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,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,临床检验学实验课,实验,二,毛细血管采血,(Collection of capillary blood),白细胞计数,(White blood cell),实验,二,要求,1、掌握毛细血管采血,的,方法,了解不同 部位采血对检验结果的影响;,2、掌握显微镜,WBC,计数的,原理和方法;,3、熟悉,WBC,增高和减少的临床意义。,器 材,与,试 剂,器材,一次性消毒采血针、一次性微量吸管、小试管、75(,VV),乙醇棉球、无菌干棉球。,试剂,白细胞稀释液,(,2,冰醋酸,中加入10,g/L,结晶紫或亚甲兰,3滴),操作,1、实验准备,3、消毒,待干,2、按摩左手食指或中指,4、针刺(深度2-3,mm),5、拭 血(第一滴血),7、稀释(擦去吸管外余血、冲洗次2-3次,),返回,6、吸血(20,ul),注 意 事 项,1、采血部位皮肤应完整,无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。除特殊情况外,不要在耳垂采血。半岁以下婴幼儿由于手指小,可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采血;严重烧伤者可选皮肤完整处采血,2、必须严格按无菌技术操作,防止采血部位感染;做到一人一针一管,避免交叉感染,,注 意 事 项,4、第1滴血混有组织液,应擦去。如血流不畅 切勿用力挤压,以免造成组织液混入,影响结果的准确性。,5、在进行多项检查时,采集血液标本的顺序是,PLTRBCHbWBC,计数与分类。,原 理,用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。,二、,WBC,计数,操作,1、加稀释液,0.38ml,2、吸取血液20,ul,3、混匀、悬液变为棕褐色,4、充池,静止2-3,min,5、计数(四角4个大方格),图示,6、计算、出报告,注意事项,1、充池时,如充液不足、液体外溢、断续充液,或产生气泡、充液后移动盖玻片等,均会使细胞分布不均匀,造成计数结果不准确,应重新充池。一般情况下各大方格间的细胞数,相差不超过10,。若相差太大,应重新充池。,2、白细胞数量过多时,可采用加大稀释倍数的方法。如20,l,血加入到0.78,m,l,稀释液中或10,l,血加入到0.38,m,l,稀释液中;数量过少时,可采用扩大计数域的方法,如计数8个或9个大方格;也可采用减少稀释倍数的方法,注意事项,白细胞稀释液不能破坏有核红细胞,它可使白细胞计数结果偏高,此时应计算白细胞校正值(公式中的有核红细胞是指分类100个白细胞时所遇见的有核红细胞),WBC,校正值,L,返回,100 .,100+,有核,RBC,校正前,WBC,数,方法学评价,手工,血液分析仪,优点,简便易行、不需昂贵仪器,可用于血液分析仪器的校准,精密度和准确性较高、易于标准化、适合大规模健康人群普查,缺点,精密度和重复性欠佳,仪器昂贵、某些人为或病理情况(有核,RBC、,大,PLT,等)可干扰计数,本次实验顺序,2、按摩、消毒、针刺,1、准备微量吸管和,加,WBC,稀释液至,试管,内,4、准备计数池,盖玻片,3、用微量吸管分别吸取血20ul于WBC稀释液试管内,5,、,混匀,WBC,悬液,后 滴入计数盘中,6,、,2-3,min,后计数、计算、出报告,复 习 题,1、在进行毛细血管采血时应注意什么?,2、,WBC,计数的计数的区域、计数原则和 计算公式是什么?,3、,WBC,增高和减低的临床意义是什么?,
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