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动物细胞的原代培养专家讲座.pptx

上传人:a199****6536 文档编号:13233584 上传时间:2026-02-07 格式:PPTX 页数:38 大小:9.82MB 下载积分:8 金币
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,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,动物细胞原代培养,组织块法,动物细胞的原代培养专家讲座,第1页,无菌室,下风口,上风口,动物细胞的原代培养专家讲座,第2页,液氮罐,安全柜,动物细胞的原代培养专家讲座,第3页,着装,动物细胞的原代培养专家讲座,第4页,操作者进入无菌室前先用肥皂洗净双手,然后用1 新洁尔灭浸泡消毒5分钟,动物细胞的原代培养专家讲座,第5页,将小白鼠断颈处死,然后用75%酒精或1 新洁尔灭浸泡消毒,快速进入无菌室。,动物细胞的原代培养专家讲座,第6页,将小白鼠置超净工作台上,打开腹腔,动物细胞的原代培养专家讲座,第7页,用眼科剪和镊,将肾外膜剪破,并将其剥向肾门,去肾外膜及脂肪,,动物细胞的原代培养专家讲座,第8页,剪碎组织,动物细胞的原代培养专家讲座,第9页,接种组织块,动物细胞的原代培养专家讲座,第10页,移入培养箱中(注意贴有组织块一面朝上),,静止23小时,然后将细胞培养瓶轻轻翻转,继续静止培养。,动物细胞的原代培养专家讲座,第11页,观察,2448小时后若培养液变成黄色且混浊,表示已被污染;,若培养液变成紫色,普通细胞生长不好,则培养液pH过高;,若培养液显为橙黄、橘红且清澈,普通显示细胞生长良好。在相差显微镜下观察,若此时见细胞自组织边缘长出。,继续培养35日,再换部分或全部培养液,待多数组织块生长晕相接,小心挑掉组织块,继续培养34天,细胞贴满细胞培养瓶壁时便可进行传代培养。,动物细胞的原代培养专家讲座,第12页,骨髓瘤细胞培养,动物细胞的原代培养专家讲座,第13页,骨髓瘤细胞,动物细胞的原代培养专家讲座,第14页,消化数分钟,动物细胞的原代培养专家讲座,第15页,中止消化、吹散细胞,动物细胞的原代培养专家讲座,第16页,搜集细胞、离心,动物细胞的原代培养专家讲座,第17页,计数,动物细胞的原代培养专家讲座,第18页,细胞传代,37、5CO,2,培养,动物细胞的原代培养专家讲座,第19页,动物细胞的原代培养专家讲座,第20页,小鼠免疫试验,动物细胞的原代培养专家讲座,第21页,市售绵羊血,动物细胞的原代培养专家讲座,第22页,血球计数板计数,调整细胞浓度,动物细胞的原代培养专家讲座,第23页,抓小鼠方法,动物细胞的原代培养专家讲座,第24页,腹腔注射免疫,动物细胞的原代培养专家讲座,第25页,尾静脉免疫,动物细胞的原代培养专家讲座,第26页,皮下免疫,动物细胞的原代培养专家讲座,第27页,足垫免疫,动物细胞的原代培养专家讲座,第28页,脾脏免疫1,所需器具,称重,动物细胞的原代培养专家讲座,第29页,脾脏免疫2,注射麻药,动物细胞的原代培养专家讲座,第30页,脾脏免疫3,打结固定小鼠,动物细胞的原代培养专家讲座,第31页,脾脏免疫4,酒精消毒,去毛,碘酒消毒,动物细胞的原代培养专家讲座,第32页,脾脏免疫5,剪开外皮,剪开腹膜,找到脾脏,动物细胞的原代培养专家讲座,第33页,脾脏免疫6,注射抗原,动物细胞的原代培养专家讲座,第34页,脾脏免疫7,注射双抗,缝合伤口,动物细胞的原代培养专家讲座,第35页,每隔15天重复注射作加强免疫,共重复2次,动物细胞的原代培养专家讲座,第36页,第三次免疫之后10天,将小鼠断尾取血,用ELISA方法,检测血清效价。,动物细胞的原代培养专家讲座,第37页,取脾细胞融合前3天加强免疫一次,以活化B淋巴细胞,动物细胞的原代培养专家讲座,第38页,
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