AFP-L3体检应用.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,甲胎蛋白异质体,（,AFP-L3,）在体检中的价值,防治肝癌，早期体检是关键,1,恶性肝病筛查的意义,AFP-L3,用于筛查的价值,目 录,2,3,1、恶性肝病筛查的意义,筛查的意义,我国乙肝、丙肝发病率呈下降趋势，但生活水平的提高脂肪性肝病的发病率大幅上升，成为继病毒性肝炎后导致肝损伤的第二大病因,，,也是导致恶性肝病发病率上升的主要原因。,我国肝病发病状况,患病人数（亿）,发展为肝硬化比率,乙型肝炎,1.2,12-20%,丙型肝炎,0.4,非酒精性脂肪性肝病,1.5,1.5-8%,酒精性脂肪性肝病,0.5,4,肝癌的发病率和死亡率,肝癌的发病率仅次于肺癌和胃癌，居第三位。其死亡率仅次于肺癌。,2012,中国肿瘤登记年报,5,慢性肝病,是导致恶性肝病的罪魁祸首,慢性肝病包括：,慢性肝炎、非酒精性脂肪性肝病、酒精性脂肪性肝病、药物性肝病、自身免疫性肝病等。,6,7,8,恶 性 肝 病 的 危 害,肝癌出现典型症状诊断不困难，但多失去治疗机会，或预后不佳,肝癌起病隐匿，多发生于中年男性，恶性度高、病情进展快，死亡率高。,超过,60%,的肝癌患者在初次就诊时已经进入中晚期，,根治性手术切除率仅在10%左右，手术后五年的复发率高达65%,肝癌术后,1,、,3,、,5,年生存率,5cm,分别为,89.9%,，,85%,，,79.8%,5cm,分别为,62.5%,，,42.6%,，,27.5%,肝癌普查,早诊早治,提高预后,恶性肝病的筛查目的,除慢性病毒性肝炎外，由其它肝病导致的肝纤维化、肝硬化早期缺乏特异性的临床表现，而往往被忽视，许多肝纤维化不治疗或治疗不彻底很快发展为肝硬化，还有部分肝纤维化同时伴有肝硬化。一旦发展为肝硬化，治愈相当困难,。,9,10,筛查常用标志物,甲胎蛋白（AFP）,AFP:一种糖蛋白。正常情况下，来自胚胎的,肝细胞,和卵黄囊，胎儿出生约,两周后甲胎蛋白从血液中消失。正常人血清中甲胎蛋白的含量尚不到,20,ug/L。,1956年发现，60年代末应用于临床，70年代用于自然人群与肝癌高危人群普查。至今被公认为优秀的肝癌诊断标记,物而广泛使用。,一般认为，AFP是HCC相对特异的肿瘤标志物，AFP持续升高是发生HCC的危险因素。,AFP临床价值：a、目前较好的早期诊断方法，可在症状出现前6个月以上作出诊断，可与影像相互补充。b、为反映病情动态变化和评估疗效的敏感指标。c、可检查出根治切除术后亚临床期复发与转移,11,AFP的不足,近年来有报道指出,以上述标准诊断原发性肝癌,敏感性为,39,-,64%,特异性为,76,-,91%,对早期肝癌具有,9,-,32%,阳性预测值,有近,1/3,的HCC患者,AFP,为阴性（敏感性不足），同时,20-50%,的慢性肝炎、肝硬化也合成,AFP,（特异性不足）,这给HCC的诊断带来了困难。,特异性不足,20-50%,的慢性肝炎、肝硬化也合成,AFP,2010 版美国肝病研究学会(AASLD)指南已不再将AFP作为筛查指标,但我国的HCC大多与HBV感染相关，与西方国家HCC致病因素不同（多为HCV、酒精和代谢性因素），结合国内随机研究(RCT)结果和实际情况，目前对HCC的常规监测筛查指标中继续保留AFP。,12,新标志物,基于目前用于肝癌诊断的,AFP,和影像学的不足，需要敏感性及特异性更高的新肿瘤标志物辅助肝癌诊断,研究显示，,AFP-L3,成为新标志物的一线候选。,热景生物在国内首先研发成功上述指标的诊断试剂产品并通过SFDA注册审批。,13,2,、甲胎蛋白异质体AFP-L3,14,甲胎蛋白异质体：AFP-L3,AFP是糖蛋白，其蛋白上含有不同糖链,依据不同糖链与,小扁豆凝集素LCA,亲和力，可将总AFP分为,AFP-L1,、,AFP-L2,、,AFP-L3,，其中：,AFP-L1来源于良性肝病细胞（LCA非结合型）,AFP-L2来源于孕妇（LCA弱结合型）,AFP-L3来源于癌变肝细胞（LCA强结合型）,15,如何使用这一指标？,a.分别测定样本中,总AFP浓度,及其,异质体AFP-L3,的浓度,b.计算,AFP-L3占总AFP比率,（,AFP-L3/AFP）,以下简写成,AFP-L3%，,简称,异质体比率,),c.以,10%,为Cutoff确认结果,阳性,：AFP-L3%,10%,阴性,：AFP-L3%,10%,16,美国：AFP-L3已获得FDA批准,特异性不同的各类HCC,诊断,标志物,文献,:,Recent Developments in the First Detection of Hepatocellular Carcinoma,Joseph B.Lopez,Clin Biochem Rev,Vol 26,August 2005 I 65,17,中国:AFP-L3列入肝癌诊断标准,AFP-L3,已在,1999,年,第四届全国肝癌学术会议,上获得通过，确定为原发性肝癌临床诊断标准的肝癌标记物之一。,认为是比单纯的,AFP,更为特异的原发性肝癌指标。,18,中国：AFP-L3进入原发性肝癌诊疗规范（2011版）,血清AFP 及其,异质体,是诊断肝癌的重要指标和特异性最强的肿瘤标记物，国内常用于肝癌的,普查,、,早期诊断,、术后监测和随访。,19,AFP-L3:,比,AFP,更优秀的早期预警指标,AFP-L3,随肝细胞癌变在血中升高。,研究发现,AFP-L3,升高较影像学检查阳性早出现,3,28,个月,AFP-L3,阳性预测肝癌发生的正确率为,94%,1,。,AFP-L3,升高的肝硬化病人大多数在,3,18,个月内被诊断为肝癌,2,；,另外，在影像学检查尚未发现肝癌特征性占位性病变时,对,AFP,低浓度阳性病例进行,AFP-L3,检测可以早期预警肝癌发生,3,。,1,Chin Med SciJ,1992,7(4):191-195,2,N Engl J Med,1993,328(25):1802-1806,3,Hepatology,1995,22(3):802-807.,20,AFP,400ng/ml,AFP-L3,%,10,CT,阴性,AFP,400ng/ml,AFP-L3,%,10,CT,阴性,AFP,400ng/ml,AFP-L3,%,10,CT,阳性,AFP,400ng/ml,AFP-L3,%,10,CT,阳性,研究一：半年及三年随访各1例,哈尔滨铁路中心医院,21,解放军第,302,医院,临床主诊断,AFP,阳性、,AFP-L3%,阳性,AFP,阳性、,AFP-L3%,阴性,初次诊断非肝癌,21,62,6,个月后肝癌,12,3,肝癌发生率,57.1%,4.8%,危险率增加倍数,1,2倍,该研究揭示,AFP-L3,与,AFP,值无相关性，可以作为一个独立肝细胞癌诊断因素。,AFP,-,L3,%,对于,AFP,阳性时良、恶性肝病的鉴别及肝癌的早期预警诊断具有重要意义,研究三：临床随访实例,AFP-L3,可作为独立的预测肝癌发生的指标,采用,AFP-L3,为指标则不受肝癌诊断标准,(AFP 400gPL),的限制,当,AFP-L3,超过,10%,时,表明恶性肝细胞在增多,其肝恶变的概率非常大。,AFP-L3,作为指标,则具有较高的特异性；,对血清中,AFP-L3,超过,10%,的患者进行随访和严密的监控是很有必要的。,中华实验和临床病毒学杂志，,2007,，,21,（,2,）：,135-137,22,23,AFP-L3:,鉴别良恶性肝病,国内外研究结果都一致表明,：,慢性肝病血清,AFP-L3,百分比很低,而原发性肝癌很高,表明,AFP-L3,测定非常有助于良、恶性肝病的鉴别诊断,。,应用,AFP-L3,鉴别良、恶性肝病应注意以下题,:,(,1),AFP-L3,上升与血清,AFP,值无关,只要,AFP,阳性,AFP-L3,就可能高,；,(2),大量研究表明,血清,AFP,为,20,50ng/ml,而,AFP-L3,呈阳性，从而使肝癌得到及早诊断。因此,AFP-L3,也,非常适用于,AFP,低浓度阳性良、恶性肝病的鉴别诊断,；,(3),约有,35%,45%,小肝癌,(,直径,2 cm),病人已显示,AFP-L3,显著升高。因此,AFP-L3,对肝癌早期诊断很有价值,。,24,鉴别良恶性肝病,AFP-L3,%,对,HCC,检测的特异性高达,95%,以上。,日本医师会雄志,2004,年第131卷第5期,研究一：HCC与良性肝病,25,AFP-L3%，AFP 对肝病鉴别诊断的对比 （检验科常规应用数据统计）,AFP,ROC,曲线,AFP-L3,%,ROC,曲线,数据来源：福建省福州传染病医院,研究三：综合性能对比,26,AFP-L3,是肿瘤的恶性程度指标,影像学研究发现,AFP-L3,%阳性的,HCC,通常有丰富的肝动脉血液供给，肿瘤的倍增时间较短。,联合检测,AFP,和,AFP-L3,，显著提高检出效率,两者联合使用，互相补充，其特异度及灵敏度均较高，提高了诊断的准确性,27,28,AFP-L3%的检测决定于AFP-L3的分离水平,传统异质体测定方法对于技术的要求较高、操作繁琐、试剂昂贵。主要采用亲合电泳显影技术,热景生物在科技部资金的支持下，独家研发出,捕获AFP-L3的专利技术,对比项目,凝集素亲和电泳法,热景生物产品,操作,繁琐,简单、半自动,时间,48,小时,40,分钟,回收率,-,92%,灵敏度,5ng,1ng,价格,高,低廉,实验模式,自行检测,开放，配套用,29,检 测 原 理,30,亲和层析吸附离心法分离AFP-L3,原理示意图,31,AFP-L3%和GP73已在全国范围内快速推广应用,AFP-L3%部分临床应用单位（三甲）,：解放军302医院、解放军307医院、地坛医院、佑安医院、武警总医院、上海东方肝胆医院、上海曙光医院、上海仁济医院、天津第一中心医院、山东省立医院、南京军区福州总院、盛京医院、陆军总医院、福州传染病医院。,32,肝癌早期诊断套餐,血清指标：,AFP/AFP-L3/GP73,影像学诊断,谢谢聆听,33,