猪圆环病毒感染特点和综合控制.ppt

Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,Click to edit Master title style,武汉中博生物股份有限公司,张红灯,2014,01,16,圆环病毒临床感染特点和综合控制方案,圆环病毒,-,分类,圆环病毒科、圆环病毒属，单链环状,DNA,。,是兽医学上已知动物病毒中最小的病毒，无囊膜，直径,17-22nm,，含有,1.76-2.3kb,根据,PCV,的致病性、抗原性及核苷酸序列，分为,PCV-1,和,PCV-2,两个型,圆环病毒,-,抗逆性,抗热性；在,70,时可以存活,15min,56,不能将其灭活,常用消毒剂如福尔马林、碘酒和酒精作用,10,分钟后，病毒滴度会下降。,抵抗酸性环境。,PH=3,时长时间存活。,对氯仿不敏感。,垫料和发酵床猪场,二、,圆环病毒感染特点,-,慢！,口、鼻感染,扁桃体和淋巴结,全身各组织持续增值和带毒,局部增值,初级淋巴组织,全身淋巴组织和器官,07,天,714,天,14,天后,案例：,2010-6,湖北（爆发）,基本情况,(600,头母猪场）。,该场建于,2008,年，,2009,年引种，原在一个种猪场引种,150,头后，再引第二批时引种猪场发病。,2009-6-18,宜阳种猪场引种，到场后备猪发病，粪便有潜血，经磺胺类药物治疗后恢复。,第一批生产从,2009,年底到现在，半年来，生产成绩优越，哺乳仔猪成活率达,98%,，保育成活率,99%,，育肥成活率,99%,。,案例：发病情况,2010-6-18,，因天热消毒，并,淋浴降温公猪舍,和没使用,零排放的种猪舍,。,2010-6-19,，公猪舍,7,头公猪全部发病，体温,41.5,个别,42,，嗜睡，体表发红，,3-4,天后皮肤发红消失，毛孔有黄色的渗出物，鼻分泌物较多，有些咳血。,初诊断为流感。治疗用青霉素,+VC,输液治疗，有一头实验性加地塞米松，,3,天后死亡。病程,5,7,天时个别猪出现呕吐，粪便普遍带血，后期发黄，,在后期,15,天,-22,天,，大量的黏膜脱落，包裹在粪便排除，这些猪开始采食，逐渐耐过康复。,母猪舍发病情况与公猪类似，,淋水后第二天发病,，发酵床没淋浴，发病稍晚。妊娠后期表现严重，死亡率也较高，胎儿死亡，不易排出。,整栋传播较慢，需,10,天左右，第,3,4,天达到高峰，,一个星期后达到死亡高峰，不死的,20,多天开始康复，,死亡率达,50%,。,育肥猪，出上述症状外，拉稀，粪便褐色有潜血或黄色，拉稀可达,30%,，,10%,的后肢瘫痪，,10%,呕吐，,保育死亡率已达,50%,，现仍没康复。,案例：治疗情况,治疗,1,：林可,+,大观，复合制剂可能含强效解热剂酚制剂，注射后采食维持一天，预后不良。,治疗,2,：穿心莲,+,多西环素，治疗六头，虽然反弹，但三头轻微，另三头也未见加重。,治疗,3,：磺胺,+,多西环素,+,中药针剂，已注射就吃料，一停针就不食。,目前：,2010-7-11,只有,30,40,头母猪康复,鼻孔分泌物,鼻孔分泌物,武汉亚博特动物健康管理,(,中美合资,),有限公司,Wuhan Yabote Animal Health Management CO.,LTD,皮肤发紫,气管内分泌物,间质性肺炎,胸腔积液和粘连、肺脏坏死,喉头出血点,腹腔积液和肠鼓气,膀胱出血,脾脏充血、梗阻,肾盂出血,心脏冠状沟出血点,胆汁反流,肾点状出血,扁桃体充血和出血,结果,定量,定性,定量,定性,蓝耳,1,0,阴性,2,6.49*10,4,弱阳,3,1.74*10,6,阳性,4,2.42*10,8,强阳,5,3.16*10,8,强阳,圆环,1,0,阴性,2,5.04*10,10,阳性,3,2.80*10,9,强阳,4,3.31*10,7,阳性,5,6.72*10,8,强阳,PCR,备注,PCR,备注,猪瘟,1,阴性,2,阴性,3,阴性,4,阴性,5,阴性,流感,1,阴性,H1H3,2,阴性,H1H3,3,阴性,H1H3,4,阴性,H1H3,5,阴性,H1H3,菌检测结果如下：,检测项目,结果,药敏结果,敏感药物,链球菌,阳性,阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋钠,多杀性巴氏杆菌,阳性,阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素、恩诺沙星、头孢噻呋钠、,支气管波氏杆菌,阳性,阿莫西林、氟苯尼考、强力霉素、恩诺沙星、四环素、,圆环病毒攻毒实验,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春,15,头,38,日龄的长白猪,PCV-2PRRSVPPVPRVSIVCSFV,及,JEV,经,PCR,和,RT-PCR,检测为阴性，同时,PCV-2,和,PRRS,用,ELISA,抗体检测为阴性。,40,日龄,10,头实验组接种,pcv-2 BF,株，口服,2ml,同时滴鼻,1.5ml,含毒量为,10,7.25,/0.3ml;,对照组,5,头同样的方法接种培养基。,质料来源：,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春,感染后天数,10,14,21,28,35,42,ORF2,抗体,1.9,0.2,1.8,0.3,3.3,2.1,4.3,3.1,10.3,5.8,11.4,3.8,阳性率,1/4,1/4,4/4,2/2,2/2,2/2,注：接种,3,、,7,天抗体检测为阴性。,s/p2.0,为阳性,攻毒实验,-,血清抗体阳性率,（资料来源：,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春）,（资料来源：,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春）,（资料来源：,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春）,（资料来源：,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春）,感染后天数,7,天,14,天,21,天,42,天,带毒组织,扁桃体、腹股沟淋巴结,扁桃体,除胰脏外,所有组织中,组织病毒持续增值带毒,-,持续感染,（资料来源：,中国兽医杂志,2009-7,司兴奎、郭鑫、杨汉春）,最好的采样部位？和采样时间,圆环病毒流行病学,-,场内循环（年龄）,2000,年郎洪武等京、冀、鲁、豫、津、赣、吉,7,省,22,个群,559,份血清抗体,年龄,20,日,1-2,月,育肥,后备,经产,总,样本数,58,139,96,141,125,559,阳性数,0,23,49,61,107,240,阳性率,0,16.5%,51%,43.3%,85.6%,42.9%,注：,12,月龄消瘦,9,头血清学阴性；,45,月龄,6,头消瘦猪均阳性,感染特点,-,要注意哪些问题,潜伏期长，持续带毒普遍。,抗体产生慢。,-,不适合紧急普免,很难净化，存在范围广。,危害大，长期破坏猪群的免疫状态。,保育期带毒状态非常普遍，与蓝耳病毒感染相互协同。,三、,圆环病毒流行病学,-,场内循环（年龄）,2000,年郎洪武等京、冀、鲁、豫、津、赣、吉,7,省,22,个群,559,份血清抗体,年龄,20,日,1-2,月,育肥,后备,经产,总,样本数,58,139,96,141,125,559,阳性数,0,23,49,61,107,240,阳性率,0,16.5%,51%,43.3%,85.6%,42.9%,注：,12,月龄消瘦,9,头血清学阴性；,45,月龄,6,头消瘦猪均阳性,流行病学场内循环,-,年龄,2003,年，琚春梅等豫、鄂、赣、沪、湘,5,省,1257,份送检血清抗体,年龄,仔猪,育肥,母猪,公猪,总,阳性率,30.83%,64.93%,71.5%,70.27%,57.28%,流行病学场内循环,-,结论,随着年龄的增长阳性率增加，说明感染持续，隐性感染普遍存在。,评价圆环病毒感染状态，由于抗体产生较慢，血清学检测意义不大。,定量检测抗原必要性，标准,10,5,以上应采取控制措施,后备猪免疫程序,-,美国,后备母猪,免疫种类,疫苗,剂量,方式,入场当周,回肠炎、大肠杆菌和沙门氏菌,Enterisol+Sal,E.coli,Water Medicator,Oral,第二周,蓝耳病活病毒,阳性血清,混合稀释,IM,第三周,支原体、圆环、流感,circumuwent,Myco,respiFlu3,Wolf-Flu,4ml,IM,第,15,和,16,周,细小、钩端螺旋体和猪丹毒,LEP+B,5ml,IM,第,16,和,19,周,蓝耳和油皮病,Wolf PRRS+Greasy,4ml,IM,第,17,和,20,周,支原体和流感,Mycohault Wolf SIV+Respiflu3,3ml,IM,四、流行病学,-,其他病原关系,PRRSV,SIV,PPA,APP,MH,SS HSP,BIO PM,SAM,PCV-2,相关疾病,蓝耳病病毒和圆环病毒相关性,五、症状,-,PCV2,相关的疾病,断奶仔猪多系统衰竭综合征,（,PMWS,）,猪皮炎肾病综合征,（,PDNS,）,PCV2,猪呼吸道病复合征,（,PRDC,）,A2,型先天性震颤,（,CT,）,繁殖障碍？,猪增生性和坏死性肺炎,（,PNP,）,1,、,PMWS,简介,PMWS,主要侵害,6-12,周龄的 仔猪,发病率一般为,5%-30%,，病死率可达,50%-100%,进行性消瘦、呼吸困难、发育障碍、皮肤苍白、共济失调及突然死亡，造成患猪免疫机能下降，生长性能降低，给养猪业带来很大损失,腹股沟淋巴结显著肿大，其外部皮肤呈淡蓝色。腹内侧和腹下有弥散性芝麻粒至绿豆大小的淡蓝色皮下出血点。乳头尤其是后两对乳头呈淡蓝色。,少数猪出现顽固性腹泻，腹泻物呈黄色或灰褐色。,个别猪眼睑肿胀，结膜潮红，,病猪初期体温升高到,4041,，后期体温正常，甚至降低，最后衰竭死亡。,PMWS,很可能是,PCV-2,与,PPV,、,PRRSV,及其它一些病原产生的结果,2,、先天性震颤（,CT,）,主要见于新生仔猪,全身骨骼肌痉挛性收缩，表现头部、肋部和四肢震颤，站立不稳，行走困难，吮吸不住乳头。,在卧地和睡眠时震颤消失，但在睡醒和站立地震颤复现。,大多数病仔猪震颤随日龄增加逐渐减弱或消失。,一般于,2030,日龄痊愈，愈后无复发现象。,MOV08916.MPG,3,、猪皮炎,肾病综合症（,PDNS,）,PDNS,是一种以系统血管炎为特征的，主要侵害猪体皮肤和肾脏的一种传染病。该病首次在英国报道（,1993,）症状：,主要见于生长猪和保育猪，,体温微高或正常,；,突出的症状是腹部、背部和四肢皮肤上出现。,圆形或不规则形状的,隆起,，初期呈红色或紫红色，中后期变为黑色，形成斑块状的黑色痂皮。,病猪痒感不明显，如无继发感染，一般可,自行恢复,。,Cresham,等,2001,报道了,PMWS,和,PDNS,之间具有一定的相关性。,4,、猪呼吸道复合症（,PRDC,）,猪呼吸道复合症是一种严重危害生长、育肥猪的疾病，该病主要发生于,6,22,周龄的猪。,临床症状：生长缓慢；饲料报酬降低；嗜睡、厌食、发热、咳嗽，以及呼吸困难。,亚健康状态，应激或天气变化反应明显，治疗机会增大。,5,、相关繁殖障碍,母猪的表现,繁殖障碍,引起后备母猪和母猪的临床症状，后备母猪和母猪食欲下降,偶尔发生流产主要引起死胎和木乃伊胎,现在，很多情况下不表现明显的流产,胎盘感染,母猪和后备母猪不表现临床症状,新生弱仔带毒,易与其它疾病混淆,猪细小病毒,猪蓝耳病毒,猪流感,乙型脑炎,6,、肠炎,54,六、病理变化,肾脏百色结节,脾脏坏死,腹股沟淋巴结肿大,七、圆环病毒病,-,发病模式,急性感染,哺乳仔猪感染,保育仔猪感染,育肥仔猪感染,全群爆发感染,圆环病毒隐形感染,-,模型,1,隐形感染,种猪群,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,保育,6,5w,6w,7w,8w,9w,空栏,哺乳,1,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,0w,1w,2w,3w,4w,哺乳,2,哺乳,3,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,3,育肥区,多见于管理和设施好的猪场,其他病原控制较好，应激因素少,血清学检测，随着年龄增长阳性率升高，但整个猪群各阶段阳性率均在,50%,以下。,病原学分离率低，抗原含量也低，在,10,5,以下。,通过管理措施控制，不需要免疫控制,圆环病毒感染,-,模型,2,哺乳期感染,种猪群,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,保育,6,5w,6w,7w,8w,9w,空栏,哺乳,1,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,0w,1w,2w,3w,4w,哺乳,2,哺乳,3,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,3,育肥区,示例,2010-8-11,广西猪场基本情况,基本情况：,老长扩建，相距,300,米。,以前比较稳定，近段出现个别母猪流产。,哺乳仔猪出现不稳定。,实例：,2010-8-11,广西武宣县送样,继发的细菌感染,临床表现,2,猪群存在免疫抑制性疾病，（主要是蓝耳病病毒活跃或注射蓝耳病弱毒苗,).-,激发圆环病毒也活跃,哺乳仔猪蓝耳病感染也明显，圆环病毒分离率高，但病毒含量通常处于,10,5,以下。,继发感染严重，抗生素治疗效果差，死亡率高。,圆环病毒血清学检测哺乳仔猪阴性，保育猪阳性率升高，消瘦比例大，生长不良；育肥猪血清学阳性率,60%,以上,母猪群添加两个周替米考星逐步使蓝耳病稳定下来（使用本厂特制蓝耳病毒苗加速蓝耳病毒稳定），需要对母猪群强化圆环苗免疫，在此基础上处理有母源抗体保护的仔猪,圆环病毒感染,-,模型,3,保育临床感染,种猪群,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,保育,6,5w,6w,7w,8w,9w,空栏,哺乳,1,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,0w,1w,2w,3w,4w,哺乳,2,哺乳,3,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,3,育肥区,2010-9-29,天津送样,-,基本情况：,1200,头母猪种猪场,主要发病阶段在断奶后,35,40,日龄，发病率在,30%,左右，死亡率在,10%,。,蓝耳病免疫，母猪用蓝耳病灭活疫苗免疫，仔猪,15,日龄左右注射海利的弱毒苗。,母猪群及其他阶段猪群表现正常。,本次采样是发病,7,天左右,40-45,日龄的仔猪全肺。,实例：,2010-9-20,送样,多伴随蓝耳病毒活跃，破坏免疫系统的基础上感染逐步加重，,一般,6,周龄多发，也有部分推迟到,8,10,周龄。,临床表现为,PMWS.,发病和死亡,8,50%,。,抗原分离阳性率高，但只有部分达到强阳性，取样时可同时病程稍长消瘦猪。,母猪群特制蓝耳苗处理，强化蓝耳苗苗免疫和圆环苗,保育舍采取部分清群方案。,-,多点式生产。,圆环病毒感染,-,模型,3,保育亚临床感染,-,育肥早期感染出现。,种猪群,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,保育,6,5w,6w,7w,8w,9w,空栏,哺乳,1,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,0w,1w,2w,3w,4w,哺乳,2,哺乳,3,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,3,育肥区,实例：河南,2009-12-18,送样,一些管理较好的规模化场，哺乳舍和保育舍严格的全进全出。,蓝耳病感染程度也轻微或毒株毒力弱。,进入育肥舍与保育舍条件差别大，转群应激等因素。死亡率,10,15%,。,检测蓝耳病病原有一定分离率，部分圆环病毒强阳性。采样,-,处理意见。强化圆环病毒苗的免疫，同时找到相关病原和环境因素。,圆环病毒感染,-,模型,5,全群爆发前，隐形地感染状态,-,急性爆发,种猪群,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,保育,6,5w,6w,7w,8w,9w,空栏,哺乳,1,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,0w,1w,2w,3w,4w,哺乳,2,哺乳,3,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,2,哺乳,3,哺乳,2,保育,1,保育,2,保育,3,保育,4,保育,5,哺乳,4,哺乳,5,哺乳,6,哺乳,3,育肥区,实例：,2010-9-18,采样,-,基本情况,该场,2009-8-16,日引进第一批种猪，到,2010-2-14,先后共引进种猪四批次，母猪群注射勃林格公司蓝耳病弱毒苗，每年普防三此，最后一次普防在,2010-6-25,。仔猪不注射蓝耳苗,伪狂犬疫苗母猪普防勃林格伪狂犬弱毒苗，每年普防三次，最后一次普防在,2010-7-25.,2010-8-28,之前生产成绩很好，保育成活率接近,100%,，,8,月,28,日育肥舍开始发病，,9,月,10,日后出现神经症状，表现神经症状突然发生，抽搐，神经症状占发病比例,50,60%,，死亡快，体温,41,左右，随后保育仔猪发病，开始注射勃林格蓝耳病疫苗，注射后,2,3,天发病。母猪个别出现流产，流产一胎猪比例大一些，母猪产前厌食和不食较多，产出死胎和弱仔，个别单元产死胎和弱仔比例达,20-25%,。,根据发病特点和临床表现，重点定量分离蓝耳病病毒和圆环病病毒，兼顾,PCR,检测疑是的伪狂犬病毒，附带,PCR,检测猪瘟病毒。同时对细菌全面分离和药敏实验。,确定采样方案，因大部分发病仔猪注射过蓝耳病弱毒苗，故选用没注射蓝耳病弱毒苗挑出,30,日龄的弱猪，编号为,1-1,、,1-2,、,1-3,定量检测蓝耳病毒；因圆环病毒在体内增值较慢，感染后,20,多天组织中的病毒才能达到较高的水平，故选用病程较长有消瘦表现的,100,日龄育肥猪，编号为,3-1,、,3-2,、,3-3,用于定量分离圆环病毒；选三头发病比例最多典型病例（,2-3,是一头已死亡猪没做检测）编号为,2-1,、,2-2,、,2-3,用于,PCR,检测猪瘟和伪狂犬。,九头采样猪剖检最明显的症状是间质性肺炎和纤维素性心包炎、胸腔炎及多发性关节炎，一头打开颅腔，脑部水肿，并没有明显的伪狂犬症状和猪瘟症状，腹股沟淋巴结肿大明显，临床上有明显的呕吐症状。初步诊断蓝耳病和圆环病毒感染，继发严重的副猪嗜血杆菌，神经症状主要有副猪嗜血杆菌引起。,多见于新建厂,多伴随蓝耳病的爆发,病程长，损失大，死亡率高，高热病表现,发病期间建议根据药敏实验防继发感染和维持疗法。,做好较长治疗期的用药准备，,康复后做好母猪群的封群和驯化处理，并使用特制蓝耳苗和圆环苗免疫，稳定以后的生产,长期威胁猪群健康。,垂直感染越来越突出。,免疫抑制对整个防病体系影响严重。,免疫是必需的和必要控制措施。,管理、硬件设施和营养提出更高的要求。,PCV2,对未来养猪生产的影响,水性佐剂：,勃林格,油性佐剂：,梅里亚、哈兽研、普莱柯、大北农、,成都天邦、科前、海利,、,南农高科,八、免疫和疫苗的选择,国内市场现有产品,目前国产圆环病毒苗现状,目前国内圆环病毒苗仍然是全病毒苗为主。,圆环病毒苗最大技术瓶颈,-,病毒培养滴度不高。,质量控制上,-,批次间不稳定。,全病毒苗的缺陷。,抗原含量达不到较高的水平。,培养中使用血清，血清残留副反应大。,圆环病毒抵抗力强，灭活不全的风险存在。,武汉中博,猪圆环病毒疫苗,中博圆环疫苗的优势,中美技术合作，微载体无血清悬浮培养，质量稳定,抗原含量高，免疫原性好，进口佐剂，无应激,可与喘泰克混注，协同效应明显,产品性价比高,毒株,佐剂,灭活剂,抗原含量,接种方案,WH,株,进口复乳佐剂,BEI,10,7.0,、,10,8.0,所有猪只均可,PCV2b,基因型，国内主要流行毒株,具有缓释及抗原递呈作用、通针性好,抗原结构完整,微载体悬浮培养，无血清，纯度高,只需一次免疫，操作便捷,中博圆环疫苗的特征,进口细胞在微载体上生长：悬浮培养,3h,24h,96h,细胞生长密度可达,110,7,cells/ml,病毒培养滴度可达,110,8,TCID,50,-IFA,一次培养产能相当于,600,个转瓶培养的产量、疫苗批间质量稳定,全自动化操作，减少人为误差及劳动强度,抗原处理设备,进口,Millipore,超滤浓缩纯化系统,抗原含量,10,8.0,TCID,50,/ml,纯化后的,VLPs,（,Cap,蛋白）,BEI,(,二乙烯亚胺,),灭活,快速彻底灭活，不损害免疫原性,严格灭活验证，确保疫苗安全,严格的分析化学检测，确保,BEI,无残留,BEI,灭活剂,不同佐剂的免疫效果比较,分组,猪号,免前,OD,免疫,1,周,免疫,2,周,免疫,3,周,免疫,4,周,猪号,进口复合佐剂,16,0.288,0.239,0.228,0.195,0.755,16,55,0.14,0.139,0.136,1.373,2.254,55,61,0.162,0.134,0.165,1.961,2.413,61,68,0.221,0.142,0.152,0.351,1.243,68,71,0.22,0.145,0.176,0.319,1.022,71,铝胶,42,0.126,0.09,0.114,0.285,0.452,42,47,0.131,0.095,0.113,0.724,0.948,47,57,0.229,0.188,0.188,0.633,1.149,57,64,0.243,0.26,0.261,0.263,0.177,64,72,0.186,0.141,0.143,0.214,0.715,72,白油,5,0.139,0.094,0.136,1.587,2.381,5,7,0.092,0.082,0.234,1.776,2.269,7,13,0.282,0.204,0.197,0.155,0.539,13,38,0.121,0.112,0.137,1.801,2.372,38,49,0.152,0.097,0.11,1.397,2.346,49,空白对照,10,0.094,0.073,0.081,0.075,0.085,10,15,0.233,0.193,0.157,0.087,0.18,15,18,0.276,0.216,0.219,0.166,0.136,18,24,0.251,0.179,0.208,0.171,0.153,24,41,0.156,0.084,0.09,0.155,0.085,41,Elisa+,对照,2.251,2.321,2.259,2.356,2.372,Elisa-,对照,0.062,0.067,0.061,0.066,0.081,进口复乳佐剂,1,、进口复乳佐剂、无免疫应激反应、缓释效果好、抗体持续时间长,2,、无胶冻现象、通针性良好,3,、快速诱导机体免疫反应、免疫持续期长,免疫效果分析（产品对比）,猪号,平均日增重,免前抗体,免后,1,周,免后,2,周,免后,3,周,免后,4,周,Chopper,圆环,高端苗,（圆环力康）,28,0.507,0.15,0.08,1.491,1.848,2.412,32,0.071,0.062,0.128,1.254,2.034,44,0.095,0.062,0.342,1.778,2.407,47,0.101,0.078,0.336,1.564,2.294,48,0.099,0.083,0.097,0.284,1.809,68,0.121,0.074,0.08,0.982,2.116,Chopper,圆环,浓缩苗,25,0.496,0.089,0.064,0.067,0.130,2.069,39,0.107,0.099,0.077,0.111,0.924,41,0.093,0.077,0.076,0.12,0.598,60,0.172,0.091,0.08,0.36,1.200,67,0.111,0.071,0.204,0.975,2.004,77,0.197,0.087,0.172,0.312,1.001,某国产苗,19,0.467,0.111,0.067,0.074,0.075,0.413,33,0.103,0.076,0.064,0.082,0.645,42,0.109,0.062,0.074,0.116,0.758,61,0.117,0.071,0.076,0.099,1.404,65,0.133,0.091,0.103,0.247,1.256,工艺过程及关健质控点,病毒含量检测,病毒含量检测：,IPMA-TCID,50,、,IFA-TCID,50,ELISA,：以标准品为内控、指导疫苗配制,IFA,IPMA,ELISA,97,支原体检测,-,荧光染色法,支原体污染,无支原体污染,98,外源病毒检测,PCV1,PPV,PRV,HCV,JEV,PRRSV,TGEV,PEDV,99,PCV-2,的防控,参考免疫程序,后备：,配种前,5,周首免，配种前,3,周二免，,2ml/,次,种猪：建议每年,3,4,次普防或跟胎免疫（,产后两周免疫,2ml,）,仔猪,母猪免过圆环苗，母源抗体可以保护到,5,周,龄，小猪可以在,2,周龄接种。,两周龄免疫,2ml,或首免,1ml,间隔两周二免,1ml,；混注：支（双针型）,1ml,、圆,1ml,二合一首免，间隔,2-3,周二免。,中博：,喘泰克,+,圆环,最佳组合免疫,市场现有产品免疫成本约,10-28.9,元,/,头；,平均死亡率降低,8,个百分点，最高,15,个百分点；,平均提早出栏时间：,7,天；,综合用药量减少,70%,左右；,投入回报比高于,1:9,；,每头猪综合经济效益达,150,元以上。,经济效益分析,八、使用中常见的问题,-,兽医不好当，免疫程序没问题？,免疫程序没问题。,仅作参考。,我们该怎么做？,示例,1-2010,年,11,月,18,日湖北恩施,基本情况,母猪群体：,700,头，种猪来源湖北鄂美,PIC,场。,母猪前一段部分流产，一胎母猪占比例稍大一些，,现在哺乳仔猪在,20,天以后个别窝开始发病，发热、精神差、食欲下降、消瘦。,仔猪断奶后拉稀和呼吸道疾病，发病率达,50%,。,育肥猪生长发育不好，整齐度差，,20%,左右的弱小猪，主要是保育舍疾病损失的延续。,使用普莱柯和南农圆环苗免疫，越免越差，也试用进口圆环苗，越免死亡率越高。,2010,年,11,月,18,日，送了,4,份病料，,4,份血样，马总要求检测蓝耳、圆环、猪瘟抗原、伪狂犬抗原，细菌全套及药敏实验，,分析原因,母猪群感染严重，垂直感染仔猪。,仔猪胎儿期感染，初生带毒状态。,这样的猪群，尽量减少仔猪的免疫。,强化仔猪的抗生素保健和哺乳舍环境条件改善。,最终解决问题,-,从母猪群开始。,该场我们申请了,2000,头份圆环病毒试验苗赠送，用于母猪群免疫，最终猪群改善，生产恢复。,如何检测胎盘胎儿是否感染,选取,20,个不同的仔猪血清,初乳前检测,出生时检测。采集颈静脉血。注意：一定是初乳前的血液。,检测猪圆环病毒抗体,PCR,检测病毒：将每,4,份血液混成,1,份，,20,份样缩减为,5,份。,如果检测阳性则采更多的血来检测,妊娠后期（,70,天后）仔猪可产生主动免疫,，,仔猪产生抗体,，,仔猪出生后带有抗体,免疫母猪,（在仔猪免疫的情况下）,免疫母猪的好处,提高母猪和后备母猪的抗体水平,减少母猪和后备母猪的病毒血症,减轻蓝耳病的感染压力和影响,减少死胎或弱仔,示例,2-,河南,500,母猪猪场,已有,15,年以上的历史，小规模场逐步扩建，设备和布局均受的一定的影响，舍间距离,3,5,米。目前存栏母猪,500,头左右。,2009,年,11,月下旬开始发病（去年也在入冬天气转冷时发病，时间大致与今年差不多）。,15,20,日龄发病，死亡率达,60%,以上，出现问题的已有五单元，损失仔猪,1500,多头仔猪。,表现为哺乳舍仔猪发热，打颤，发病后,7-8,天开始死亡，使用进口的头孢喝辉瑞的瑞可欣也没有太多的治疗效果。,母猪没出现流产和其他异常，仔猪保育期逐渐病愈恢复，,90,100,日龄后生长良好。,没垂直感染的猪群，哺乳仔猪能免疫吗？,蓝耳病感染的类流感症状,不健康的猪群，不能免疫,-,怎么办,采血猪的选择要求。,根据本场疾病种类，和该病的流行特点，选择有针对性病原感染的康复猪只，一般选择无价值的淘汰母猪，康复时间根据病的种类有差别，一般康复,30,天左右最好。（也可用本场病原人工控制感染复制采血猪）。,采血猪只健康状况良好，没有其他病原（目标病原以外的病原）明显感染，并完全康复一定时间。,自家血清制备,采血：达到放血完全，应选择前腔动脉或静脉放血，注意放血部位的消毒和器具的消毒。,析出血清，采用静置自然析出方法，将析出的血清收集到经消毒的生理盐水瓶内，一般装到生理盐水瓶容量的三分之二，为了更完全的分离血清，过夜后还会有血清析出，继续收集。,自家血清制备,杀灭病毒的处理：将收集好的血清，瓶口向上放入水浴锅,56,水浴,2,小时，病毒经高温后失活，而在该温度时，抗体效价不下降。,杀灭细菌，每毫升加,2000,单位的链霉素和,2000,单位的青霉素，充分摇均，封口即可使用。,自家血清制备和使用,存放，不立即使用时，应冷冻保存,使用：为提高效果，建议在发病早期使用，用量，,1,2ml/5,公斤体重，,1,次,/,天，连用三天，个别严重的可增加注射次数，用血清治疗的同时，应配合抗生素治疗。,注意事项，分装时，应根据一次使用量分装，避免反复冻融，引起效价下降。,示例,3-,免疫时间推迟,一、基本情况。,300,母猪群，,2011.2.28,2000,年建场，,10,年场龄，以前情况很好。,2010-3,月份引进后备猪，,2010-10,发生口蹄疫。没有大的疫情。,2010-10,开始出现出现明显的疫情。主要表现在，母猪产仔正常，仔猪,20,日龄左右开始发病，发热、被毛粗乱、耳朵和腹下发紫，病程,2,3,天死亡，死亡时不消瘦，死亡率达,80%,以上。,存留下来的个别仔猪，断奶后体质较差，保育期有,10%,的死亡率。,前一段保育猪打自家组织苗有一定效果，,后改用勃林格的圆环病毒苗，,打苗后发病,母猪免疫程序：猪瘟、丹毒,+,肺疫二联、蓝耳病灭活苗（政府发放）普防,2,次,/,年。乙脑春季普防一次。口蹄疫普免,+,产前免。母猪产前辉瑞的大肠杆菌苗,仔猪免疫程序：猪瘟,超免、,20,日龄二免、,50,60,日龄三免。蓝耳灭活苗（政府苗）,-10,日龄免疫一次。口蹄疫苗,20,日龄免疫。,2010-10,月份使用韩国的圆环病毒疫苗免疫后出现猪群发病，随后波及整个猪群。,病料采集情况：,1,、,4,、,5,、,6,是保育,50,日龄仔猪，病程,10,15,天；,2,、,3,是,20,日龄哺乳仔猪，病程,2-3,天。,总结：,由于猪群健康状态不好，哺乳期就有蓝耳病毒感染。,保育期蓝耳病毒和圆环协同感染，处于亚临床状态。,免疫应在感染点，提前,28,天免疫。,35,日龄以后免疫，风险增大。,隐性感染状态免疫风险,示例,4-,免疫了,-,出现斑疹,区别,传染能力和发病率。,早期表现。,体温变化上。,晚期表现,总结：影响圆环苗免疫效果的因素,蓝耳病毒比较活跃的猪群,-,包括普免蓝耳病弱毒疫苗的疫苗毒。,保育舍不能全进全出，病原循环严重的猪群。,发酵床结构的猪舍，圆环病毒感染压力大。,保育舍保温条件差或密度较大。,品种差异：地方品种对圆环病毒更易感。,九、圆环苗使用效果评价,（一）、圆环病毒感染模型,PCV2,PCV2,淋巴凋亡,+,组织感染,PCV2,临床发病,死亡,亚临床状态,周围淋巴组织感染,低病毒血症,血清学转阳,感染清除,病毒猪全身扩散,高病毒血症,+,白血球减少,血清学转阳,（二）、评价蓝耳和圆环病毒效果的采样,平时检测采样选有临床症状的猪仍可以检出高的病毒感染。,血样检测量大，病毒血症结束猪仍在排毒，仅血液检测，很好评价。,那种采样，均需要定量,PCR,检测。,棉绳，吸水性好,采样需要,20-30,分钟，,4,毫升最佳。,每栋舍采样,2-3,份。,唾液样本采集过程,唾液样本采集过程,（三）、圆环病毒使用效果评价,-,案例,成活率对比：,武汉中博混合免疫组合,97.59%,勃林格圆环,+,冨道支原体,97.21%,BI92.39%.,试验期单头增重和日增重对比：,单头增重：,B+F,24.67,中博混合免疫,21.43,BI,18.33,试验期日增重：,B+F,446.44,中博混合免疫,418.72,BI,365.37,试验期整体评价。,保育,14,（中博），猪群健康状况最好,。,疫苗投入：,ZB,23,元,/,头,BI,33,元,/,头,B+F,33.3,元,/,头,混合免疫：节省劳动成本，减少猪的应激。,效益分析,校正后数据,