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,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验五 细菌分离技术,一、实验目的,1.掌握微生物的分离与接种技术,2.学会用平板划线法分离微生物,二、注意事项:,1、要提前了解有关微生物的特性,2、做好准备工作(培养基、标准,菌株及其他材料的准备),3、无菌操作:,无菌操作转接培养物,三、实验原理:,从样品中分离纯化细菌,样品中混杂着大量的细菌,从里面分离,得到只含有这一种细菌的纯培养,纯培养,(Pure culture):,微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养,1.采样,()无菌采集样品,()要有针对性,分离()平板划线分离法,(2)释液倾注平皿,称取样1.0g,放入盛99m无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中,振荡使样品均匀分散成为悬液(10,-2,)。用1m的无菌吸头从中吸取0.5ml样品悬液,注入分装有4.5ml无菌水的试管中,吹吸3次,振荡均匀(10,-3,)。同样方法,配置成稀释度为10,-4,,10,-5,,10,-6,的样品溶液,各样取mL加在平皿中,倾注培养基,(3)涂布,用一支新的无菌吸头,分别由各浓度样品稀释液中各吸取0.1mL,分别放入培养基平板上,用无菌玻璃涂棒涂匀。每个浓度做2个平板。,3.培养,将培养基平板倒置于37温箱中培养24h,48h,观察菌落特征,4.制备纯培养,将培养后所需要的单个,菌落,分别钓,出,划线于平板上,37培养48h检查,菌落是否单纯,也可以用显微镜检查是,否是纯的细菌,
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