大黄中游离蒽醌的提取、分离和检识_10页.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验一,大黄中游离蒽醌的提取分离与检识,（一,）,实验原理,本实验是根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成游离羟基蒽醌，而游离羟基蒽醌不溶于水，可溶于氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂的性质，用氯仿从水解液中将游离羟基蒽醌提取出来，再利用各游离羟基蒽醌的酸性不同，采用,pH,梯度萃取法将其分离。其中大黄酚和大黄素甲醚的酸性十分近似，用,pH,梯度萃取法难以分离，可利用两者的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。,（二）实验内容-提取与分离一、提取,1.水解。,注：目的。,1.水解：将大黄中蒽醌苷水解成游离蒽醌，便于有机溶剂提取。,2.水洗至中性：便于下一步用碱性缓冲溶液萃取。（或提取后用水洗去有机溶剂中余酸。）,大黄,加20硫酸加热12,h，,水洗至中性。,水解后大黄,2.提取。,水解后大黄,置索氏提取器中（滤纸筒包扎），用连续提取装置提取，提取液体为氯仿。提取8,h,以上，致索氏提取器中提取液体近无色为止。,氯仿提取液体,注：1、氯仿用量不宜超过烧瓶的2/3并应加沸石。2、氯纸筒高度应适宜。3、进、出水连接。,3.分离大黄酸。,氯仿提取液体,加,pH,为8的缓冲溶液。萃取,碱水液,氯仿液1,沉淀,浓盐酸调,pH,至3，静置,大黄酸,抽滤,注：缓冲液为为柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，并一次加入。,3.1分液漏斗的使用：,检漏：洗净后，晾干，下口活塞涂抹凡士林，旋至透明，检漏，上口活塞包一滤纸条，放置待用。萃取时，两相溶液应充分混合，放气，振摇分液漏斗时，下口活塞柄应朝上。放出下层液体时，应用手握住活塞旋转，以免活塞滑落使溶液漏出。放出下层液体时，应打开上口活塞。,3.2抽滤瓶的使用：,开始顺序：减滤纸（大小应合适）安装分液漏斗（分液漏斗下斜口应对准抽气口）连接真空泵打开真空泵抽滤。,结束时顺序：先拔掉抽滤瓶上与真空泵连接的像皮管，再拆除装置。否则真空泵中的水回因为压力较抽滤瓶中空气的压力大而流入抽滤瓶。,4.分离大黄素（同分离大黄酸）。,氯仿液1,加,pH,为9.9的缓冲溶液。萃取,碱水液,氯仿液2,沉淀,浓盐酸调,pH,至3，静置,大黄素,抽滤,注：缓冲液为为碳酸氢钠-碳酸钠缓冲液，并一次加入。,4.分离芦荟大黄素（同分离大黄酸）。,注：萃取液为5碳酸钠-5氢氧化钠（91），可分次加入。,5.分离大黄酚和大黄素甲醚（同分离大黄酸）。,注：萃取液为3氢氧化钠，可分次加入。,二、分离,略,