率用LRV表示,过滤灭菌法,气体灭菌法：,环氧乙烷、气态过氧化氢,用于环境消毒及不耐热的医疗器械、设备和设施的灭菌,药液灭菌法：,用于物体表面：如皮肤、无菌器械和设备的灭菌,70%乙醇、1%聚维酮碘溶液、苯扎溴铵（新洁尔灭）、酚或煤酚皂等,化,学灭菌法,EO可以杀灭各种微生物,包括细菌繁殖体、芽胞、病毒和真菌孢子,是一种广谱灭菌剂。一般认为是由于它能与微生物的蛋白质、DNA和RNA发生非特异性烷基化作用。水溶液中的,EO能使蛋白质上的基团被烷基化,使蛋白质失去了在基本代谢中需要的反应基,阻碍了细菌蛋白质正常的化学反应和新陈代谢,从而导致微生物死亡。,EO灭菌法,EO灭菌的优点可用于,不耐高温、不耐湿物品,的灭菌。(2)环氧乙烷被认为是一种灭菌效果最好的化学灭菌剂,可杀灭所有微生物包括细菌芽胞。(3),穿透性强,可用以各种难通透部位的灭菌。(4),对物品损坏小,对不耐热精密仪器灭菌有着非常广泛的用途。(5)灭菌时,可以用各种包裹材料包裹,便于储存,、,运输,打开包裹即可使用,避免了交叉污染,的危险。(6)有标准的,化学、生物监测,手段,(1)整个灭菌循环时间较长,其原因是,需较长时间,通风以去除EO残留。,(2)EO有毒,是可疑的致癌物,必须控制室内空气中EO的浓度低于国家规定的标准。,(3)EO易燃易爆,储存和灭菌时绝对不能泄露。必须选择安全的灭菌器,进行安全操作和储存。,EO灭菌法优缺点,时间气体灭菌不是一个快速过程,灭菌时间必须足够杀灭微生物,其时间长短受以下因素影响:,灭菌物品的洁净程度,;,微生物的湿润和含水量,;,所用包装材料的种类和密度,;,包裹的大小和灭菌负荷的装载情况,;,EO的浓度,;,灭菌时温度,;,EO气体类型,等。,温度EO灭菌时,温度会影响微生物杀灭的速率,据测算,温度每升高10,芽胞杀灭率提高1倍,温度可增加EO的穿透力,。医院使用的灭菌器,一般设置的温度在,4960,之间,少量不能耐受此温度物品,可选择,3538,之间但此时必须提高EO的浓度或延长灭菌时间。,EO的浓度医院灭菌器常用的浓度为,450750mg/L,在一定的温度和相对湿度水平下,EO浓度升高(从50500mg/L),微生物杀灭率也显著增加,灭菌时间也随着EO浓度达到其最高点而相应缩短。,影响EO灭菌参数,H,2,O,2,等离子灭菌技术是在灭菌舱内，充分利用活性极强的H,2,O,2,的等离子体，结合,H,2,O,2,本身的强氧化性,，作用于微生物膜脂，DNA和其他重要细胞结构，,破坏其生命力,，同时将灭菌舱内，器械表面及管腔内剩余的H,2,O,2,分解成水和氧气，从而达到,快速，安全，环保,的灭菌法,H,2,O,2,低温等离子技术,灭菌优点 对人体及环境安全，由于过氧化氢等离子低温灭菌器的特殊灭菌原理，在灭菌循环结束后没有危害物质残留，灭菌物品不必进行通风，取出后即可使用；而且由于其灭菌时间短，灭菌时间,55 min或72 min,使用的局限性 环氧乙烷由于其极强的穿透性，可用于各种难易部位的灭菌，而过氧化氢等离子低温灭菌器则有其局限性，不可使用纸类及棉布类的包装材料；灭菌物品中不可有任何含有木质纸浆的物品，以及由含,纤维素,的材料制成的物品；,油类、粉类,会吸收H2O2的物质，不能选用此灭菌方法处理；不完全干燥的物品也不能被处理；,管腔直径1 mm及管道长度2 m的物品,，须使用增强剂。,H,2,O,2,和EO的比较,常用的化学消毒剂,消毒剂名称,消毒效力,杀菌作用原理,使用范围,注意事项,乙醇,中效,使菌体蛋,白凝固变性,，,但对肝炎病毒及芽胞无效,以,70%75%,溶液作为消毒剂，多用于消毒皮肤,95%溶液,可用于燃烧灭菌,易挥发需加盖保存并定期调整其浓度 低于70%浓度则消毒作用差,有刺激性,不宜用于粘膜及创面的消毒,碘伏,中效,是碘与表面活性剂的不定型结合物，破坏细胞膜的通透性屏障，使蛋白质漏出后与细菌,酶蛋白,起碘化反应使之,失活,；能杀灭细菌病毒等,0.5%1%有效碘溶液用于外科手术及注射部位皮肤消毒，涂擦2次 0.1%有效碘溶液用于体温计消毒,0.05%,有效碘溶液用于黏膜、烧伤、创伤涂擦或冲洗,碘伏稀释后稳定性差，宜现配现用。避光密闭保存 皮肤消毒后留有色素，可用水洗清,戊二醛,高效,与菌体蛋白质反应，使之灭活；能杀灭细菌、真菌、病毒和芽胞,2%戊二醛溶液加入0、3%碳酸氢纳，成为2%碱性戊二醛，用于浸泡器械、内窥镜等；,消毒需1030 min,灭菌需710h,浸泡金属类物品时，加入0.5%亚硝酸钠防腐 灭菌后的物品，使用前用无菌蒸馏水冲洗 内窥镜连续使用需间隔消毒10min,每天使用前后各消毒30min，消毒后用冷开水冲洗 每周过滤1次，每23周更换消毒剂1次,福尔,马林（37%40%的甲醛溶液）,高效,菌体蛋白变性 酶活性消失,。能杀灭细菌 真菌 芽胞和病毒,物品消毒氧化法，备福尔马林消毒柜，取福尔马林4060ml/m3，加入高锰酸钾2040g/m3，柜内熏蒸，密封612h,熏蒸穿透力弱，衣物最好挂起消毒 温、湿度对消毒效果有明显影响，要求室温在l8以上，相对湿度在7090%,对人有一定毒性和刺激性,，使用时注意防护,苯扎,溴铵（新洁尔灭）,低效,是阳离子表面活性剂，能吸附带阴电的细菌 破坏细菌的细胞膜，最终导致菌体自溶死亡，又可使菌体,蛋白变性而沉淀,0.01%0.05%溶液用于,粘膜消毒,0.1%0.2%溶液用于,皮肤消毒,0.1%0.2%溶液用于消毒,金属器械，,浸泡1530min（加入0.5%亚硝酸钠以防锈）,对肥皂 碘 高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用 有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投入纱布、棉花等物品。对铝制品有破坏作用，故不能用铝制品盛装,最早使用的消毒药液,漂白粉,（Ca(ClO),2,）,芽孢有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的,休眠体,。,1850年,塞麦尔维斯,使医院产褥热病人的死亡率从12%下降到1%，开创了最早的无菌时代。,17世纪后叶，,巴斯德,由牛奶、葡萄酒、啤酒和许多食品放置久会变质，通过精心的研究发现了细菌。,小知识,