第十八章常见病毒鉴定.ppt

,微生物学检验,国家卫生和计划生育委员会规划教材,单击此处编辑母版文本样式,微生物学检验,单击此处编辑母版文本样式,微生物学检验,微生物学检验,国家卫生和计划生育委员会规划教材,单击此处编辑母版文本样式,微生物学检验,第十八章 常见病毒鉴定,返回总目录,本 章 内 容,第一节 呼吸道病毒,1,第二节,2,第五节,5,肝炎病毒,第六节,6,第四节,4,第三节,3,反转录病毒,疱疹病毒,肠道病毒,朊粒及其他病毒,学习目标及重点,学习目标：,掌握流感病毒、肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、肠道病毒的主要生物学特点,各病毒的传播途径、临床检验和防治原则,区别乙型肝炎病毒常见抗原抗体的组成及其临床意义,五种肝炎病毒常用鉴定方法,解释流感病毒变异和流行的关系,了解朊粒的生物学特征,本章重点：,流感病毒、肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、肠道病毒的生物学特性和致病性,常见病毒的检验方法,一、流感病毒,（一）生物学特性,流行性感冒病毒（,influenza virus），,简称流感病毒，是流感的病原体,甲（,A）:,抗原性易发生变异，多次引起世界性大流行,乙（,B）:,对人类致病性较低,丙（,C）:,只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染，很少造成流行,1.形态结构,（,1,）形态,第一节 呼吸道病毒,（,2,）,结构,核衣壳,核酸,核蛋白（,NP）,RNA,多聚酶,核衣壳,包膜,基质蛋白（,MP）,脂蛋白（,LP）,刺突,血凝素（,HA）,神经氨酸酶（,NA）,第一节 呼吸道病毒,2.分型与变异,分型：,根据,NP,和,MP,的不同流感病毒分为甲（,A）、,乙（,B）、,丙（,C）,三型。,甲型流感病毒根据其表面,HA,和,NA,抗原性的不同，又分为若干亚型。,变异：,最主要的是抗原性变异,:HA,和,NA,抗原性漂移（,antigenic drift,）,抗原性转变（,antigenic shift,）,第一节 呼吸道病毒,3.培养特性：,在鸡胚羊膜腔和尿囊腔中增殖,红细胞吸附试验（,hemoadsorption test,）,易感动物为雪貂,4.抵抗力：,抵抗力较弱,不耐热，,56 30,分钟可灭活病毒,室温下很快丧失传染性,第一节 呼吸道病毒,（二）微生物学检验,1.标本,：血清、咽漱液,2.鉴定：,ELISA,检查患者咽漱液中的抗原,用单克隆抗体经免疫酶法,PCR,技术、核酸杂交等方法检出病毒或进行分型,第一节 呼吸道病毒,（三）临床意义,传染源：,患者、隐性感染者、被感染的动物,传播途径：,飞沫，经呼吸道进入体内,致病机理：,呼吸道上皮细胞感染增殖，病毒不入血，毒素样物质进入血液,症状：,上呼吸道症状、发热、头痛、全身酸痛,第一节 呼吸道病毒,二、风疹病毒,（一）生物学特性,1形态结构：,单股正链,RNA,病毒,有包膜，核衣壳为二十面体对称,一个血清型,人是唯一宿主,2抵抗力：,抵抗力较弱,不耐热，,56 30,分钟可灭活病毒,对紫外线、乙醚、氯化铯、去氧胆酸等均敏感,第一节 呼吸道病毒,（二）微生物学检验,1标本：,鼻咽分泌物、皮疹液、尿液，脑脊液、血液、骨髓等,2鉴定 病毒培养,免疫学检测,红细胞凝集抑制试验,中和试验,补体结合试验,酶或荧光素标记单克隆抗体,病毒核酸检测：,PCR或核酸杂交技术,第一节 呼吸道病毒,（三）临床意义,儿童是主要易感者,呼吸道传播,局部淋巴节增殖后经病毒血症散播全身,可垂直传播导致胎儿先天性感染,第一节 呼吸道病毒,三、其他呼吸道病毒,病毒名称,形态结构,所致疾病,SARS冠状病毒,球形、冠状，有包膜，RNA,发热、干咳、胸闷、气短，急性呼吸窘迫综合症、休克、多器官功能障碍综合症等,麻疹病毒,球形、衣壳呈螺旋对称型，有包膜，不分节段的单股RNA,发热、咳嗽、流涕、眼结膜充血、皮肤出现红色斑丘疹,腮腺炎病毒,球形，核心为单股RNA，衣壳呈螺旋对称，有包膜,一侧或双侧腮腺肿大，伴有疼痛、发热,返回章内容,第一节 呼吸道病毒,三、其他呼吸道病毒,病毒名称,形态结构,所致疾病,腺病毒,球形、双链DNA、核衣壳20面体对称、无包膜,咽炎、扁桃体炎、肺炎、流行性眼结膜炎、急性出血性膀胱炎、胃肠炎等,副流感病毒,球形、单负链RNA、核衣壳螺旋对称、有包膜,小儿气管炎、支气管炎、肺炎、普通感冒等,呼吸道合胞病毒,球形、单负链RNA、核衣壳螺旋对称、有包膜,婴幼儿喘息性支气管炎、肺炎、成人普通感冒等,鼻病毒,球形、单正链RNA、核衣壳20面体对称、无包膜,婴幼儿支气管炎、支气管肺炎、成人普通感冒等,返回章内容,第一节 呼吸道病毒,第二节 肝炎病毒,一、甲型肝炎病毒,（一）生物学特性,1.形态结构,属小RNA病毒科,直径约为27nm，呈球形，二十面体立体对称,甲型肝炎病毒形态模式图,HAV电镜图,第二节 肝炎病毒,2.抵抗力,耐受乙醚、氯仿等脂溶剂,耐酸：在pH3的酸性环境中稳定,不耐热：100 5,min可使之灭活,在海水、淡水、毛蚶、泥沙中存活数天至数月,第二节 肝炎病毒,3.培养特性,易感动物：黑猩猩，狨猴，鹰面猴，短尾猴,允许性细胞：Vero、恒河猴胚肾细胞（FRHK-4）、人肝癌细胞株（PLC/PRF/S）等,在培养细胞中生长缓慢，无CPE,第二节 肝炎病毒,（,二）微生物学检验,HAV-IgM检测,：早期、快速诊断最可靠的血清学指标,HAV-IgG检测：,主要用于了解既往感染史、疫苗免疫、效果评价或流行病学调查,分离培养：,原代肝细胞或恒河猴胚肾传代株细胞对HAV敏感，生长缓慢，不引起细胞裂解,第二节 肝炎病毒,（三）临床意义,传染源：,主要为急性患者和隐性感染者,传播途径：,粪口途径传播,第二节 肝炎病毒,二、乙型肝炎病毒,HBV流行久远、传播广泛，是全球性公共卫生问题,全球3.5亿人携带HBV,我国为高流行区,感染率：60%,HBsAg携带率：8%,10%,慢性乙肝病人：1000万,80%原发性肝癌与HBV慢性感染有关,第二节 肝炎病毒,二、乙型肝炎病毒,（一）生物学特性,1形态与结构,小球形颗粒:,直径22nm；,管形颗粒,:直径22nm，长度在50700nm之间；,大球形颗粒,:即Dane颗粒，直径42nm。,第二节 肝炎病毒,第二节 肝炎病毒,2.抗原组成,（1）表面抗原HBsAg,存在于三型颗粒中,是HBV感染的主要标志,pres1和preS2抗原的检作为病毒复制的指标,抗-preS抗体阳性常见于急性乙肝的恢复期，表示病毒正在或已经被清除,抗-HBs,保护性抗体（中和抗体）,乙肝痊愈（临床）或免疫成功（接种疫苗）的标志,第二节 肝炎病毒,（2）核心抗原HBcAg,仅存在于Dane颗粒中，刺激机体产生抗HBc（IgG、IgM）,可在感染的肝细胞核心部位的表面存在，表明病毒在复制,到血液中即被降解为HBeAg，一般血清学方法检测不到HBcAg，而只能检测到抗-HBc,抗-HBc,对机体无保护作用,抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志,抗HBc-IgG：持续时间长,凡有过 HBV感染者均可阳性，并可终身伴随,第二节 肝炎病毒,（3）e抗原HBeAg,仅存在于Dane颗粒中，HBeAg是HBcAg的降解产物，游离存在于血液中，为病毒复制及强传染性的指标，产生抗HBe，是预后良好的征象,抗-HBe,随着HBeAg的消失而出现,抗-HBe的出现标志着病毒复制减少、传染性降低,保护作用,第二节 肝炎病毒,（4）,PreS1、PreS2,与,HBV-DNA,成正比,是病毒复制的指标,抗-,PreS1、,抗-,PreS2,在恢复期的早期出现,阳性提示病毒正在或已经被清除,是预后良好的指标,第二节 肝炎病毒,（二）微生物学检验,HBV,抗原、抗体检测,血清,HBV-DNA,检测,血清,DNA,多聚酶检测,第二节 肝炎病毒,（三）临床意义,传染源：,患者或无症状HBsAg携带者,传播途径：,密切接触、血液及体液、母婴传播,乙型肝炎的临床表现呈多样性，可由无症状携带至急性肝炎、慢性肝炎、重症肝炎等。病毒不仅存在于肝内，也存在于脾脏和血细胞等。一般认为，病毒在细胞内增殖对肝细胞的直接破坏作用不大，而机体对肝脏的免疫病理损害才是引起肝炎发生的主要原因,第二节 肝炎病毒,三、丙型肝炎病毒,（一）生物学特性,有包膜的单正链RNA病毒。,病毒体呈球形，直径为3060nm,（二）微生物学检验,1.检测病毒抗体：用ELISA法检测抗-HCV,2.检测病毒RNA：因HCV在血液中含量很少，常用敏感的RT-PCR法,第二节 肝炎病毒,（三）临床意义,1.主要通过血液/体液传播，其他如性传播、垂直传播,2.是引起输血后慢性肝炎和肝硬化的主要原因,3.HCV感染极易转为慢性,4.无症状HCV携带者和慢性丙肝者多见,5.人群普遍易感，HCV感染的母亲所生婴儿感染率高,6.诱发肝外损伤：肾小球肾炎,7.免疫力不牢固,第二节 肝炎病毒,四、丁型肝炎病毒,（一）生物学特性,HDV是一种缺陷病毒由HBsAg构成其外壳HDV定位于肝细胞核内在血液中由HBsAg包被形成35-37nm颗粒单负链环状RNA,HDV结构模式图,第二节 肝炎病毒,（二）微生物学检验,1.HDAg是HDV感染的直接标志,2.抗-HD抗体检测,抗HDV-IgM：是HDV早期感染标志,抗HDV-IgG：是HDV既往感染的标志,慢性HDV感染时，两种抗体可长期共存,3.HDV-RNA,HDV RNA是HDV存在及复制的一个有用指标,第二节 肝炎病毒,（三）临床意义,只能感染HBsAg阳性的病人,共同感染(coinfection)：,与HBV同时感染,重叠感染(superinfection)：,在慢性乙型肝炎或HBsAg携带者的基础上再感染HDV,第二节 肝炎病毒,五、戊型肝炎病毒,（一）生物学特性,属杯状病毒科，球形，无包膜，直径3234nm，单正链RNA一个血清型,（二）微生物学检验,检测HEV：电镜或免疫电镜观察,检测抗-HEV,抗HEV-IgM：是近期内HEV感染的标志，有早期诊断价值,抗HEV-IgG：HEV感染后可长期存在，可用于流行病学调查,HEV RNA,第二节 肝炎病毒,（三）临床意义,主要通过粪-口途径传播，患者多见于2040岁成年人，潜伏期为29w，多数患者于病后6w即好转或痊愈。少数患者可表现为重症肝炎，甚至可导致死亡。孕妇感染时，发病率高，病情严重，常发生流产或死产,HEV致病机制尚不明了，可能是病毒本身作用及机体免疫应答造成肝细胞损伤,病后有一定免疫力,第二节 肝炎病毒,六、其他肝炎相关病毒,1.,庚型肝炎病毒 属黄病毒科，为单股正链RNA。主要通过输血等非肠道途径传播，呈全球分布，我国主要在非甲至戊型肝炎病人、献血员、血透病人、器官移植患者及肝癌患者中存在,2.,TT型肝炎病毒是从一例日本输血后非甲至庚型肝炎病人（TT）血液中发现的一类新型DNA病毒，属细小DNA病毒科，通过血液和血制品传播，也可经消化道传播,返回章内容,第二节 肝炎病毒,第三节,反转录病毒,包括肿瘤病毒亚科、泡沫病毒亚科和慢病毒亚科,人类嗜,T,细胞病毒,人类免疫缺陷病毒（,HIV,）,HIV-I,型和,HIV-II,型,获得性免疫缺陷综合症（,AIDS,）,中国,AIDS,流行现状,截至,2014,年,2,月,28,日，我国累计报告报告的,HIV/AIDS 587182,例，死亡,138956,例。现存活艾滋病病毒感染者,271624,例，艾滋病病人,176602,例。我国艾滋病疫情总体上保持低流行态势，但依然呈上升趋势，幅度较以前有所减缓。据统计，自,2005,年至今，性传播比例持续攀升。,2014,年,3,月新发现的,HIV/AIDS,中，异性性传播,4515,例（,69.8%,），同性性传播,1260,例（,19.5%,），注射毒品传播,430,例（,6.6%,），母婴传播,36,例（,0.6%,），性接触加注射毒品传播,13,例（,0.2%,），既往输血及使用血制品传播,11,例（,0.2%,），既往采血浆传播,5,例（,0.1%,），传播途径不详,203,例（,3.1%,）。,50,岁以上群体和学生群体所占比例上升，这也是我国,HIV,传播的新特点,知识拓展,第三节,反转录病毒,一、人类免疫缺陷病毒,（一）生物学特性,1,形态与结构,RNA,，有包膜球形病毒。,关键结构：,gp120,gp41,2,HIV,复制,（,1,）吸附,-gp120,+CD4,（,2,）穿入和脱壳,（,3,）生物合成,（,4,）装配与释放,第三节,反转录病毒,3,HIV,的理化特性,对热敏感,56,处理,30,分钟失去感染性，但不能完全灭活血清中的,HIV,灭活方法是,100,20,分钟,对化学因素敏感，在室温下,70%,酒精只需,1,分钟即不能检出活性,对紫外线或射线不敏感，因此紫外线或射线不能灭活,HIV,病毒,第三节,反转录病毒,（二）微生物学检验,1,标本采集 采集血液、体液标本,2,HIV,检验 包括,HIV,抗体、,P24,抗原、,HIV,病毒载量、,CD4,+,T,细胞计数等,抗体检测是诊断,HIV,感染的唯一标准,（,1)HIV-1P24,HIV-1P24-,可用于“窗口期”及,HIV-1,抗体阳性的母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断,第三节,反转录病毒,（,2,）血清抗体检测 分为,筛查和确认,试验,免疫印迹法,-,是,HIV,血清学检测中最常用的确证性试验,筛查阳性者必须进行确认试验,第三节,反转录病毒,（,3,）测定病毒核酸,临床常用于测定感染者体内游离病毒的,RNA,含量即病毒载量,（,4,）,CD4,+,T,细胞计数,应用流式细胞仪（,FCM,）进行,CD4,+,T,细胞记数及占淋巴细胞的百分率（正常情况下与,CD8+T,细胞比例为,2:1,）,CD4,+,T,细胞数,:,0.5,10,9,/L,时，为抗反转录病毒药物治疗的指征,0.2,10,9,/L,时，应立刻进行卡氏肺孢子菌的预防治疗,0.1,10,9,/L,时，易感染巨细胞病毒和结核分枝杆菌,（,5,）耐药性检测,检测患者标本中,HIV,基因序列，监控变异的发生，间接估计药物耐药情况。,第三节,反转录病毒,（三）临床意义,HIV,无症状携带者和,AIDS,患者,传播途径,性接触、,输血或血制品、,母,-,婴传播,传染源,病毒选择性侵犯,CD4,+,细胞，细胞变性、坏死，导致以,CD4,+,细胞缺陷为主的严重免疫缺陷,1,致病机制,第三节,反转录病毒,（,1,）急性期：,（,2,）无症状潜伏期：,（,3,）,AIDS,期,:,感染后,2,6,周内,一般为,8,10,年,通常难以检测到,HIV,抗体,血清抗体阳性，具传染性。,持续发热、盗汗、失重、不明原因的慢性腹泻、湿疹、银屑病、脂溢性皮炎、皮炎、疱疹,-,带状疱疹、口腔念珠菌病、黏膜白斑病等,机会感染和肿瘤,2,临床特征,第三节,反转录病毒,机会性感染,带状疱疹,毛囊炎,第三节,反转录病毒,在,AIDS,患者中念珠菌属感染是很常见的,象鹅口疮（上图）尽管不危及生命但十分讨厌.,左图为念珠菌性肺炎.,机会性感染,第三节,反转录病毒,恶性肿瘤,图为,AIDS,患者常出现的,Kaposi,肉瘤,第三节,反转录病毒,由于缺乏,AIDS,宣传及预防意识，中国九十年代出现“,AIDS,村”,第三节,反转录病毒,患艾滋病的孩子,第三节,反转录病毒,二、人类嗜,T,细胞病毒,-,引起,T,细胞白血病和毛细胞白血病,人类嗜,T,细胞病毒,(HTLV),（一）生物学特性,电镜下,HTLV,呈球形，直径约,100nm,，中心为病毒的,RNA,和反转录酶,最外层系病毒的包膜，其表面嵌有,gp120,，能与细胞表面的,CD4,分子结合而介导病毒的感染。包膜内有病毒的衣壳，含有,P18,和,P24,两种结构蛋白,第三节,反转录病毒,（二）微生物学检查,*电镜观察,*免疫血清或单克隆抗体鉴定,*血液中,HTLV-I,抗体的存在即可诊断为该病毒感染；,而血液中异常淋巴细胞数量的大量增生，同时证实这些淋巴细胞中有,HTLV-IDNA,，则可支持成人,T,淋巴细胞白血病的诊断,第三节,反转录病毒,HTLV-I,可经输血、注射或性接触等传播，也可通过胎盘、产道或哺乳等途径垂直传播。,（三）临床意义,成人,T,淋巴细胞白血病主要采取化疗，但对,HTLV-I,的抵抗效果不佳；,AZT,和其他反转录酶抑制剂能够有效的对抗细胞培养中的,HTLV-II,。,返回章内容,第三节,反转录病毒,第四节,疱疹病毒,疱疹病毒（,Herpesviruses,）是一群中等大小的有包膜的双股,DNA,病毒，有,110,个以上成员，其中与人感染有关的人疱疹病毒已发现有,8,种,常用名,单纯疱疹病毒,1,型,巨细胞病毒,单纯疱疹病毒,2,型,人类疱疹病毒,6,型,水痘带状疱疹病毒,人类疱疹病毒,7,型,EB,病毒,人类疱疹病毒,8,型,球形，直径约为,120,300nm,。,核心为双链线性,DNA,，,衣壳呈,20,面体，有包膜,对脂溶剂敏感，临床采集标本不应与脂溶剂接触。最适保存温度为,-196,（液氮），在,-70,病毒感性可保存数月，,4,可保存数天，,-20,易破坏病毒包膜，短期保存即完全灭活,疱疹病毒共同的特：,第四节,疱疹病毒,一、单纯疱疹病毒（,HSV,）,HSV-1,HSV-2,HSV-2,型则与生殖器疱疹和新生儿感染有关,主要引起口唇和角膜疱疹,（一）生物学特性,基因组,DNA,有,40%,左右的序列同源,HSV,的增殖周期短，常潜伏于神经节中引起潜伏感染。抵抗力较弱，易被脂溶剂灭活。温度高于,56,30,分钟失去感染性,第四节,疱疹病毒,（二）微生物学检验,1,标本,采集水疱液、唾液、脑脊液、角膜刮取物、阴道拭子等标本，经常规处理后接种或置低温冰箱保存,2,分离培养鉴定,常用原代兔肾、人胚肺、人胚肾细胞或地鼠肾等传代细胞分离培养病毒。在鸡胚绒毛膜上，,HSV-2,形成大空斑，而,HSV-1,形成针尖大小的空斑。常用实验动物有家兔、豚鼠、小鼠等,3,血清学检测,中和试验、免疫荧光等鉴定,也可分离病毒,DNA,，根据,DNA,酶切图谱差异鉴定型别,第四节,疱疹病毒,（三）临床意义,直接接触传染或被唾液污染的餐具,间接传染,HSV,感染一般分为原发感染和复发感染。原发感染好发于婴幼儿或儿童，多为隐性感染，并不表现出症状,HSV-2,侵及躯体腰以下部位，主要是生殖器，它是引起性病的主要病原体之一,HSV-1,主要侵犯躯体腰以上部位，可引起口腔、唇、眼、脑及腰以上部位感染,第四节,疱疹病毒,单纯疱疹病毒感染,-,多核细胞,第四节,疱疹病毒,二、水痘,-,带状疱疹病毒（,VSV,）,（一）生物学特性,水痘,-,带状疱疹病毒（,VZV,）,初次感染,再次感染,水痘,（多见于儿童）,带状疱疹（多成人和老人）,第四节,疱疹病毒,（二）微生物学检验,水痘一带状疱疹的临床症状典型，一般不需作微生物学诊断。必要时可检查嗜酸性核内包涵体和多核巨细胞细胞内抗原,（三）临床意义,传染源：,主要是患者，病毒经呼吸道、口、咽、结膜、皮肤等处侵入人体,1,人是水痘,-,带状疱疹病毒的唯一自然宿主,2,带状疱疹 是潜伏在体内的,VZV,复发感染,第四节,疱疹病毒,三、人巨细胞病毒（,HCMV,）,和,EB,病毒,一般是宫内感染侵犯胎儿神经系统、肝、肾等器官，,人巨细胞病毒（,HCMV,）,EB,病毒（,EBV,）,与多种人类疾病相关如传染性单核细胞增多症、,Burkitt,淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等,鼻咽癌和,EB,病毒关系密切，血清学检查有高效价,EB,病毒抗原抗体,可采集各种体液、分泌物等样本进行病毒分离、抗原或核酸检测,返回章内容,第四节,疱疹病毒,第五节 肠道病毒,一、脊髓灰质炎病毒,（一）生物学特性,1.,形态结构 球形，直径,27,30nm,，无包膜单股正链,RNA,病毒，核衣壳呈,20,面体立体对称结构,电镜下的脊髓灰质炎病毒,（一）生物学性状,2.,培养特性 可在猴肾细胞,人胚肾细胞、人羊膜细胞中培养增殖引起,CPE,敏感的实验动物有猴、猩猩等灵长类动物，将病毒接种于脊髓或脑内容易发病，导致肢体麻痹,第五节 肠道病毒,（一）生物学性状,3.,抵抗力：,较强,第五节 肠道病毒,（二）微生物学检验,1.,标本：病人发病早期咽洗液、粪便、血液、脑脊液或组织,2.,鉴定,（,1,）病毒的分离培养与鉴定,第五节 肠道病毒,（二）微生物学检验,2.,鉴定,（,2,）血清学诊断,（,3,）其他,电子显微镜,分子生物学技术,第五节 肠道病毒,二、轮状病毒,（一）生物学性状,1.,形态结构：直径,60,80nm,，核心为双链,RNA,，无包膜,衣壳壳粒呈放射状排列，负染色后电镜下观察,形如车轮,，故得名轮状病毒（如右图）,电镜下的轮状病毒,第五节 肠道病毒,（一）生物学特性,2.,培养特性,组织培养十分困难,需选用特殊的细胞株培养,3.,抵抗力较强,95,的乙醇是最有效的灭活剂,第五节 肠道病毒,（二）微生物学检验,1.,标本 采集病人发病,5,天内的粪便，密封后送检,2.,鉴定,（,1,）电镜观察 如见特殊车轮状病毒颗粒即可诊断（右图）,第五节 肠道病毒,（二）微生物学检验,2.,鉴定,（,2,）抗原检测,ELISA,双抗体夹心法,（,3,）血清学检查,（,4,）分子生物学检测技术,第五节 肠道病毒,三、其他肠道病毒,（一）柯萨奇病毒与埃可病毒,柯萨奇病毒,埃可病毒,与脊髓灰质炎病毒生物性状类似,；,为球形无包膜单股正链,RNA,病毒；,柯萨奇病毒在多种组织细胞中生长并产生,CPE,；埃可病毒在猴肾细胞中增殖良好。,柯萨奇病毒,血凝抑制试验鉴定；埃可病毒,中和试验鉴定,第五节 肠道病毒,三、其他肠道病毒,（二）新型肠道病毒,1.,肠道病毒,70,型,引起急性出血性结膜炎,又称急性出血性结膜炎病毒,2.,新型肠道病毒,71,型,引起手足口病流行,返回章内容,第五节 肠道病毒,一、朊粒,（一）生物学特性,1.,形态与结构：,朊蛋白（,PrP),2.,抵抗力：,第六节 朊粒及其他病毒,PrPsc,PrPc,氨基酸序列完全一致,空间构象,对蛋白酶,K,抗性,致病性有差异,强,正常细胞,PrPc,与羊瘙痒病,PrPsc,的三维结构,第六节 朊粒及其他病毒,（二）微生物学检验,1.,标本：脑脊液、脑组织,2.,鉴定,神经病理学检查,免疫学检查,基因分析法,第六节 朊粒及其他病毒,（三）临床意义,引起致死性中枢神经系统慢性退行性病变,潜伏期长,慢性进行性发展，以死亡告终,患者表现为痴呆、震颤、共济失调等神经系统症状,第六节 朊粒及其他病毒,二、其他病毒,（一）狂犬病病毒,1.,生物学特性,（,1,）形态与结构：子弹状,（,2,）培养特性：宿主广范，细胞内增殖后可形成内基小体,（,3,）抵抗力：不强,第六节 朊粒及其他病毒,（一）狂犬病病毒,2,微生物学检验,（,1,）标本：唾液、脑脊液或死后脑组织。,（,2,）鉴定：,直接镜检,病毒分离,免疫荧光检测抗原,分子生物学技术检测,第六节 朊粒及其他病毒,（二）人乳头瘤病毒（,HPV,）,1.,生物学特性 球形,目前尚不能在组织细胞中培养,2.,微生物学检验,（,1,）标本,生殖道分泌物,疣体表面脱落细胞,（,2,）鉴定,组织学、电镜、免疫学及核酸检测等,第六节 朊粒及其他病毒,（三）黄病毒,1.,流行性乙型脑炎病毒,（,1,）生物学特性：球形，可产生,CPE,，抵抗力不强,（,2,）微生物学检验,1,）标本 血液、脑脊液、尸检脑组织等,2,）鉴定,分离培养,血清学检查,分子生物学技术检测,第六节 朊粒及其他病毒,（三）黄病毒,2.,登革病毒,（,1,）生物学特性：球形，,PH7-9,最稳定,4,条件下传染性可保持数周,（,2,）微生物学检验,1,）标本：血清、血浆、白细胞,死亡患者取肝、脾等,2,）鉴定,病毒分离培养,血清学检查,核酸检测,第六节 朊粒及其他病毒,（三）黄病毒,3.,森林脑炎病毒,球形,小鼠最为敏感，任何途径接种均能感染,病毒检测方法与乙型脑炎病毒相似,森林硬蜱为主要传播媒介及储存宿主,第六节 朊粒及其他病毒,（四）出血热病毒,1.,汉坦病毒,球形或卵圆形，,RNA,、有包膜，对酸、热抵抗力弱,常用免疫荧光法、免疫酶染色法、分子生物学技术检测,带毒动物为传染源，以鼠传播为主，以高热、出血和肾损害为主要临床综合征,第六节 朊粒及其他病毒,（四）出血热病毒,2.,新疆出血热病毒,球形、,RNA,、有包膜病毒,常用,ELISA,、免疫荧光法检测,野生啮齿动物和家畜是主要储存宿主，硬蜱是传播媒介,引起自然疫源性疾病，有严格的地区性和明显的季节性。以发热、全身肌痛、中毒症状和出血为主，无肾综合征,返回章内容,第六节 朊粒及其他病毒,