《CART培训》.ppt

精选课件,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,主讲人,:,张爽,2015-4-16,CAR-T,细胞治疗的介绍,1,精选课件,目,录,1,2,3,4,5,6,相关概念介绍,文献研究,未来展望,CAR,结构,T,细胞活化,CAR-T,细胞治疗的流程,2,精选课件,1.,相关概念介绍,CAR-T,细胞治疗,:,利用基因工程修饰外周血,T,细胞，使其表达嵌合抗原受体来特异性的识别肿瘤相关性抗原的方法。,MHC,：,由一群紧密连锁的基因群组成，定位于动物或人某对染色体的特定区域，呈高度多态性。其编码的分子表达于不同细胞表面，参与抗原递呈，制约细胞间相互识别及诱导免疫应答。,T,细胞：,胸腺依赖性淋巴细胞是淋巴细胞的主要组分，它具有多种生物学功能，如直接杀伤靶细胞、辅助或抑制,B,细胞产生抗体，对特异性抗原和促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子等，是身体中抵御疾病感染、肿瘤形成的“斗士”。,3,精选课件,2.T,细胞活化,TCR,CD3,MHC,共刺激因子,细胞因子刺激,CAR,CART,细胞治疗的思路,承担,T,细胞识别抗原的重任，结构,T,细胞,第一信号,4,精选课件,3.CAR,结构,识别肿瘤表面抗原的单链抗体（,scFv,）抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序构成。,目前,CAR,的信号域已从第一代的单一信号分子发展为包含,CD28,、,CD137,等共刺激分子的多信号结构域,(,第二、三代,),临床应用广泛。,5,精选课件,嵌合抗原受体的演化,第一代,CAR,：,由识别肿瘤表面抗原的单链抗体（,scFv,）抗原结合部和免疫受体酪氨酸活化基序（通称为,CD3,）组成。缺点：,T,细胞增值时间短，细胞因子分泌率低。,第二代、第三代,CAR,：,引入了共刺激的双信号序列。目的：提高,T,细胞的细胞毒活性、增值性与存活时间、促进细胞因子的释放。,6,精选课件,CAR-T,细胞治疗优势,1.,治疗更精准,应用基因修饰病人自体的,T,细胞，利用抗原抗体结合的机制，能克服肿瘤细胞免疫逃逸，让肿瘤细胞无所逃遁；,2.,多靶向更精准。,CAR,既可以利用肿瘤蛋白质抗原，又可利用糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围。,CAR-T,细胞作用过程不受,MHC,的限制。,3.,杀瘤范围更广,鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿瘤抗原的,CAR,基因构建一旦完成，便可以被广泛利用；,4.,杀瘤效果更持久,促进,T,细胞增殖与活化的基因序列，能保证,T,细胞进入体内后还可以增殖。,免疫记忆功能，可以长期在体内存活。,7,精选课件,4,.CAR-T,细胞治疗流程,CAR-T,细胞治疗过程和自体骨髓干细胞移植相似,(Annu.Rev.Med,2014),8,精选课件,文献介绍,9,精选课件,研究病人的基线特征,10,精选课件,方法,自体,T,细胞结合,CD19,靶向的嵌合抗原受体慢病毒载体（,CTL019,）,复发或难治性,ALL,患者,(,30,名患者,),(0.76106-20.6106 CTL019 cells/kg),免疫应答,毒性效应,扩增数,持久性,CTL019 T cells,注入,检测,11,精选课件,CTL019,细胞生存率,Figure 1.,图,A,注入,CTL019,细胞后在,6,个月期间的,无事件生存率为,67%,，完全生存率为,78%,(The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014),12,精选课件,CTL019,细胞的持续性,Figure 2.CTL019,持久性,图,A.,：流式检测外周血样中,CTL019-,阳性,T,细胞（,1-25,号儿童和,26-30,号成年人）,图,B,：通过,KaplanMeier curve,曲线检测外周血和骨髓，,6,个月时，患者获得,CTL019,持续性的概率为,68%,(,The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014,),13,精选课件,CTL019,细胞的扩增,Fig.2C,通过实时定量,PCR,检测,CTL019,细胞在体内增殖，并可在响应患者的血液、骨髓和脑脊液中检测到高水平的增值。,(,The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014,),14,精选课件,不良反应,Figure 3.B,细胞发育不全,无复发患者,B,细胞发育不全的概率为,73%,。延迟性,B,细胞再生障碍,(,The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014,),15,精选课件,不良反应,Figure 4.,相关的细胞因子释放症,CTL019,细胞 注入病人,28,天后，,IL-6,大量释放。,所有患者都有细胞因子释放综合症，其中,27%,的患者症状较严重，这与输注之前疾病负荷较高相关，这种症状经抗白细胞介素,6,受体,抗体,塔西单抗有效治愈。,(,The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE,2014,),16,精选课件,结论,嵌合抗原受体,抗,CD19,修饰的,T,细胞疗法对治疗复发和难治型,ALL,是有效的,。,研究中,30,位接受此类治疗的急性淋巴细胞白血病病人中，有,27,位病人其癌症迹象消失，完全缓解率达到,90%,多数持续性长达,24,个月，,6,个月无症状生存率未,67%,，,2,例在脑脊液中检测到肿瘤细胞的中枢神经系统（,CNS,）疾病患者在,CART,治疗后疾病消除，重要的是该组患者无复发。,2.CTL019,和高缓解率有关，即使是干细胞移植失败的患者也有效。,17,精选课件,02,01,细胞因子风暴,T,细胞在杀死其它细胞，会释放很多细胞因子，炎症反应。,由于,CAR-T,杀癌细胞太快，在局部产生超大量的细胞因子，,如白介素,6,，引发起剧烈的免疫反应。,脱靶效应,CAR,修饰的,T,细胞对靶抗原具有高亲和力，识别并且,结合这部分抗原，导致对正常组织的异常免疫反应，,造成器官损害。,CAR-T,疗法的临床风险,18,精选课件,诱人的应用前景,寻找其他分子靶点,提高,CAR,有效性和安全性,CAR,修饰的,T,细胞肿瘤免疫治疗理论上的优势和临床前期实验结果,寻找肿瘤特异性抗原作为分子靶点和开发适合,CAR,的单链抗体,优化,CAR,的结构，筛选出良,好治疗潜质的,T,细胞亚群,随着研究的不断深入，相信,不久的将来,CAR,修饰,T,细胞,会给肿瘤治疗带来新的希望,未来展望,展望,19,精选课件,THANK YOU FOR YOUR ATTENTION!,20,精选课件,