激光共焦角膜显微镜和角膜内皮镜-.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,激光角膜共焦显微镜,角膜的基本解剖结构,上皮细胞层,前弹力层,基质层,后弹力层,内皮细胞层,技术参数,光学原理：激光共焦纤维扫描技术,激光光源：,670nm,水平分辨率：,1um,纵向分辨率：,1um,观测范围：,400um*400um,放大倍率：,800 x,扫描深度：,1500um,在角膜病诊断中应用的特点,活体组织切片,定性,与定量分析,无创伤性,动态观察,0 m,10 m,30 m,40 m,62 m,100 m,300 m,572 m,检 查,窗口,HRTII,角膜激光共焦显微镜,上皮细胞-30,m,基质-300,m,内皮细胞 570,m,四种检查模式,50 m,Section,模式：可获取,角膜不同深度的地形图,10 m,Tiefe:,30 m,40 m,62 m,100 m,300 m,572 m,0 m,Sequence,模式：,同一焦平面动态扫描,同一焦平面动态连续记录图像,10,幅,/,秒,Volumn,模式：,序列扫描图像,沿,Z,轴向后连续动态扫描，每幅图像间隔,2um,，,共,连续向后扫描,40幅图像,，深度,80,m,独有的纵向断层扫描,角膜内皮细胞计数,功能,临床应用,药物毒性眼表病变,42,岁男性,左眼“霰粒肿”手术后长期频点各种抗生素滴眼液,3,月余,左眼红痛、流泪,2,月,治疗,1,月余,棘阿米巴性角膜炎,感染源：棘阿米巴原虫,病理：,病变早期累及上皮，成假树枝状上皮混浊。,病灶反复破溃和愈合，渐向基质深层发展，有大小不等斑片状或盘状基质混浊。,晚期可发生溃疡穿孔。,诊断：角膜刮片后培养找到阿米巴原虫；,共焦显微镜阿米巴包囊,06-08-30,06-08-30,病例,1,患者女，,19,岁，学生,.,过夜配戴,OK,镜后出现左眼,红、疼痛、视力下降,1,月,deth 22,m,棘阿米巴性角膜炎,包囊,病例,2,患者女,22,岁，学生,.,配戴隐形眼镜后右眼红，,畏光，视力下降,1,月,06-11-10,06-11-10,deth 44,m,滋养体,06-09-18,06-09-18,deth 117,m,病例,3,患者女，,19,岁，学生,.,过夜配戴,OK,镜后左眼红、,疼痛、视力下降,1,月,滋养体,病变角膜组织切片内可见棘阿米巴包囊,(,箭头,),，,PAS,染色,40,角膜基质层出现断裂，表示扫描区位于溃疡灶内，溃疡边缘可见有细小圆形阿米巴包囊结构，包囊中心可见白色高反光区。,阿米巴性角膜炎的微囊,离体组织学检查,(,光学显微镜,),活体检查,(HRT 3),单纯疱疹病毒性角膜炎,树枝状角膜炎,可为单发或多发，组织学上的上皮损害表现为沿树枝状走行曲的细胞丧失。,单个损害可扩大，或邻近的损害融合成大的病灶，形态不规则，呈“地图状”损害，组织学上“地图状”损害可累及基底层上皮细胞。,反复感染可累及角膜深层。,角膜上皮下感觉神经丛及上皮内神经末梢受损，从而出现角膜知觉减退。,盘状角膜炎,可在上皮感染的同时或之后发生，为一种亚急性或慢性坏死性炎症。,轻型病例角膜混浊可完全吸收，长期或复发性病例，基质炎症由前弹力层扩展至深层基质。,病变早期表现为板层水肿，细胞内和细胞间有液体积聚,随着炎症发展，板层可发生断裂，白细胞从角膜缘倾入病灶，,晚期板层破坏严重，见大量巨噬细胞，血管侵入坏死灶，出现炎性肉芽肿性病变。,最终出现不规则胶原沉积。,共焦显微镜下见，前弹力层局部出现皱褶，上皮下角膜神经穿过皱褶处见皱褶甚至断裂。,患者，,XXX,，女，既往患双眼病毒性角膜炎史三年，三年来双眼反复发作，来我院行共焦显微镜检查示，双眼角膜上皮下神经广泛断裂，局部扭曲。,真菌性角膜炎,病因：,致病真菌直接侵入角膜感染所致。多见于农业性外伤（植物擦伤）或剔除泥土、砂石等角膜异物后。,感染源：,常见为曲霉菌、镰刀菌、白色念珠 菌、头孢霉菌、酵母菌。,病理：,早期角膜基质有脓疡形成，周围基质有卫星状浸润坏死灶，内有破碎的板层和中性粒细胞浸润，坏死灶内很少见完整的霉菌，但周围基质内却有大量菌丝。,随着病情进展，临近脓疡趋于愈合，坏死物质连同表面组织脱落形成溃疡，坏死程度依霉菌毒力、抗原性、菌株种类而异。,部分霉菌可穿过后弹力层，形成角膜穿孔。,适当的抗霉菌治疗可使溃疡愈合而留有白斑，,若发生穿孔，常形成粘连性角膜白斑。,诊断：,临床表现,坏死组织真菌培养,坏死组织涂片检查：找到真菌菌丝,角膜共焦显微镜检查：活体直接找到菌丝。,角膜浅基质层基质紊乱，可见大量菌丝分布，基质层结构破坏，散在分布炎性细胞。,予全身及局部抗真菌治疗一周后复查共焦显微镜，可见菌丝有明显减少。,患者，,XXX,，因“左眼眼痛、畏光、视物不见两月”，外院诊断“真菌性角膜炎”，予抗真菌治疗后症状好转，但视力无明显提高。入院行角膜共焦显微镜检查可见基质有高反光区域，仅少量短小菌丝结构，但可见大量树突状细胞散在分布于基质层内。,真菌性角膜炎,颗粒状角膜营养不良,组织病理学变化：角膜上皮变薄，前弹力层破坏，实质浅层细胞内外有淡嗜伊红染色颗粒状物，从实质层经过前弹力层破损处进入上皮层内。,上皮和前弹力层尚完整，基底细胞失去极化，上皮下有颗粒物质沉着，前弹力层消失。实质层内亦有颗粒或面包屑样物质沉着，且部分融合成团块状。,角膜上皮细胞呈局限性蜂窝状改变，细胞反光增强，上皮层和基质层可见大量强反光区域，病变局限，与正常组织分界清晰。,Fuch,角膜,内皮营养不良,病例,患者 女,47,岁,主诉 双眼视物模糊,3,年 否认家族史,查体 视力,OD 0.3 OS 0.3,双角膜轻度水肿，后弹力层可见角膜,小滴，中央角膜较多,诊断,Fuch,内皮营养不良,OS,基质层,后弹力层,角膜小滴,OD,内皮细胞,内皮层可见多量角膜小滴,其间有增大的,内皮细胞,增厚的后弹力层,内皮层,Fuchs,营养不良,角膜小滴,cornea guttata,N=272 mm,-2,Keratocytes,Endothelium,N=682 mm,-2,Basal cells,Wing cells,Superficial cells,角 膜 移 植,N=810 mm-2,N=11102 mm,-2,N=6540 mm,-2,N=5003 mm,-2,50 m,Bowman membran,02.08.2000,Pat.:w.,57J.,LASIK,术后,患者女岁,双眼,LASIK,术后,检查：角膜瓣下大小不等颗粒样混浊,LASIK,术后角膜瓣下混浊,OD,OS,06-10-10,06-10-10,基质层,基质层,基质层内大小不等高密度颗粒,异常神经结构,LASIK,术后,6,个月的基质,.post-op,深度,:150 m,LASIK,切割带,碎片,新神经,活性角膜细胞,50 m,50 m,50 m,患者，,XX,，因“双眼刺痛、畏光一年余”就诊，裂隙灯检查示角膜缘可见沟状溃疡，深达角膜厚度的,1/2,。共焦显微镜检查角膜缘溃疡结构，见角膜缘基质结构紊乱，有新生血管长入，周围分布大量树突状细胞。,边缘性角膜溃疡,患者，,XX,，男，,14,岁，因“双眼红、痒一周”于,2007,年,4,月就诊，为过敏体质，裂隙灯见结膜充血水肿，角膜缘毛细血管网充盈，睑结膜面呈铺路石状改变，诊断为“双眼春季卡他性结膜炎”。,春季卡他性结膜炎,共焦显微镜检查，发现角膜表层及上皮层可见大量树突状细胞，以角膜缘最集中。角膜缘结构紊乱，局部可见高反光混浊区。,共焦激光角膜显微镜优势,角膜活体组织学检查，精确显示角膜各层结构,分辨率高至 1,m，800 x,放大倍率,多种图像获取模式,单一图像,z-,轴向后40幅动态图像连续扫描，每幅图像间隔1.5,m,同一焦平面动态连续记录图像 10幅/秒,角膜厚度测量,独有活体角膜断层观察,自动图像分析和细胞计数,水肿情况依然可以观察角膜,应用,临床诊疗,各种感染性角膜病的诊断,角膜变性性疾病的诊断,泪膜异常性疾病的诊断,免疫相关性角膜疾病的诊断,各类角膜手术术后随访,各种角膜疾病治疗随访,基础研究,活体细胞水平研究角膜生理病理变化及影响因素,各种眼表泪液性疾病的发病机制,活体细胞水平研究各类角膜手术创口愈合机制及影响因素,免疫相关性及其他各类角膜疾病的机制研究,角膜内皮细胞检查,正常人的角膜内皮细胞,为一单层扁平细胞，呈六边形镶嵌结构，大小均匀、排列整齐。,角膜内皮细胞密度随年龄增高而逐渐下降，,110,岁时最高，,2050,岁时相对稳定，,60,岁以后明显下降。正常人,30,岁前，平均角膜内皮细胞密度为,3000,4000,个,mm,2,维持正常角膜内皮屏障功能所需最低临界密度,700,个,mm,2,角膜内皮镜检查,利用镜面反射原理，由于角膜内皮细胞和房水屈光指数不同，二者之间形成了界面，当一窄光术聚焦在这一界面上时引起反射，内皮细胞各部分反射程度的差异显示出细胞的边界。,主要是观察角膜中央部分的内皮细胞，一般是分析计算内皮细胞的形态、大小、密度及计算机分析，可以深入地了解内皮细胞的形态改变情况,临床应用,（,1,）对长期配戴角膜接触镜的人可以了解其角膜内皮状况。,（,2,）可用于评价角膜材料保存情况。,（,3,）在内眼手术前用角膜内皮镜可评价手术的可行性。,观察指标,1,、内皮细胞形态：六边形，大小相等，均匀规则，边界清晰,2,、内皮细胞边界：正常呈清晰的暗的直线，有时可见几个细胞出现双边，这可能是光学上的阴影现象,3,、暗结构和角膜后表面形态：暗区表示该处的内皮细胞已不出现。较大的暗区多发生于角膜内皮病变,4,、角膜内皮后表面：正常时呈直线型，异常时呈波浪或锯齿型。,normal,白内障术前内皮细胞数检查,白内障术后,15,年，角膜内皮失代偿。内皮细胞水肿，体积增大，反光增强，胞内见细胞核。,离体新鲜猪眼超乳术后,1h,，内皮水肿变形，局部内皮缺损，呈黑区改变。,Fuchs,角膜营养不良,后弹力层见不规则高反光混浊区，内皮表面可见散在小凹，内皮细胞水肿，边界不规则，细胞核可见。局部可出现细胞凋亡，呈“黑洞”结构。,XX,，女，患有“马凡综合征”，来我院行晶体摘除手术。术前查共焦显微镜显示角膜内皮细胞广泛水肿，细胞核增大、反光增强，部分区域无明显内皮细胞结构。,