微生物标本的采集及外科常见耐药菌的分析.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,微生物标本的采集及外科常见耐药菌的分析,1,微生物培养标本采集常见的问题,血培养,导管的送检,痰标本的采集,脓性分泌物的采集,尿液标本,厌氧菌培养,真菌感染的检测,2,3,血培养,采血时机：,发热、发冷初期，抗生素使用前。,T,38,或,36,套瓶采集：需氧,+,厌氧,采血量：成人,5-10ml/,瓶，小儿,3-5ml/,瓶,4,血培养采样建议,急性高烧：,10,分钟内，不同部位抽取,2,套标本,(,建议左、右手,),。,非急性高烧：,24h,内，由不同部位抽取,2-3,套标本,(,间隔不小于,3,小时,),急性心内膜炎：,1-2,小时内，同,3,个不同部位抽取,3,套标本。,亚急性心内膜炎：,24h,内，由,3,个不同部位抽取,3,套标本，每套间隔,1h,。当培养,24h,后，若为阴性，应再送,2-3,套标本。,5,不明发热：由不同部位抽取,2-3,套标本，每套间隔,1h,。当培养,72h,后，若为阴性，应再送,2-3,套标本。,小儿病患，应立即采血。,血培养采样建议,6,多部位采血的意义,增加样本量提高阳性检出率,排查污染菌,(,如凝固酶阴性葡萄球菌、,G+,杆菌等,),7,导管的送检,导管相关性菌血症的送检,8,痰标本的采集,9,脓性分泌物的采集,深部脓肿：无菌操作，用注射器抽取标本绿头管送检。,表浅标本：无菌盐水清洗表面擦干无菌棉拭用无菌盐水湿润，挤干采集深部脓性分泌物绿头管送检。,原则上，样本采集尽量不使用棉花拭子,10,尿培养标本,11,厌氧菌培养,深部抽取的液体标本,深部脓性分泌物,12,微生物培养的标本储存,培养标本应及时送检，及时处理,!,13,真菌感染的检测,传统的固体培养基培养方法非血液样本,血液的真菌感染难以检测：,培养仅限于念珠菌属、新型隐球菌、马尔尼菲青霉菌。,血培养真菌报阳时间：培养,1-3,天后。,血清学方法,(,早期诊断，早于临床症状及影像学症状,),14,念珠菌血症,2006-2008,年外科共,44,株,15,目前微生物室开展的血清学项目,G,试验,(1,，,3-D,葡聚糖检测,),深部真菌抗原检测：,曲霉菌抗原,(GM,试验,),念珠菌抗原,隐球菌抗原,16,G,试验,17,GM,试验,18,G,试验送检要求,适用的标本：,血浆,，腹水，尿，脑脊液,容器：,专用的无热原采血管,(,暂需到微生物室领取,),建议采样时间：早晨空腹，给药前。,(,主要尽可能排除食物、药物的影响,),送检时间：周一至周五上午,10,点前。节假日不收标本。,不合格标本：溶血、黄疸、脂浊,19,GM,试验的检测要求,适用的标本：,血清,，,BAL,，尿，脑脊液,容器：,黄色头采血管,建议采样时间：早晨空腹，给药前。,(,主要尽可能排除食物、药物的影响,),送检时间：周一至周五上午,10,点前。节假日不收标本。,不合格标本：溶血,20,2007-2008,年外科常见耐药菌的药物敏感性,21,革兰阴性杆菌的构成,22,主要的耐药机制,超广谱,内酰胺酶,(ESBL),头孢菌素酶,(AmpC,酶,),肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶,(KPC),碳青霉烯酶、外排泵等,(,非发酵菌,),23,超广谱,内酰胺酶,(ESBL),主要产酶菌种：大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯菌。,诱因：三代头孢菌素的过度使用。,用药提示：青霉素、头孢菌素、氨曲南临床治疗无效。,可选药物：碳青霉烯类、头霉素类、,内酰胺类,/,酶抑制剂复合药。,24,大肠埃希菌,2007,年,ESBL,发生率：,61.8%,(123/199),2008,年,ESBL,发生率：,53.3%,(97/182),25,大肠埃希菌,(ESBL),26,肺炎克雷伯菌,2007,年,ESBL,发生率：,41.7%,(25/60),2008,年,ESBL,发生率：,51.3,%,(,40/78,),27,肺炎克雷伯菌,(ESBL),28,头孢菌素酶,(AmpC,酶,),主要产酶菌种：阴沟肠杆菌。,诱因：三代头孢菌素的过度使用。,用药提示：,1-3,代头孢菌素、,内酰胺类,/,酶抑制剂复合药、头霉素类耐药。,可选药物：碳青霉烯类、四代头孢菌素。,29,阴沟肠杆菌,30,肠杆菌科的碳青霉烯酶,(KPC,酶,),主要产酶菌种：肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌。,预警：厄他培南,MIC2g/ml,用药提示：提高碳青霉烯类的治疗浓度，避免低水平诱导耐药菌株。建议联合用药。,31,铜绿假单胞菌,32,鲍曼不动杆菌,33,小结,肠杆菌科细菌对碳青霉烯类、头孢哌酮,/,舒巴坦、哌拉西林,/,他唑巴坦、阿米卡星敏感性高。,大肠,ESBL,略有下降,(61.8%53.3%),，肺克,ESBL,有上升,(41.7%51.3%),。,铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类、头孢哌酮,/,舒巴坦、哌拉西林,/,他唑巴坦、阿米卡星耐药率低。,鲍曼不动杆菌的感染及耐药性逐年上升。,34,革兰阳性球菌的构成,35,革兰阳性球菌的标本分布,36,苯唑西林耐药的葡萄球菌,(MRS),主要菌种：金黄色葡萄球菌，凝固酶阴性葡萄球菌。,原因：细胞壁上青霉素结合蛋白,(PBPs),的改变。,用药提示：所有,内酰胺类抗生素临床治疗无效。,首选药物：利奈唑胺，替考拉宁，万古霉素。,37,MRSA,38,MRSCON,39,葡萄球菌对糖肽类的中介率有所上升。,MRSA,：万古霉素,2007,年,0%,，,2008,年,1.9%,。,MRSCON,：万古霉素,2007,年,6.2%,；,2008,年,9.2%,，替考拉宁,1.2%.,40,肠球菌属,对头孢菌素天然低耐。,高水平庆大霉素,=S,的菌株，提示：,氨基糖苷类,+,万古霉素,/,青霉素类,高水平庆大霉素,=R,的菌株，提示：不存在协同作用,协,同,作,用,41,肠球菌属,42,小结,革兰阳性球菌对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素敏感性高。,MRSA,的发生率：,77.8%,(07),67.9%,(08),MRSCON,的发生率：,100%,(07),，,93.7%,(08),耐药性：屎肠球菌粪肠球菌，,青霉素类仍可作为治疗粪肠球菌的较好选择。,43,谢谢！,44,