生物化学 核酸生物化学.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第二章,核酸的化学,本章主要内容,核苷酸,DNARNA,核酸的性质,认识核酸在生命科学上的重要性,弄清碱基、核苷、核苷酸和核酸分子结构上的关系,掌握核酸的化学本质及,DNA,和,RNA,在组分、结构和功能上的差异,认识核酸的结构与其性质与功能之间的关系。,学习要求,1869,年,F.Miescher,首先从伤员绷带的脓细胞中分离得到称为“核素”的核酸,1944,年,O.N.Avery,通过转化实验证实,DNA,是,主要的遗传物质,1953,年,J.D.Watson,和,F.H.C.Crick,提出,DNA,双螺旋结构模型,1958,年,Crick,提出遗传信息传递的中心法则,1970,年,建立,DNA,重组技术,1980,年,后,分子生物学、分子遗传学等学科突飞猛进发展，提出并完成,HGP.,核酸化学,的发展过程,一、,概述,概念,核酸,(nucleic acid),是由,碱基（嘌呤和嘧啶）、戊糖和磷酸,组成的高分子物质，是生物体的基本组成。,种类,：,DNA,（,脱氧核糖核酸）,RNA,（,核糖核酸）,“四核苷酸假说”：核酸由四种核苷酸组成的单体构成的，缺乏结构方面的多样性,不大可能有重要的生理功能。,1944,年，,Avery,等人的肺炎双球菌转化实验证实核酸是生命遗传的基础物质。,1952,年，,Hershey,和,Chase,的,T2,噬菌体侵染实验彻底证明遗传物质是核酸，而不是蛋白质。,1928,年，英国,S,型肺炎球菌：有荚膜，菌落表面光滑,R,型肺炎球菌：没有荚膜，菌落表面粗糙,著名的肺炎球菌实验,结果说明？,结果说明：加热杀死的,S,型肺炎球菌中一定有某种特殊的生物分子或遗传物质，可以使无害的,R,型肺炎球菌转化为有害的,S,型肺炎球菌,这种生物分子或遗传物质是什么呢？,著名的肺炎球菌实验,纽约洛克非勒研究所,Avery,从加热杀死的,S,型肺炎球菌将蛋白质、核酸、多糖、脂类分离出来，分别加入到无害的,R,型肺炎球菌中，,结果发现，惟独只有核酸可以使无害的,R,型肺炎球菌转化为有害的,S,型肺炎球菌。,1944,年 结论：,DNA,是生命的遗传物质,侵染,DNA,注射,进细胞,蛋白质外壳,DNA,噬菌体,大肠杆菌,噬菌体侵染实验,分布：,DNA,：,主要在,细胞核,中，是染色体的主,要成分。此外在,线粒体、叶绿体,.,RNA,：,主要在,细胞质,中，此外在线粒体、细胞核,核仁；,二、,核酸的组成成分,核酸,是一种线形多聚核苷酸,(polynucleotide),其基本结构单位是,核苷酸,(,nucleotide),。,戊糖,碱基,磷酸,核苷,核苷酸,核酸,核苷酸的基本结构,（一）核酸中的戊糖,D-,核糖,（,D-ribose,）,D-,脱氧核糖,（,D-,deoxyribose,）,核酸据此分类：,脱氧核糖,DNA,；,核糖,RNA,；,核酸中的戊糖均为,-D-,型,核苷酸,从两类核酸的水解产物可看到它们组成的差别,?,（二）碱基,尿嘧啶,胸腺嘧啶,胞嘧啶,核酸中的碱基分两类：,1,、嘧啶碱,(,pyrimidine,),：,是嘧啶的衍生物。,N,N,H,H,H,H,嘧啶,1,2,3,4,5,6,N,N,H,H,H,H,NH,2,O,H,胞嘧啶,Cytosine,（,C,）,N,N,H,H,H,H,O,O,H,H,尿嘧啶,uracil,（,U,）,N,N,H,H,H,H,O,O,H,H,CH,3,胸腺嘧啶,thymine,（,T,）,2,、,嘌呤碱,(,purine,),：,由嘌呤衍生而来。,N,N,N,N,H,H,H,H,N,N,N,N,H,H,H,H,1,2,3,4,5,6,7,8,9,嘌呤,NH,2,腺嘌呤,adenine,（,A,）,N,N,N,N,H,H,H,H,O,H,2,N,鸟嘌呤,guanine,（,G,）,3,、稀有碱基,：,一些修饰碱基，因含量甚少而称之。,大多为,甲基化碱基,，多在,tRNA,中。,（三）核苷：,(nucleoside),核苷：,戊糖与碱基缩合而成，并以糖苷键相连接。,糖苷键,：,二者的连接是,C-N,键，称,N-,糖苷键,。,O,HOH,2,C,OH,OH,OH,1,2,3,4,5,核 糖,N,N,N,N,H,H,H,H,9,腺嘌呤,腺 苷,O,HOH,2,C,OH,OH,OH,1,2,3,4,5,核 糖,O,HOH,2,C,OH,OH,1,2,3,4,5,核 糖,N,N,O,O,H,H,H,尿嘧啶,H,1,尿苷,N,C,O,O,NH,H,H,5,1,OH,假尿苷（,）,核苷的表示,：,核苷：,A,、,G,、,C,、,U,脱氧核苷：,dA,dG,dC,dT,修饰核苷：,如,5-,甲基脱氧胞嘧啶：,m,5,dC,。,脱氧核糖核酸和核糖核酸异同的对比,RNA,DNA,组成,戊糖,核糖,脱氧核糖,碱基,A,G,C,A,G,C,U,T,磷酸,Pi(,磷酸二酯键,),Pi(,磷酸二酯键,),结构,单链，部分碱基互补，局部双螺旋，三叶草形等,双链，碱基互补，双螺旋形,分布,细胞核,(,核仁,),，,细胞质,(,线粒体、核蛋白体、胞液,),细胞核,(,染色质,),细胞质,(,线粒体,),生物功能,遗传信息表达，反转录，直接参与蛋白质的生物合成,遗传的物质基础，负责遗传信息贮存，发布，转录,（四）核苷酸,(nucleotide,，,nt,),1,、种类：,1,）按酯化位点：,可在核糖的,2-,3-,5-,；,2,）按核糖类型：,核苷酸、,脱氧核苷酸,核苷中戊糖的羟基被磷酸酯化，即为核苷酸。,2,、结构：,3,、表示：,与一个磷酸结合,MP,：,(d)AMP,、,(d)GMP,、,(d)CMP,、,(d)TMP,、,UMP,与二个磷酸结合,DP,：,如：,ADP,与三个磷酸结合,TP,：,如：,ATP,核苷酸,4,、特殊核苷酸,：,环核苷酸：,核糖,3-,5-,成环。,cAMP,、,cGMP,功能：,第二信使，激素、一些药物、神经递质通过其发挥生理作用。,核苷酸,核苷酸衍生物,环化磷酸化,cAMP,cGMP,核苷酸衍生物,5,-IMP,5,-,肌苷酸,(5,-,次黄嘌呤核苷酸,),5,-GMP,（五）核苷酸的连接方式,1,、,3-,5,磷酸二酯键,将核苷酸连接成核酸大分子。,一、核苷酸,2,、核酸的一级结构：,多核苷酸链中各核苷酸残基的排列顺序。,OH,O,-,O,OCH,2,T,O=P,O,-,3,5,OH,OH,O,-,O,OCH,2,G,O=P,O,-,3,5,OH,O,OCH,2,OH,OH,A,O=P,O,O,-,3,5,3,5,1,P,P,P,OH,A,T,G,pGpTpA,OH,pG,-T-A,pGTA,1,）一级结构表示方法如上：,2,）读向：,碱基序列,从左到右表示,5 3,，由,3-,5,磷酸二酯键连接。,若两链反向平行，则需注明每条链的走向。如：,5,A-T-G-C-C-T-G-A,3,3,T-A-C-G-G-A-C-T,5,核苷酸,三、DNA,（一）,DNA,的一级结构：,由数量庞大的,4,种脱氧核苷酸通过,3-,5,磷酸二酯键,连接成的直线形或环形多聚体。,（二）,DNA,的双螺旋二级结构,1,、双螺旋结构模型建立的依据：,1,）,chargaff,对,DNA,碱基组成的定量分析,提出,碱基配对原则：,A=T,，,GC,2,）,根据对,DNA,纤维和晶体的,x-,衍射分析。,3）电位滴定证明。,A=T,，,GC,DNA,双螺旋中的碱基对,（,base,pair,bp,),2.,双螺旋结构的特点,:(,Watson,-,Crick,模型）,1,）形成：,两条链反向平行；,DNA,一条链为另一条链互补链,右手螺旋。,DNA,2,）结构：,A,、,核糖,-,磷酸以,3-,5,磷酸二酯键连接成骨架；,碱基在内；,A=T,，,GC,B,、,大沟、小沟。,DNA,3,）尺寸：,DNA,A,、,直径：,2nm,；,B,、,碱基距离：,0.34nm,；,C,、,一周,10,个核苷酸,；,D,、,螺距：,3.4nm,。,4,）双螺旋的稳定性：,A,、,依靠碱基堆积力,B,、,氢键,C,、,离子键,3,、二级结构的构象类型：,DNA,B-DNA,A-DNA,Z-DNA,B-DNA,与,A-DNA,几种,DNA,钠盐的特点：,B-DNA,：,生理状态下多为此种；,92%,相对湿度,A-DNA,：,右手螺旋；,75%,相对湿度；生理状态,下多,见,dsRNA,、,DNA-RNA,Z-DNA,：,人工合成、,左手螺旋,；嘧啶、嘌呤交,替；有,m,5,dC,；,与基因表达调控有关；,此外，还发现有,C,、,D,、,E,等型。,(,三）,DNA,的三级结构,DNA,双螺旋进一步扭曲即成,三级结构。,天然,DNA,有,双链,DNA,（,dsDNA,），,有的病毒为,单链,DNA,（,ssDNA,）,在,dsDNA,中：,线形分子,（大多数）,环状分子,（,dcDNA,）：,质粒、,DNA,1,、超螺旋结构,特点,：,可将长链压缩,在一较小体内；,密度大；,凝胶电泳中移,动速度快。,DNA,回文结构中的单链可形成发夹结构,特殊,DNA,的结构,上页,下页,章首,节首,双链回文结构可形成十字架结构,特殊,DNA,的结构,上页,下页,章首,节首,DNA,的其他结构,DNA,三股螺旋概念是在,1957,年提出来的，当时有人发现，人工合成的一条右手螺旋多聚物,(,A)n,与另两条右手螺旋多聚物,(,T)n,形成三股螺旋结构，这是分子间的三股螺旋。此后有人研究证明，聚,dA,链首先与一条聚,dT,链互补形成双螺旋，然后，在高盐条件下，另一条,dT,链再同双螺旋形成三股螺旋结构。双螺旋结构通过,Watson-Crick,氢键稳定而三股螺旋是通过,Hoogsteen,氢键稳定。,DNA,的三股螺旋结构,2,、核小体中的 扭曲方式,在真核细胞染色质中，,DNA,双螺旋分子盘绕,在组蛋白上形成,核小体。,许多核小体由,DNA,连成念珠状结构，再盘,绕压缩成高层次的结构,染色体,。,DNA,真核生物：,DNA,和蛋白质组装成染色体，染色体的基本单位是核小体。,核小体进一步旋转折叠形成棒状染色体，将近,1 m,长的,DNA,分子容纳于直径只有数微米的细胞核中。,1,、,DNA,是遗传信息的载体,半保留复制,保证了亲代,性状传到子,代，保证了,亲代与子代,的相似性。,DNA,（四）,DNA,的功能,2,、,DNA,是变异的物质基础,变异是生物进化的基础。变异的发生：,1,）,DNA,复制时出错；,2,）理化因素等引起碱基变化或缺失，使,DNA,碱基序列改变，从而发生性状变异。,DNA,四、RNA,（,一）,RNA,的结构,组成,：,4,种核苷酸，有稀有碱基；,连接,：,同,DNA,形成,：一般以,DNA,为模板合成，有例外。,结构,：单链线形分子，局部区域有双螺旋。,（二,）,RNA,的类型,三种：,信使,RNA,（,messenger,RNA,mRNA,),核糖体,RNA,(,ribosomel,RNA,rRNA,),转运,RNA,(transfer,RNA,tRNA,),RNA,三种,RNA,的功能,mRNA,是遗传信息的携带者。在细胞核中转录,DNA,上的遗传信息，再进入细胞质，蛋白质合成的模板。,tRNA,起识别密码子和携带相应氨基酸的作用。,rRNA,和蛋白质共同组成的复合体就是核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。,1,、,tRNA,约占全部,RNA,的,15%,；由,70-90,个核,苷酸组成许多种类；,沉降系数,4S,。,RNA,1,）,tRNA,结构：,一级结构,多已清楚，,含较多稀有碱基；,二级结构,为三叶草,有：,aa,臂、,二氢嘧啶环、,反密码环、,可变环、,T,环,RNA,主要特征,：,1.,四臂四环；,2.,氨基酸臂,3,端有,CCA,OH,的共有结构；,3.D,环上有二氢尿嘧啶（,D,）；,4.,反密码环上的反密码子与,mRNA,相互作用；,5.,可变环上的核苷酸数目可以变动；,6.T,C,环含有,T,和,；,7.,含有修饰碱基和不变核苷酸。,tRNA,三级结构,为倒,L,型,A,、在,pr,合成中转运,aa,；,B,、在,pr,合成的起始,、,DNA,反转录合成及其它代谢调节中起作用。,2,）,tRNA,功能：,2,、,mRNA,和,hnRNA,1,）,合成,：,以,DNA,为模板,(,核内,),合成,hnRNA,（,含内含子和外显子）,加工,成熟,的,mRNA,入细胞质,蛋白质合成,RNA,合成,mRNA,切除内含子,2)mRNA,结构特点：,3,末端有,polyA,结构,：,与,mRNA,从核入质有关。,5,末端有帽子结构,：,G,被甲基化，此可能与,pro,合成的起始有关。,3),功能：,是蛋白质合成的模板,3,、,rRNA,1),占,RNA,总量的,80%,，,是构成核糖体的骨架。,2),核糖体功能：,pr,合成的部位,.,3,）结构,：,分大、小亚基,一、二级结构多已确定，但功能不清。,RNA,原核细胞：,70S,核糖体；,真核细胞：,80S,核糖体；,核糖体,RNA,自我剪切,1983,年在四,膜虫中发现,RNA,有催化功能,4,、,RNA,的功能,1,）在,DNA,复制、转录、翻译中起重要调控,作用；,2,）有催化作用；,3,）可作为遗传物质（如逆转录病毒）。,RNA,五、核酸的性质,（一）,一般的理化性质,为两性电解质，通常表现为酸性。,DNA,为白色纤维状固体，,RNA,为白色粉末，微溶于水，不溶于一般的有机溶剂。,DNA,溶液的粘度极高，而,RNA,溶液要小得多。,核酸在离心力的作用下，可以从溶液中沉降下来，其沉降速度与核酸的大小和密度有关。,核酸的溶解性质,DNA,和,RNA,都微溶于水，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂。,DNP,溶于高浓度盐溶液中，而,RNP,溶于低浓度盐溶液。，利用这一性质可分离,DNA,和,RNA,。,0.14,摩尔法,:,分离,DNA,蛋白,(DNP),和,RNA(RNP),蛋白,(RNP),的方法,DNA,蛋白,:,在,0.14mol/L,的,NaCl,溶液中溶解度最低,.,RNA,蛋白,:,在,0.14mol/L,的,NaCl,溶液中溶解度较大,.,水解性：,可被酸、碱或酶水解，,DNA,比,RNA,对稀碱稳定。,核酸分子中的磷酸二酯键可在酸、碱性和,酶,条件下水解切断,结果是多核苷酸链被打断,核酸被降解,.,酸解,酸可以使,DNA,和,RNA,降解，酸对核酸的作用因酸的浓度、温度和作用时间的不同而不同。,碱解,DNA,和,RNA,对碱的耐受程度有很大差别。,例如，在,0.1 mol/L NaOH,溶液中，,RNA,几乎可以完全水解，生成,2-,或,3-,磷酸核苷；,DNA,在同样条件下则不受影响。,这种水解性能上的差别，与,RNA,核糖基上,2-OH,的参与作用有很大的关系。在,RNA,水解时，,2-OH,首先进攻磷酸基，在断开磷酯键的同时形成环状磷酸二酯，再在碱的作用形成水解产物。,DNA,在稀碱的作用下，只会发生变性，不会发生磷酸二酯键的水解。,酶水解,1,、根据底物分类,DNase,、,RNase,；,单链核酸酶、双链核酸酶、杂合双链核酸酶,2,、根据催化部位分类：外切核酸酶和内切核酸酶,外切酶：,5,端,3,端或,3,端,5,端核酸外切酶。,内切酶：限制性核酸内切酶和非限制性核酸内切酶。,限制性核酸内切酶,(restriction endonucleases),：能够识别,DNA,分子的特定核苷酸序列，并在识别位点或其周围断开,DNA,双链的一类核酸酶,DNA,限制性内切酶,细菌的限制,-,修饰系统：限制性核酸内切酶（限制酶）特异性强,，可在,DNA,特异位点切开；,细菌碱基修饰,：,概念,：,在,DNA,特定短碱基序列上产生某专一性修饰，使得内切酶无法识别而不能断裂。,如：修饰甲基化酶。,参与,DNA,修复及,RNA,合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程,负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸,在消化液中降解食物中的核酸以利吸收,体外重组,DNA,技术中的重要工具酶,生物体内的,核酸酶,负责细胞内外催化核酸的降解,颜色反应：,1,）,核糖,与浓盐酸和苔黑酚,(,甲基间苯二酚,),共热呈 绿色，在,670nm,处可测,RNA,；,2,）,2-,脱氧核糖,与酸和二苯胺共热呈蓝紫色，,在,595nm,处可测,DNA,。,二种反应可作,定性,试验，定量试验灵敏度低、准确性差，但快、简便。,核酸的性质,1,、一个单链,DNA,和一个单链,RNA,分子量相同，试述可以用几种方法将它们区分开？,2.,转食品基因安全吗？,转基因有两派,反对派：反对派的道理在于转基因抗病抗虫的功能来自于毒蛋白基因，虫吃了是要死的，人吃了怎么办？,赞成派：昆虫的死亡是因为气孔闭塞了，但这跟人的消化道完全是两码事。”,中间派：,人民不是小白鼠,（二）紫外吸收性质,碱基具共轭双键强烈吸收,260-290nm,波段,紫外光，最大吸收峰在,260nm,附近。,应用：,1,、不同核苷酸有不同吸收特性，可用,紫外分光光度计进行定性、定量测定。,1,OD,相当于：,50g/ml DNA,40g/ml,RNA,核酸的性质,2,、确定所提取的核酸是否纯品。,1,）,DNA,：,OD,260,/OD,280,1.8,纯品,2,）,RNA,：,OD,260,/OD,280,2.0,纯品,在纯化,DNA,时,通常用,A,260,/A,280,=1.8-2.0,作为纯度标准,若大于此值,表示有,RNA,污染,;,若小于此值,则有,pro,或酚污染,.,核酸的性质,（三）核酸结构的稳定性,1,、,碱基堆积力：,双螺旋内部碱基形成的疏水区；,2,、,碱基间的氢键：,3,、磷酸基与介质中阳离子形成的离子键,核酸的性质,（四）核酸的变性,1,、,变性的概念,1,）,现象,：双螺旋,DNA,和具双螺旋区的,RNA,氢键,断裂，空间结构被破坏，形成单链无规,则线团状的过程。,核酸的性质,2,）,结果,：,A,、,增色效应：,260nm,紫外吸收增加；,B,、,粘度下降；,C,、,生物学性能部分或全部丧失,。,3,）,引起变性的因素,：,温度,、,pH,、,尿素、甲醛等。,核酸的性质,增色效应,DNA,变性后，由于双螺旋解体，藏于螺旋内部的碱基暴露出来,，使,DNA,的,A,260,值,升高，这种现象称为增色效应,。,变性,DNA,天然,DNA,2,、,热变性,与,T,m,T,m,：,在热变性中，紫外吸收增加量达最大增量一半的温度，称,该,DNA,的熔解温度,（,melting,temperature,Tm);,又称,热解链温度。,(G+C)%=(,T,m,-69.3)*2.44,核酸的性质,3,、影响,T,m,的因素：,1,）,G-C,含量,：,T,m,与,G-C,含量成正比。,2,）介质中的离子强度：,离子强度低，,T,m,低，在纯水中,DNA,在,室温下即可变性,。,3,）溶液的,pH.,4),变性剂,核酸的性质,（,五）核酸的复性,概念：,变性,DNA,在适当条件下,（缓慢降温），,可,使两条彼此分开的链,重新缔合,成双螺旋结,构的过程。,复性后，许多物化性质可得到恢复，,生物学活性部分恢复。,影响因素：,温度,、,DNA,片段大小、,DNA,浓度、碱基 重复序列多少、离子浓度。,核酸的性质,DNA,变性与复性,减色效应,当变性的,DNA,经复性又重新形成双螺旋结构时，其溶液的,A,260,值减小，最多可减小至变性前的,A,260,值，这种现象称为减色效应。,六、分子生物学技术,（一）分子杂交与探针技术,1,、概念：,1,）,分子杂交（,hybrization,):,在退火条件下，不同来源的,DNA,互补区形成氢键，或,DNA,单链和,RNA,链的互补区形成,DNA-RNA,杂合双链的过程,。,DNA-DNA,：,DNA-RNA:,分子生物学技术,核酸的杂交,2),探针（,probe),用放射性同位素或荧光标记的,DNA,或,RNA,片段,.,确诊病人细胞中提取的,DNA,；,病毒,DNA,；,肿瘤组织提取的,DNA,。,分子生物学技术,3,）,Southern,印迹法,分子生物学技术,用于检测,DNA,方法：如图,Northern,印迹法,：,用于检测,RNA,Northern,印迹法：将电泳分离后的,RNA,吸印到纤维素膜上再进行分子杂交。,4,）聚合酶链式反应,（,polymeerase,chain reaction,PCR),聚合酶链式反应（,PCR,）,每一轮聚合酶链式反应可使目的基因片段增加一倍,30,轮循环可获得,2,30,（,1.07,10,9,),个基因片段,应用：,广泛用于克隆、测序、产生特异突变、医学诊断和法医,.,核酸分子的核苷酸序列分析是以,纯品核酸,为材料，经水解，测定核苷酸组成及比例。先以,外切酶,确定,5-,或,3-,末端核苷酸，再以,内切酶,将核酸链分为若干寡核苷酸段，分段测定核苷酸组成、比例和序列。最后将核苷酸序列的各寡核苷酸重叠，确定整个核酸分子的核苷酸序列。,(,五,),核酸,序列,分析,酶,底物,作用部位,作用产物,外切酶,磷酸二酯酶,DNA，,RNA,5,端，,5,连接处,3,核苷酸,3,端，,3,连接处,5,核苷酸,内切酶,脱氧核糖,核酸酶,I,DNA,3,连接处,3-,羟核苷酸为,3,末端寡核苷酸及剩余部分,脱氧核糖,核酸酶,II,5,连接处,3-,核苷酸为,3,末端寡核苷酸及剩余部分,核糖核酸,酶,T,1,RNA,5,连接处碱基是,G,3-,鸟苷酸为,3,末端寡核苷酸及剩余部分,核糖核酸,酶,I,5,连接处碱基是,Pyr,3-,嘧啶类核苷酸为,3,末端寡核苷酸及剩余部分,核苷酸序列分析中断裂磷酸二酯键用酶,DNA,酶法测序,1977,年,sanger,发明,末端终止法测定,DNA,序列。,根据,sanger,测序法，现在已经有各种,DNA,自动测序仪，,DNA,测序速度大大加快,HGP,得以提前完成,DNA,酶法测序,DNA,酶法测序,平行进行四组反应，每组反应均使用,相同的模板,，,相同的引物,以及,四种脱氧核苷酸,；并在四组反应中各加入适量的,四种之一的双脱氧核苷酸,，使其随机地接入,DNA,链中，使链合成终止，产生相应的四组具有特定长度的、不同长短的,DNA,链。这四组,DNA,链再经过聚丙烯酸胺凝胶电泳按链的长短分离开，经过放射自显影显示区带，就可以直接读出被测,DNA,的核苷酸序列,如下图所示：,DNA,酶法测序,DNA,酶法测序,本章总结,核苷,：,核苷酸,：,cAMP,：,磷酸二脂键：脱氧核糖核酸,（,DNA,）：,核糖核酸,（,RNA,）：,核糖体核糖核酸,（,rRNA,）：,信使核糖核酸,(,mRNA,),：,转移核糖核酸（,tRNA,）：,碱基对,：,查盖夫定律,（,Chargaff,s rules,）：,大沟和小沟,：,DNA,超螺旋,：,DNA,变性,：,退火,：,熔解温度（,Tm,）：,增色效应,：,减色效应,.,核酸的化学结构：,碱基、核苷、核苷酸。,DNA,的结构：,DNA,的一级结构、二级结构，,RNA,的结构：,RNA,的类型和结构特点，,tRNA,、,mRNA,、,rRNA,的,结构和功能。,核酸的性质：,解离性质、水解性质、光吸收性质、沉降特性，变性、复性及杂交。,核酸一级结构的测定、,研究技术,、核酸的,分离纯化,.,重点,中、英文专业词汇：,nucleic acid,核酸；,purine,嘌呤；,deoxyribonucleic acid(DNA),脱氧核糖核酸；,pyrimidine,嘧啶；,ribonucleic acid(RNA),核糖核酸；,adenine(A),腺嘌呤；,base,碱基；,guanine(G),鸟嘌呤；,nudeotide,核苷酸；,cytosine(C),胞嘧啶；,nucleoside,核苷；,uracil(U),尿嘧啶；,thymine(T),胸腺嘧啶；,base pair,碱基对；,phosphodiester linkage,磷酸二酯键；,nucleosome,核小体；,ribosome,核糖体；,hybridization,杂交；,genetic code,遗传密码；,double helix,双螺旋；,supercoil,超螺旋；,probe,探针；,ribosomal RNA(rRNA),核糖体,RNA,；,transfer RNA(tRNA),转运,RNA,；,messenger RNA(mRNA),信使,RNA,1,DNA,的,Tm,值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致：,A,G+A,B,C+G,C,A+T,D,C+T,E,A+C,2,绝大多数真核生物,mRNA5,端有,A,PolyA,B,终止密码,C,帽子结构,D,启动子,E,S-D,序列,3,hnRNA,是下列哪种,RNA,的前体？,A,tRNA,B,rRNA,C,mRNA,D,snRNA,E,snoRNA,4,核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近,A,280nm,B,260nm,C,200nm,D,340nm,E,220nm,5,下列哪种碱基只存在于,RNA,而不存在于,DNA,：,A,尿嘧啶,B,腺嘌呤,C,胞嘧啶,D,鸟嘌呤,E,胸腺嘧啶,6,DNA,变性是指：,A,分子中磷酸二酯键断裂,B,多核苷酸链解聚,C,DNA,分子由超螺旋双螺旋,D,互补碱基之间氢键断裂,E,DNA,分子中碱基丢失,作业,1,、比较,DNA,、,RNA,在化学组成、分子结构和生理功能上的特点。,2,、,DNA,双螺旋结构的特点？,