第四章细菌的遗传与变异.pptx

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第四章细菌的遗传与变异,第一页，共45页。,遗传性变异与非遗传性变异的比较：,遗传性变异,非遗传性变异,基因改变,+,-,遗传,+,-,可逆性,-,+,外界环境,-,+,变异幅度,个别细胞,群体,第二页，共45页。,细菌的变异现象,形态与结构的变异,L,型变异,荚膜变异,芽胞变异,鞭毛变异,毒力变异,耐药性变异,菌落变异,第三页，共45页。,L,型变异,青霉素、溶菌酶正常形态细菌,L,型变异,抗体或补体,等,(,部分或完全,失去细胞壁,),第四页，共45页。,L,型变异,L,型细菌（,L formed bacteria,）的特征：,可通过细菌滤器,革兰染色多为阴性,常呈现高度多形态改变,可生长性,在含血清的高渗低琼脂培养基中能缓慢生长，形成中央厚而四周薄的“油煎蛋”样小菌落、颗粒型菌落或丝状型菌落等,可致病性,与某些慢性和反复感染有关，易耐药、易误诊、漏诊或久治不愈,第五页，共45页。,毒力变异,增强,棒状噬菌体,白喉棒状杆菌 溶原性白喉棒状杆菌,（不产白喉毒素）（产白喉毒素）,减弱,胆汁、甘油、马铃薯培养基,牛分枝杆菌 卡介苗,13,年,(230,代,),第六页，共45页。,概念：细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变异,常见细菌：金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等,有些细菌还同时耐受多种抗菌药物，即多重耐药性，甚至产生药物依赖性。,含链霉素培基痢疾杆菌 依链株,长期培养,耐药性变异,第七页，共45页。,细菌遗传变异的物质基础,细菌染色体,质粒,噬菌体,转座因子,第八页，共45页。,遗传物质,DNA,的结构,第九页，共45页。,遗传物质,DNA,的复制,（半保留复制）,第十页，共45页。,真核生物的染色体,原核生物的染色体,染色体的形态,第十一页，共45页。,细菌染色体,细菌属于原核细胞型微生物,细菌染色体是环状双螺旋,DNA,，不含组蛋白,无核膜包围。,基因,是具有一定生物学功能的核苷酸序列，如编码结构蛋白、酶等功能,。细菌基因的结构是连续的,无内含子。,细菌染色体,DNA,的复制：大肠埃希菌已证明是双向复制,第十二页，共45页。,质粒（,plasmid）,质粒是细菌染色体外的遗传物质，是环状闭合的双链,DNA。,大质粒,小质粒,几种重要的质粒,致育质粒（,F,质粒）,耐药质粒,毒力质粒（,Vi,质粒）,细菌素质粒,代谢质粒,第十三页，共45页。,致育质粒（,F,质粒）,与有性生殖有关,带有F质粒的为雄性菌，能长出性菌毛；,无F质粒的为雌性菌，无性菌毛,第十四页，共45页。,耐药性质粒,编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性。,可通过细菌间接合进行传递的称接合性耐药质粒，又称,R,质粒,不能通过接合传递的非接合性耐药质粒，但可通过噬菌体传递。,第十五页，共45页。,毒力质粒（,Vi,质粒）,编码与该菌致病性有关的毒力因子。,如致病性的大肠埃希菌产生的耐热性肠毒素是由,ST,质粒编码的。,细菌粘附定植在肠粘膜表面是由,K,质粒决定的。,第十六页，共45页。,细菌素质粒,编码各种细菌产生的细菌素。,Col,质粒编码大肠埃希菌产生大肠菌素,第十七页，共45页。,代谢质粒,编码产生相关的代谢酶。,沙门菌发酵乳糖的能力通常是由质粒决定的,第十八页，共45页。,质粒的特征,自我复制能力，为复制子，单拷贝或多拷贝,紧密型质粒和松弛型质粒,编码产物赋予细菌某些性状特征,可自行丢失与消除,有转移性,可分为相容性和不相容性,第十九页，共45页。,因此当Tn插入某一基因时，一方面可引起插入基因失活产生基因突变，另一方面可因带入耐药性基因而使细菌获得耐药性。,原生质体融合是一种人工基因转移系统，本质上与基因转移无关或关系很小。,转化因子吸附在受体菌表面受体上，然后再被摄入,当它感染受体菌时，则将供体菌DNA转移给受体菌。,胆汁、甘油、马铃薯培养基牛分枝杆菌 卡介苗 13年(230代),受体菌获得供体菌DNA特定部位的遗传特性,编码与该菌致病性有关的毒力因子。,可分为相容性和不相容性,转导是以转导噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。,插入序列（insertion sequence,IS）：,第二十三页，共45页。,细菌基因的结构是连续的,无内含子。,普遍性转导与局限性转导的区别,第三十三页，共45页。,转导（transduction）,细菌遗传变异的实际意义,转位因子,是存在于细菌染色体或质粒DNA分子上的一段特异性核苷酸序列片段，它能在DNA分子中移动，不断改变它们在基因组的位置，能从一个基因组转移到另一个基因组中。,第二十页，共45页。,转位因子,插入序列（,insertion sequence,IS,）：,是最小的转位因子，长度不超过,2,kb,，不携带任何已知与插入功能无关的基因区域，往往是插入后与插入点附近的序列共同起作用，可能是原细胞正常代谢的调节开关之一。,第二十一页，共45页。,转位因子,转座子（,transposon,Tn,）：,长度一般超过,2,kb,，除携带与转位有关的基因外，还携带耐药性基因、抗金属基因、毒素基因及其他结构基因等。因此当,Tn,插入某一基因时，一方面可引起插入基因失活产生基因突变，另一方面可因带入耐药性基因而使细菌获得耐药性。转座子可能与细菌的多重耐药性有关。,第二十二页，共45页。,常见转座子,转座子,携带耐药或毒素基因,Tn1 Tn2 Tn3,AP,（氨苄青霉素）,Tn4,AP,、,SM,（链霉素）、,Su,（磺胺）,Tn5,Km,（卡那霉素）,Tn6,Km,Tn7,TMP,（甲氧苄氨嘧啶）、,SM,Tn9,Cm,（氯霉素）,Tn10,Tc,（四环素）,tn551,Em,（红霉素）,Tn971,Em,Tn1681,大肠埃希菌（肠毒素基因）,第二十三页，共45页。,噬菌体,转座噬菌体或前噬菌体：,是一些具有转座功能的溶原性噬菌体，当整合到细菌染色体上，能改变溶原性细菌的某些生物学性状，如白喉棒状杆菌、肉毒梭菌等的外毒素就是由转座噬菌体的有关基因所编码的。另外，转座噬菌体从细菌染色体分离脱落时，可能连带有细菌的,DNA,片段，故它还可能在遗传物质转移过程中起载体作用。,第二十四页，共45页。,基因的转移和重组,基因转移：,外源性的遗传物质由供体菌转入某受体菌细胞的过程称为基因转移（,gene transfer,）。,重组：,转移的基因与受体菌,DNA,整合在一起称为重组 （,recombination,），使受体菌获得供体菌的某些性状。,细菌的基因转移和重组可通过转化、接合、转导、溶原性转换和细胞融合等方式进行。,第二十五页，共45页。,转化（,transformation,）,转化是供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得新的性状。,转化现象在肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌等中被证实。,第二十六页，共45页。,转化试验,第二十七页，共45页。,转 化,转化因子（,transforming principle,）：转化的,DNA,片段，分子量小于10,7,，最多不超过10-20个基因,转化因子吸附在受体菌表面受体上，然后再被摄入,解链，一链进入受体菌，另一链为进入提供能量,进入的单股,DNA,与受体菌,DNA,进行重组,受体菌,DNA,复制，子代菌一个与原型菌的,DNA,序列链相同仍保持原来的性状，另一个比原型菌多一段外来的,DNA,序列而获得新的性状称为转化菌的突变株,第二十八页，共45页。,接合（,conjugation,）,接合是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受体菌。,接合性质粒：能通过接合方式转移的质粒称为接合性质粒，F质粒、R质粒、Col质粒和毒力质粒。,第二十九页，共45页。,接 合,F,质粒的接合,F,+,F,高频重组菌（,high frequency recombination,Hfr,）,F,F,+,、,Hfr,、,F,都为雄菌,第三十页，共45页。,接 合,R,质粒的接合,R,质粒与耐药性有关，尤其与多重耐药性有关,耐药传递因子（,resistance transfer factor,RTF,）,与,F,质粒相似，编码性菌毛的产生和通过接合转移,耐药（,r,）决定子,r-dir,能编码对抗菌药物的耐药性，可由几个转座子连接相邻排列，如,Tn,9,带有氯霉素耐药基因，,Tn,4,带有氨苄青霉素、磺胺、链霉素的耐药基因，,Tn,5,带有卡那霉素的耐药基因。,第三十一页，共45页。,接 合,R,质粒决定耐药的机制：,使细菌产生灭活抗生素的酶类,R,质粒控制细菌改变药物作用的靶部位,R,质粒可控制细菌细胞对药物的通透性,第三十二页，共45页。,转导（,transduction,）,转导是以转导噬菌体为载体，将供体菌的一段,DNA,转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。,普遍性转导（,generalized transduction,）,局限性转导（,restricted transduction,）,第三十三页，共45页。,普遍性转导,前噬菌体从溶原菌染色体上脱离，进行增殖装配时，误将（,1/10,5,10,7,）细菌的,DNA,片段装入噬菌体的头部，成为一个转导噬菌体。当它感染受体菌时，则将供体菌,DNA,转移给受体菌。因被包装的,DNA,可以是供体菌染色体上的任何部分，故称为普遍性转导。,第三十四页，共45页。,普遍性转导,完全转导,外源性,DNA,片段与受体菌的染色体整合，并随染色体而传代，称完全转导,流产转导,外源性,DNA,片段游离在胞质中,既不能与受体菌染色体整合，也不能自身复制，称为流产转导,第三十五页，共45页。,局限性转导,前噬菌体从宿主菌染色体上脱离时发生偏差，将前噬菌体两侧的宿主染色体基因转移到受体菌，使受体菌的遗传性状发生改变的过程,所转导的只限于供体菌染色体上特定的基因,第三十六页，共45页。,普遍性转导与局限性转导的区别,区别要点,普遍性转导,局限性转导,基因转导发生的时期,裂解期,溶原期,转导的遗传物质,供体菌染色体,DNA,任何部位或质粒,噬菌体,DNA,及供体菌,DNA,的特定部位,转导的后果,完全转导或流产转导,受体菌获得供体菌,DNA,特定部位的遗传特性,转导频率,受体菌的,10,-7,转导频率较普遍转导增加,1000,倍,(10,-4,),第三十七页，共45页。,溶原性转换（,lysogenic conversion,）,溶原性转换是当噬菌体感染细菌时，宿主菌染色体中获得了噬菌体的,DNA,片段，使其成为溶原状态时而致细菌获得新的性状。,白喉棒状杆菌,第三十八页，共45页。,原生质体融合（,protopast fusion),原生质体融合是将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素等处理，失去细胞壁成为原生质体后进行彼此融合的过程。,聚乙二醇可促使二种原生质体的融合。,原生质体融合是一种人工基因转移系统，本质上与基因转移无关或关系很小。,第三十九页，共45页。,细菌遗传变异的实际意义,在疾病的诊断、治疗与预防中的应用,在测定致癌物质中的应用,在流行病学中的应用,在基因工程中的应用,第四十页，共45页。,在疾病的诊断、治疗与预防中的应用,形态、结构、染色性、生化特性、抗原性及毒力等方面的变异，使得诊断复杂化,如金黄色葡萄球菌的耐药性菌株增加，绝大由金黄色变成灰白色，血浆凝固酶阴性的葡萄球菌也成为致病菌，给诊断带来困难；伤寒沙门菌有,10%,不产生鞭毛，检查无动力，无,H,抗体，影响正确判断。,耐药菌株日益增多，因此以药敏实验为指导,减毒菌株和无毒株可制备成疫苗,第四十一页，共45页。,在测定致癌物质中的应用,凡能诱导细菌发生突变的物质都有可能是致癌物质。,Ames,实验,伤寒沙门菌（,his,-,）,（,his,+,）,第四十二页，共45页。,在流行病学中的应用,分子生物学分析方法已被用于流行病学调查,质粒指纹图（,PEP,）,对噬菌体的敏感性，对细菌素的敏感性,第四十三页，共45页。,在基因工程中的应用,基因工程是根据遗传变异中细菌可因基因转移和重组而获得新性状的原理设计的,切取目的基因,连接到载体上,转移到工程菌内，大量表达目的基因产物,目前已大量生产胰岛素、干扰素、多种生长激素、,rIL-2,等细胞因子和乙肝疫苗等生物制品,第四十四页，共45页。,复习思考题,1.,名词解释：质粒；,R,质粒；,F,质粒；噬菌体；毒性噬菌体；温和噬菌体；前噬菌体；溶原性细菌；转座子；转化；转导；接合；溶源性转换；原生质体融合。,2.,细菌变异的表现形式有哪些？举例说明。,3.,什么是质粒？与医学关系如何？医学上重要质粒有哪些？,4.,简述细菌可通过哪些方式获得新的性状,?,5.,简述耐药性质粒及其在细菌间传递耐药性的方式。,第四十五页，共45页。,