二维液相色谱进展与应用PPT.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2016/9/30,#,二维液相色谱进展与应用,多,维液相色谱理论：,多维色谱理论最早由,Giddings,提出。,他提出多维色谱的两条标准：,1,）样品组分必须经过两种或两种以上的不同分离模式。,2,）经一种模式分离的样品组分不应该在其后续的分离中被混合。,二维液相色谱：,将,分离机理不同又相互独立的两根色谱柱串连起来构成的分离系统。,二维液相色谱的发展,尽管,二,维液相色谱技术,目前还没有被广泛使用，但这方面的潜力是巨大的。大型公司，如安捷伦和岛津，都在投入资金开发这种仪器，让科学家能够回答之前无法回答的问题。目前，一些优秀的产品已上市。这种强大的技术可用在各种不同的领域，如制药、生物制药、天然产物的研究和食品分析等,。,二,维液相色谱有望,成为分析中等至高度复杂的混合物的强大工具,。,二维液相色谱的构成：,二维液相色谱的分类：,根据切换系统不同进行分类：,1,）传统的中心切割技术色谱,2,）全二维液相色谱,二维液相色谱的应用,二维液相色谱法的应用,二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用,二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用,二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用,二维液相色谱法在差异蛋白质组学中的应用,二维液相色谱法在羊草地上部总蛋白分离中的应用,二维液相色谱法在体内药物分析中的应用,.,天然药物成分复杂，包括从无机物到有机物，从极性到非极性，从小分子到生物大分子的各种成分，,预处理费时费力，操作困难,。,2D-LC,串联质谱技术简化了预处理过程，,提高了峰容量与选择性,。用,2D-LC,系统来分析天然药物中的非挥发性成分，并针对不同成分摸索了,LC,的选择和合适的条件，其中分别采用了,强酸性阳离子交换柱或氨基柱与反向,C18,柱组成二维系统,，接口三通阀内接,15mmX4mm,的,C18,富集柱来浓缩欲分离组分。进样,12,分钟后，富集柱上的组分被有机溶剂反洗到第二维分析柱中，并采用,质谱检测,。两种系统分别对生物碱组分和单唾液酸神经节苷酯等组分表现出,良好的富集效果和分离能力,。,二维液相色谱法在天然药物成分分析中的应用,.,建立,SAX-RP,模式的在线二维液相色谱系统，并将其应用于鹿茸蛋白的分离、分析中。方法样品首先由,第一维强阴离子交换色谱,（,COSMOGEL QA Glass Packed Column,，,75 mm,8.0 mm I.D,）在,pH 9.16,的,Tris-HCl,缓冲体系中以,0.8 mL/min,的流速洗脱分离，采用不连续的逐步增加盐浓度的,8,步台阶梯度方式洗脱，洗脱产物富集在与反相柱相同填料的捕集柱顶端，通过阀切换将富集在捕集柱上的组分反向冲入,第二维反相分析柱（,Shodex Rspak RP18415,，,150 mm,4.6 mm I.D,）继续分析。,结果鹿茸蛋白在所构建的二维系统上得到了较好的分离，,与一维色谱相比，系统的总峰容量、分辨率在一定程度上得到了提高,，系统总出峰数为,30,，总峰容量为,240,。结论使用常规尺寸的色谱柱构成的二维液相色谱系统仪器要求简单，对鹿茸为代表的动物类中药的分离、分析有一定指导意义,二维液相色谱法在鹿茸蛋白分离中的应用,由于,复杂体系样品,分离需要,更强的分离能力,，二维色谱能使样品组分,在两个不同的分离条件下进行分离，显著提高分离能力，降低色谱峰重叠，同时改善色谱峰鉴定的可靠性，在中药质量控制中发挥重要作用,。不同的二维色谱技术中，在线全二维液相色谱技术由于其在较短时间内可以获得高峰容量、样品损失低、重现性好及自动化程度高，成为对于复杂体系分离时最受关注，发展最迅速的技术。,二维液相色谱技术在中药质量控制中的应用,展望,Thankyou,