培养细胞的H·E染色.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,培养细胞的,H,E,染色,HE,染色,苏木精,伊红,1.4%,多聚甲醛溶液,2.,苏木精染液,苏木精,0.5g,，无水乙醇,10mL,硫酸铝钾,25g,，蒸馏水,150mL,完全溶解后，混合均匀，加热煮沸,3,5min,，加入蒸馏水至,500mL,，最后加入,0.1g,碘酸钠,3.,盐酸酒精溶液：,0.5mL,盐酸、,100mL 70%,乙醇,4.,淡氨水：,0.5mL,氨水、,100mL,自来水,5.,伊红染液：,0.5g,伊红,B,、,100mL80%,乙醇,试剂,镜检：观察并记录细胞状态,吸弃培养基，以,PBS,溶液（,1mL,）漂洗,1-2,次,以固定剂固定,15,分钟,吸弃固定剂，以蒸馏水洗,加入苏木精染液（,1mL,，可重复使用）染色十数分钟（随时镜检，以确定染色时间）,以流动的自来水洗,加入,0.5%,盐酸酒精溶液进行分色（数秒）,以蒸馏水洗,实验步骤（一）,以流动的自来水洗,加入,0.5%,氨水溶液进行返蓝处理（数十秒）,以流动的自来水洗后观察，效果好则以蒸馏水稍洗,加入伊红染液染色（数秒）,以蒸馏水洗,观察并记录（细胞核呈紫色、细胞质呈粉红色，层次感分明）,实验步骤（二）,注意：,每步操作中都应随时,镜检,保持湿润,不要直接冲击细胞面,染色结果,整理,拍照后，请将平皿清洗干净后，按要求放置,实验中的废液请倒入废液桶中,实验结束后，请将各种试剂统一收回到最后一条实验台上，托盘中的物品清洗干净后，请放置在原处,