产前诊断.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,产前诊断,汇报人：徐佳慧,主要内容,一产前诊断的目的,二产前诊断的概念简介,三产前诊断的适用情况,四产前诊断,的分类,五产前诊断技术与方法,六产前诊断的伦理问题,七产前诊断的现状,产前诊断的目的,出生缺陷,临床上尚缺乏针对这些出生缺陷的有效治疗措施,至少,20%,的缺陷儿,自然流产,20%,出生后很快死亡,存活下来的人群中,2%,左右会发生,重要缺陷,给家庭和社会带来巨大的精神和经济压力,影响了全民素,质的提高。,遗传因素,发生原因,环境因素,两者共同作用,遗传咨询,目前可以通过 产前诊断,选择性终止妊娠,等方法,减少缺陷儿出生率,。,产前诊断,产前诊断又称,宫内诊断,或,出生前诊断,是指在胎儿出,生前用各种方法诊断胎儿是,否患有某种,遗传病,或先天性,疾病的一种手段,是人类细,胞遗传学、分子遗传学、生,物化学和临床医学实践紧密,结合的一门学科。,产前诊断的适用范围,1,孕妇年龄,大于,35,岁,(,或丈夫年龄,大于,39,岁,),。这是因为卵细,老化,，染色体容易发生,突变,，产生胎儿先天性畸形或先天愚型儿,的危险性较大。,2,孕妇怀孕早期或中期血清,筛查,阳性,。,染色体病,患儿,3.,孕妇,生育过,先天畸形的,患儿,智力低下,患儿,代谢性疾病,患儿,筛查与诊断,胎儿健康状况的检查分为 筛查 两类。,诊断,筛查,：是针对胎儿是否有发生某种遗传病 高风险进行的；筛查的,方法简单,结果,快速,成本低廉,可分析大批量标本,但其,敏感性和特异性均较差,。,不能,作为对所疑问的疾病作,最后,诊断的,依据,。筛查的结果分为,阳性,和,阴性,阳性只能说明病人有,可能,患病,而阴性结果也,不能彻底排除,患病的可能性。,筛查与诊断,诊断,：诊断性检测必须建立在先症者确诊基础上,是有,目的性,的。,敏感性和特异性较高,结果准确,可靠,但,成本高,时间长,。对筛查结果,阳性,者应提供诊断性的检查,以达到对所疑问的疾病进行最终诊断的目的。产前诊断中应遵从：,筛查在先,诊断在后,的原则。,产前诊断的适用范围,4,有,不良生育史,(,包括多次流产史、,死胎史、死产史等,),。这种情况有可,能由夫妇一方或双方染色体异常引,起，再次怀孕时仍可出现畸胎。,5.,B,超检查,发现,异常,，如羊水过多、,羊水过少、胎儿发育异常或胎儿有可,能畸形等。,产前诊断的适用范围,6.,胎儿,怀疑,有,宫内感染,，如弓形体、,巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病,毒感染等，或者孕母怀孕早期,接触过,可能导致胎儿先天缺陷的,物质,(,如药,物、放射线等,),。,7.,夫妇,一方或双方,是,先天遗传病,患者,，即有,遗传病家族病史,。,产前诊断的主要内容,一,.,妊娠前遗传咨询,二,.,植入前遗传学诊断,三,.,妊娠期产前诊断,四,.,其他,妊娠前遗传咨询,遗传咨询是由遗传学专家、临床医学专家及实验技术专家组成的群体针对各种高危因素,应用,遗传学,和,临床医学,的基本原理和技术对本次妊娠发生出生缺陷的风险进行,评估,根据不同的适应征进行产前,诊断,并对产前诊断的结果以及可能的妊娠结局进行,解释,。,孟德尔的分离和自由组合定律,摩尔根连琐,、,交换定律,遗传病的,群体调查与临床遗传学研究,是遗传咨询的,理论基础,。,植入前遗传学诊断,植入前遗传学诊断,(PGD),指,胚胎着床前,对其,遗传物质,进行分析,诊断胚胎是否有某些遗传异常,确定该胚胎,是否适合移植,的诊断方法。主要是指在,显微操作,下从,体外受精,(IVF),发育至,6-8,个细胞期的胚胎中，活检,1-2,个卵裂球细胞或直接获取受精前后的极体，通过,PCR,或,FISH,，进行快速遗传学诊断，,选择正常胚胎植入宫内,，从而获得健康胎儿。,植入前遗传学诊断,IVF,过 程,妊娠期产前诊断,一,.,产前诊断的技术手段目前主要有,：,影像学,生化遗传检测,染色体核型分析,基因检测,等方法,妊娠期产前诊断,二,.,产前诊断取材途径,：,产前诊断取材方法包括两大类,侵入性,（创伤性）,非侵入性,（非创伤性）,创伤性取材方法,包括：,羊膜腔穿刺、,绒毛活检、,脐静脉穿刺、,胎儿镜和胚胎活组织检查,等,。,其中羊膜腔穿刺和绒毛取样目前最常用,妊娠期产前诊断,二,.,产前诊断取材途径,：,非创伤性取材方法,包括,植入前诊断、,孕妇外周血分离胎儿细胞、,宫颈黏液冲洗、,孕妇血清筛查、,超声诊断,等。,羊膜穿刺术,主要用于孕,中期,产前诊断，方法简便，已成为当今世界各地,最常用,且,安全可靠,的产前诊断取材方法，时间以孕,16-20,周,为宜，此期间采集的羊水细胞数量多，体外生长活力强，故,成功率高,，且穿刺对孕妇及胎儿,基本安全,，流产及感染少见。,羊膜穿刺术,绒毛活检,时间为孕,早期,的,9-11,周,，此时绒毛正处于生长旺盛时期，易于吸取及分析，因为吸取量很小，,比较安全,，流产率很低,。,为近年来发展起来的一项,新技术,，需要,技术,高度,熟练,的人员在,B,超,直视下操作，时间一般为孕,18-24,周,。,胎儿脐带血穿刺术,孕妇外周血分离胎儿细胞,属,非侵入性,（非创伤性）产前诊断技术，,易于,被孕妇,接受,。孕妇,外周血？,中存在胎儿细胞,(,滋养细胞、淋巴细胞、颗粒细胞及有核红细胞,),，通过分离、富集这些细胞可用于产前诊断，时间一般为孕,7-25,周,，以,15,周,为最佳，,有核红细胞,是用于产前诊断的,最理想,的细胞，但孕妇外周血中胎儿细胞的,数目极少,，故技术要求很高。,1.,胎儿宫内感染,2.,染色体病,3.,先天畸形,4.,遗传性代谢疾病,5.,单基因疾病,6.,其他,产前诊断的疾病分类,胎儿宫内感染,微生物感染,是造成先天畸形胎儿和新生儿发病及死亡的主要原因,可造成先天畸形的主要微生物包括,巨细胞病毒,、,弓形体,、,单纯疱疹病毒,、,风疹病毒,、,梅毒,、,乙型肝炎病毒,、,艾滋病病毒,等。,1971,年,Nahmias,首次提出将弓形虫、风疹、巨细胞和单纯疱疹病毒,-,-,TORCH,的血清学检查,作为产前宫内感染实验室筛查手段,广泛用于产前,筛查,。,TORCH,实验,TORCH,实验主要用于血清学分析,包括,IgM,IgG,IgA,抗体等的检测。由于,初次感染,时患者对某种病原微生物产生特异的,IgM,抗体,在,暴露,1,周后,可检测到,检测时间段在,30 90,天内,。由于,IgM,抗体不能通过胎盘,那么一旦在胎儿或新生儿血液中检测到,IgM,则说明胎儿或新生儿已被感染,并且开始免疫应答。,TORCH,实验,TORCH,实验,染色体病,染色体病是由于,染色体异常,所引致的一大类遗传性疾病,患者常有智力低下和头面部畸形等表现。如,唐氏综合征,、,13,三体综合征,、,18,三体综合征,、,Turner,综合征,等。早期流产病例中有约,50%,是由于染色体异常所引发。目前主要通过对母血中,人绒毛膜促性腺激素,(HCG),、,甲胎蛋白,(AFP),、,游离雌三醇,(uE3),和,妊娠相关血浆蛋白,A(PAPPA),等生化指标的检测对胎儿染色体病进行,筛查,而其,诊断,方法仍以,细胞遗传学,的经典方法,-,染色体核型分析,为主。通过对胎儿细胞的核型分析,可以诊断出几乎,100%,的数目性染色体异常和大部分明显的结构性染色体异常,。,染色体核型分析,染色体核型分析是根据染色体的,长度,、,着丝点位置,、,臂比,、,随体的有无,等特征，并借助染色体分带技术对某一生物的染色体进行分析、比较、排序和编号。是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、形态与功能之间关系所不可缺少的重要手段。经行核型分析后，可以,根据染色体结构和数目的变异,来判断生物的病因。,唐氏综合症的核型分析,先天畸形,先天畸形是指致,畸原,引起的胎儿出生前或出生时明显表现出的组织结构或解剖学异常。据中国出生缺陷检测中心统计,我国,2002,年出生婴儿中先天畸形发生率前六位依次为,总唇裂,、,多指趾,、,先天性心脏病,、,神经管缺陷,、,先天性脑积水,和,肢体短缩,。这些先天畸形儿为其自身及其家庭、社会带来了极大的精神及经济负担,因此,做好产前诊断工作以便在妊娠早期对严重畸形胎儿进行选择性流产是有必要的。,【,方法技术,】,先天畸形的检查技术,超声波,检查是产前诊断中,最常用,的影像学检查,其中,二维超声,在大部分胎儿先天畸形的产前诊断中发挥了十分重要的作用,但对一些复杂畸形或细小畸形的诊断尚显不足，而,三维超声,则利用电子计算机技术将二维图像转变为三维结构,能有效提高辩识能力,能对胎儿畸形的诊断提供更多信息。,胎儿超声心动图,则是产前宫内诊断胎儿,心脏血管异常,不可缺少的无创影像方法,随着一系列高分辨率、高帧频彩色多普勒超声心动图新技术的研制及临床应用,可以在妊娠期尽早发现和及时确诊胎儿,先天性心脏病和心律失常,。另外,多普勒组织成像技术,对诊断胎儿心律失常也有很好的帮助作用。,磁共振,的应用则为超声不能够单独诊断或分类困难的病例提供了很好的辅助手段,。,B,超,磁共振,神经管缺陷（,NTD,）,一种,严重的畸形,疾病，神经管就是胎儿的中枢神经系统。胎儿神经管畸形主要表现为,无脑儿,、,脑膨出,、,脑脊髓膜膨出,、,隐性脊柱裂,、,唇裂,及,腭裂,等。,神经管缺陷（,NTD,）,神经管缺陷（,NTD,）在产前诊断中占很大比例,约,l/3 1/2,左右。由于胎儿,NTD,时母,血清,AFP(MSAFP),以及,羊水中,AFP,、,乙酞胆碱酯酶,(AChE),活性增高,因此可通过以上,生化指标的检测,并,结合,B,超,结果将,99%,以上的开放性神经管缺陷进行早期诊断,而与,染色体畸变有关,的神经管畸形则需要作羊水细胞或绒毛细胞的,染色体分析,。,遗传性代谢性疾病,遗传性代谢性疾病主要包括,氨基酸代谢病,、,糖脂代谢异常疾病,、,溶酶体贮积症,、,核酸代谢异常疾病,、,铜铁代谢紊乱疾病,等。目前用,羊水,、,羊水细胞,、,绒毛细胞,或,血液,等进行,蛋白质,、,酶,和,代谢产物,的生化检验仍是遗传性代谢性疾病的主要诊断方法。,【,举例,】,苯丙酮尿症,(PKU),苯丙酮尿症,(PKU),PKU,是一种以,智力低下,为特征的,先天性氨基酸代谢障碍,疾病,属于常,染色体隐性,遗传性疾病。,由于,缺乏苯丙氨酸羟化酶,(PAH),而,不能生成酪氨酸,，大量苯丙氨酸脱氨后生成,苯丙酮酸,，随尿排出而患病，儿童患者可出现先天性痴呆。,用,HPLC,进行血,苯丙氨酸,(Phe),浓度,的测定是诊断经典型,PKU,的主要方法。此外,由于经典型,PKU,是缺乏,PAH,所致,因此,可以用,分子遗传学,的方法对,PAH,基因进行检测从而用于携带者诊断和产前诊断,如用,PAH,基因探针检测,DNA,多态性以及用,PAH,基因单核苷酸多态位点进行,连锁分析,等。,单基因疾病,单基因病是由某个正常基因产生了某种改变而导致基因功能改变或丧失而导致的遗传病,这些改变包括,DNA,中,一个,或,多个核苷酸的置换,(,点突变,),DNA,中核苷酸的,插入,或,缺失,而导致蛋白质的,移码,和一些三核苷酸,重复,顺序的扩展。目前主要应用于,地中海贫血,、,血友病,、,脆性,X,综合征,等。,单基因疾病,一,.,直接诊断所采用的技术,Southern,印迹技术,多重,PCR,技术,PCR-,限制性片段长度多态性（,PCR-RFLP,）,等位基因特异性寡核苷酸（,ASO,）,DNA,芯片技术（,DNA chip,）,单链构象多态性（,SSCP,）,变性梯度凝胶电泳（,DGGE,）,DNA,序列分析（,DNA sequencing,）,单基因疾病,二,.,间接诊断所采用的技术,间接诊断就是分析,DNA,的遗传标志的多态性。,（,1,）,限制性片段长度多态性,（,RFLP,）,第一代,DNA,的遗传标志，具双等位基因多态性，所含信息量有限。,检测方法：,Southern,印迹技术、,PCR-RFLP,。,单基因疾病,二,.,间接诊断所采用的技术,（,2,）,小卫星序列,串联重复可变数目（,VNTR,），以,6-70bp,为单位，可重复数次至数十次，以串联形式排列，构成数量可变的串联重复序列。等位基因常常达,10,个以上，信息量比,RFLP,大得多。,检测方法：,Southern,印迹技术、,PCR,技术。,Southern,印迹杂交,Southern,印迹杂交（,Southern blot,）是,1975,年由英国人,southern,创建，是研究,DNA,图谱的基本技术，在遗传病诊断、,DNA,图谱分析及,PCR,产物分析等方面有重要价值。,DNA,片段在琼脂糖凝胶上电泳分离,膜上固定,DNA,片段,在缓冲液中将标记的探针加到膜上,DNA,片段从琼脂糖凝胶上转印到膜上,杂交信号的检测,Southern,印迹,产前诊断的伦理问题,（,1,）不得进行非医学目的的性别鉴定；,（,2,）不建议对非致死性,以及不严重影响,生活质量和生存能力的畸形终止妊娠；,（,3,）要对患者及其家属告知检查手段的局,限性；,（,4,）采取知情同意原则：发现胎儿异常后,将继续妊娠可能出现的结局和概率、以及进,一步可选择的处理方案,以书面形式告知孕,妇或家属。孕妇或家属自行选择处理方案,二者有矛盾,应由孕妇决定,并签署知情同,意书,。,产前诊断的现状,目前产前诊断,尚未在我国完全铺开,产前诊断,技术,也存在,不恰当应用,的问题，而且诊断水,平还远远不能达到优生优育需要,仍然存在很,多需要解决的问题,如缺乏敏感、特异的早期,诊断手段,仅凭现有的,1 2,项检查往往不能全,面反映宫内胎儿发育的真实情况,准确率不高,且,分子诊断研究落后,，不能满足临床的需要,;,另外,目前多数的产前诊断需做,侵入性检查,对孕妇和胎儿有,一定的创伤和风险,。因此,寻,找更加合理的无创的取材方式并将分子生物学,、分子遗传学等方法与目前产前诊断常用的检,测方法有机结合以进一步,提高,产前诊断的,准确,率,将是今后产前诊断发展的重要方向。,Thanks,For Watching,The,End,