taqman探针原理.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,是,RNA,探针,。,TaqMan,荧光探针,是一种,寡核苷酸探针,，荧光,基团,连接在,探针,的,5,末端，而,淬灭剂,则在,3,末端。,PCR,扩增,时在加入一对,引物,的同时加入一个特异性的,荧光探针,，,探针,完整时，报告,基团,发射的荧光信号被淬灭,基团,吸收；,PCR,扩增,时，,Taq,酶,的,5,3,外切酶,活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条,DNA,链，就有一个,荧光分子,形成，实现了荧光信号的累积与,PCR,产物形成完全同步。常用的荧光基团是,FAM,，,TET,，,VIC,，,HEX,。而新型,TaqMan,-MGB,探针使该技术既可进行基因,定量分析,，又可分析,基因突变,（,SNP,），有望成为,基因诊断,和,个体化用药,分析的首选,技术平台,。,相当于,60,元,/ml,T,公司,mix,，扩,PPARa,定量,纳米,taq,配制的,mix,，扩,PPARa,定量,32,个循环,95 5 min,；,95 5 s,，,58 10 s,，,72 10s,；,72 25s,；,25 1s,。,（可以,3min,，但为了结果稳定性，最好,5min,。）,