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《胚胎工程的应用及前景》课件解析.ppt

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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,3.3 胚胎工程的应用及前景,湛江产天价牛肉 千元一斤有钱还难买,新闻,日本神户牛肉(雪花牛肉),这就是和牛(又称日本神户牛),是当今世界公认的品质最优秀的,良种肉牛,国内市场每公斤能售出,2000,多元人民币的天价。,如何将这种优质的牛进行快速、大量的繁殖呢?,一、利用体细胞核移植技术进行克隆。,二、利用体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植,技术进行繁殖。,一、胚胎移植,1.,胚胎移植概念,将雌性动物体内的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到,同种,的、,生理状态相同,的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。,体内受精(配种或人工授精)、体外受精、,胚胎分割、细胞核移植得到的胚胎。,胚胎的来源:,供体:,受体:,受体的条件:,提供胚胎的,具有优良遗传性状的个体。,接受胚胎的个体。,同一物种、生理状态相同。,思考?,1,、准备移植的小牛胚胎,移植到任,何一头母牛的子宫内都能发育吗?,2,、供体与受体之间进行胚胎移植,会不会发生免疫排斥反应?,2.,胚胎移植的生理学基础,请认真阅读课本,P76,,思考讨论:,胚胎移植的生理学基础的四点内容是什么?,三,.,胚胎移植的生理学基础,1),胚胎环境,:,2),胚胎收集,:,3),胚胎存活,:,4),遗传特性,:,发情排卵后,,供体和受体有着相同的生理环境,早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能,受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥,胚胎与受体可建立正常的,生理和,组织,联系,但胚胎遗传物质,在孕育,过程中不受任何,影响。,相同,可能,无排斥,无影响,思考与讨论,:,1,、在胚胎移植操作中,怎样才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致?例如,供、受体的发情时间要一致吗?供体胚胎移入受体子宫的位置,应与在供体内的位置相同或相似吗?,应对供体和受体母畜,进行同期发情处理,,使它们的生理条件达到同步后一致,这样才能使供体的胚胎移入受体后有相同或相似的生存条件,这是胚胎移植成功与否的关键。,位置相同或相似。,2,、胚胎移植,实质,早期胚胎在相同生理环境条件下,空间位置的转移。,思考与讨论,:,3,、胚胎移植的基本程序,请认真阅读课本,P77,,图,3-19,,思考讨论:,(,1,)胚胎移植的基本程序包括哪些?,(,2,)每一步技术操作的作用如何?,(,3,)为什么要进行这些操作?,选择及同期发情处理,超数排卵处理,配种或人工授精,胚胎收集,胚胎检查,胚胎保存,胚胎移植,妊娠检查,分娩,3,、胚胎移植的基本程序,(,1,)对供体、受体进行选择,供体:,具有优良遗传性状的个体;,受体:,同种的、健康和正常繁殖能力的个体,处理:,同期发情,具体做法:,注射促性腺激素。,(,2,),超数排卵处理,具体做法:,注射促性腺激素,(,3,)配种或人工授精,精子来源:,具有优良遗传性状的雄性动物。,(,4,)胚胎的收集,在配种或输精后第,7,天,用特制的冲卵装置,把供体母牛子宫内的,胚胎,冲洗出来。,冲卵是把母牛的卵子冲出来吗?,(,5,)对胚胎进行质量检查,你知道检查的目的吗?此时胚胎处于什么时期?,检查胚胎的发育状况,,处于桑椹胚或囊胚,(,6,)胚胎的保存或移植,胚胎保存的条件是什么?,-196,液氮保存,(,7,)胚胎的移植,方法一:手术法,方法二:非手术法,(,8,)对受体母牛进行,是否妊娠,的检查,(,9,)受体母牛产下胚胎移植的犊牛,选择,供体母牛,受体母牛,同期发情处理,超数排卵,供体公牛,配种,冲卵,质量检查、培养,胚胎移植,妊娠检查,分娩(胚胎移植的犊牛),总结:,胚胎移植的基本程序,供体、受体的选择,和,同期发情处理,配种或,进行人工授精,胚胎的收集、,检查、培养或保存,胚胎移植,移植后的检查,对供体母牛做超数排卵,【,归纳总结,】,该过程中两次使用促性腺激素,,第一次对受、供体进行同期发情处理;,第二次用于供体的超数排卵。,该过程中的两次检查:,第一次对收集的胚胎进行检查;,第二次对受体母牛是否妊娠进行检查。,产下的犊牛性状取决于所用公牛和供体牛,,性别取决于公牛提供何种类型的精子,二者与受体牛没有关系。,冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎,而非冲出卵子。,胚胎移植成功与否要有两个条件,(,1,)胚胎移植一般应在,同种的雌性供体和受体,之间进行。,(,2,)进行胚胎移植的供体和受体的,生理状态要相同,。,提醒,试管婴儿,(,动物,),技术为,有性生殖,,胚胎分割移植为,无性生殖,。,胚胎移植是有性生殖还是无性生殖,取决于胚胎是由受精卵形成的还是,核移植技术形成重组细胞发育而成的。,遗传性状优秀,健康有正常繁殖能力,同种遗传性能优秀,同期发情处理,胚胎移植,超数排卵,请阅读课本,P75,、图,3-17“,胚胎移植的现状和意义”,,自由思考讨论,发表自己的观点。总结出胚胎移植的意义。,4,、胚胎移植的现状和意义,1),加速育种工作和品种改良;,2),大量节省购买种畜的费用;,3),一胎多产;,4),保存品种资源和濒危物种;,意义:充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能,缩短繁殖周期。,1.,下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是(),A.,供体母牛必须是同一物种的良种,B.,受体母牛必须是同一物种的良种,C.,供体公牛必须是同一物种的良种,D.,受体母牛可以是同一物种的一般健康牛,B,练习,练习,2.,下列有关动物胚胎移植的叙述中,错误的是(),A.,受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植,B.,受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态,C.,超数排卵技术要使用一定的激素,D.,试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行,A,D,3.,供体的胚胎移植到受体后,游离的胚胎在发育过程中形成胎盘与受体相连,并通过胎盘与受体的血液进行物质交换。以下说法正确的是(),A.,受体是为供体胚胎提供发育的条件,B.,受体与胚胎血型应相同,否则会,发生免疫排斥反应,C.,受体与胚胎血液混融在一起,D.,胚胎心肺功能都能正常运行,A,二、胚胎分割,阅读课本,思考以下问题:,(,1,)胚胎分割的概念,(,2,)胚胎分割特点,(,3,)胚胎分割的理论基础,(,4,)胚胎分割操作过程,1.,概念,:,采用显微手术(机械方法)的方法将早期胚胎分割成,2,分胚,4,分胚或,8,分胚,经体内或体外培养后植入受体,以得到同卵双胎或同卵多胎的技术。,2.,特点:,后代具有相同的遗传物质,,因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。,3,、理论基础,动物胚胎细胞的全能性。,所以胚胎分割的时期为:,囊胚或桑椹胚。,4,、选择的胚胎:,发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。,5,、使用的主要仪器:,实体显微镜和显微操作仪。,6,、具体操作,用分割针或分割刀片将胚胎切开,吸出其中的半个胚胎,注入预先准备好的空透明带中,或直接将裸半胚移植给受体。,胚胎分割移植的显微操作,7,、操作注意事项:,对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要将内细胞团均等分割。,原因:内细胞团一般到囊胚阶段才出现,它是发育为胚胎本身的基础细胞,其他细胞为滋养细胞,只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割,,会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强,少的部分发育受阻或发育不良,,甚至不能发育等问题。,胚胎分割的份数越多,操作的难度会越大,移植的成功率也越低。,早期胚胎的体积很小,只有在显微镜下才能看到;再者,细胞数目是有限的。分割的份数越多,不但难以做到均等分割,,每一份的细胞数会越少,而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。,因此,分割的份数越多,技术的难度会越大,移植后的恢复和发育的难度会越大,移植成功率自然会降低。,8,、胚胎分割技术的缺陷,(,1,)刚出生动物的体重偏低,毛色和斑纹还存在差异;,(,2,)采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。,9,、胚胎分割技术的应用,:,为转基因技术、性别控制技术提供活胚材料。,三,.,胚胎干细胞,阅读课本,思考以下问题:,(,1,)什么是胚胎干细胞?,简称是什么?,(,2,)胚胎干细胞的来源。,(,3,)胚胎干细胞的特性。,(,4,)胚胎干细胞的应用。,干细胞,干细胞是一种具有多项分化潜能和自我复制、更新能力的,原始未分化细胞,,是形成哺乳类各种组织器官的祖宗细胞。,多能、专能,.,全能细胞,根据来源和个体发育过程中先后次序不同,,干细胞可分为:,胚胎干细胞,和,成体干细胞组织干细胞,分类,全能干细胞,(胚胎干细胞),桑椹胚及以前(如受精卵),由内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来,能发育成完整个体,多能干细胞,(,成体干细胞,),能分化出动物体内的多种组织(造血干细胞),专能干细胞,如成肌细胞、皮肤生发层细胞等,能分化出特定的(一种或两种)组织,.,分别指什么,分化程度,潜能;核全能性;目前初始化,.,应用,按照分化潜能大小来分类,.,.,分类,三、胚胎干细胞,1.,来源:,简称,ES,或,EK,细胞,是由,早期胚胎,或,原始性腺,中分离出来的一类细胞。,1.,概念:,简称,ES,或,EK,细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。,2.,特点,:,(,1,),形态,:,体积小,.,细胞核大,核仁明显,;,(,2,),功能,:,具有发育的全能性,.,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞,.,体外培养可增殖不分化,;,(,3,),在体外培养的条件下,,ES,细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存,也可以进行遗传改造。,干细胞的分类:,(,1,)全能干细胞,(,2,)多能干细胞,(,3,)专能干细胞,专能干细胞,多能干细胞,全能干细胞,特点,只能分化成一种类型或功能密切相关的两种类型的细胞,能分化成多种细胞或组织,,,但不能发育成完整个体,能形成机体的所有组织器官,,,发育成完整个体,举例,上皮组织基底层的干细胞,,,成纤维细胞,造血干细胞,胚胎干细胞,知识扩展:,干细胞的分类,3.,主要用途,阅读课本相关内容,说说胚胎干细胞有什么具体用途?,(,1,)治疗人类的某些顽症。,人类由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病,如帕金森综合症、少年糖尿病和老年痴呆症等,已成为医学上尚未攻克的顽症。利用,ES,细胞可以诱导分化形成新的组织 细胞的特性,移植,ES,细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能。目前,在动物实验方面,,用,ES,细胞诱导分化出的某些组织细胞,已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑难病症。,(,2,)培育出人造组织器官,用于器官移植,随着组织工程技术的发展,通过,ES,细胞体外诱导分化,还可以培育出人造组织器官,解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。,(,3,),ES,细胞也是研究体外细胞分化的理想材料。,ES,细胞在饲养层细胞上,或在添加抑制因子的培养液中,能够维持不分化的状态。,诱导因子:诱导,ES,细胞向不同类型的组织细胞分化。,4.,利用胚胎干细胞治疗肝衰竭,实现此过程的重要原因是(),A.,细胞分裂,B.,细胞特化,C.,细胞分化,D.,细胞增殖,C,体细胞核移植的,过程,供体体细胞,细胞培养,体细胞核,卵巢卵母细胞,MII,期卵母细胞,去核,无核卵母细胞,注入,重组细胞,重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,生出与供体遗传物质相同的个体,发育,理论基础:,动物细胞,核,的全能性,提取,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛受精卵,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,良种牛体外受精胚胎,1.,下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是(),A.,供体母牛必须是同一物种的良种,B.,受体母牛必须是同一物种的良种,C.,供体公牛必须是同一物种的良种,D.,受体母牛可以是同一物种的一般健康牛,B,2,、(多选)克隆动物的方法有(),A.,细胞核移植,B.,胚胎分割,C.,体外受精,D.,转基因技术,11,、(多选)胚胎分割所需要的主要仪器设备为(),A.,显微操作仪,B.,电子显微镜,C.,电子切割仪,D.,实体显微镜,12,、(多选)下列各项中,属于胚胎干细胞技术的应用的有(),A,为新药的研究和开发提供材料,B,为细胞和组织移植提供无免疫原性的材料,C,有目的地促进某种生物的进化,D,改良并创造动物新品种,AB,AD,ABD,3,、(多选)下列关于干细胞的说法正确的是(),A,专能干细胞只能分化成一种类型或功能密切相关的两种类型的细胞,B,多能干细胞具有分化成多种组织细胞的潜能,但却失去了发育成完整个体的能力,C,全能干细胞可以分化为全身,200,多种细胞类型,并进一步形成机体的所有组织、器官,D,胚胎干细胞是全能干细胞,ABCD,4,、(多选)下列各项成就中,对胚胎干细胞应用临床治疗具有重大意义的是(),A.2003,年日本科学家用猴胚胎干细胞治疗猴帕金森氏综合征获得成功,B.2001,年美国科学家成功诱导猴的胚胎干细胞在体外形成神经细胞、心肌细胞等,C.2004,年美国科学家将“早期”的人胚胎干细胞植人因脊椎受伤而无法行走的鼠体内,瘫痪的鼠又能重新行走,D.2002,年英国科学家对鼠胚胎干细胞的免疫缺陷基因进行修复后,再将其植人鼠体内,结果修复了鼠的免疫系统缺陷,ABCD,
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