人工制备抗体.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,多克隆抗体,单克隆抗体,基因工程抗体,人工抗体主要包括：,一、多克隆抗体,概念：以相应抗原免疫动物获得抗血清，通过接种动物所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物，简称多抗。,单抗制备过,程示意图,单克隆抗体的特点：,高特异性,高均质性,单克隆抗体的应用：,1,、在血清学技术方面,2,、在免疫学基础研究方面,3,、在抗原纯化方面,4,、在肿瘤治疗方面，如生物导弹,5,、用于制备抗独特型抗体疫苗。,三、基因工程抗体,概念：又称重组抗体，利用基因工程技术制备抗体分子，这是分子水平的抗体。,基因工程抗体的优势：,去除或减少无关结构，保留,或增加天然抗体特异性和生,物学活性。,基因工程抗体包括：,（一）改造鼠源性抗体,（二）噬菌体抗体,（三）胞内抗体,（一）改造鼠源性抗体,1.,人,-,鼠嵌合抗体,2.,改型抗体或人源化抗体,3.,小分子抗体,1.,人,-,鼠嵌合抗体,是指在同,一抗体分子,中含有不同,种属来源抗,体分子片段,的抗体。,人,-,鼠嵌合抗体的特点：,1.,保留了鼠源单抗的特异性和亲和力；,2.,其人源,Fc,段能有效介导生物学效应功能；,3.,能自由地选择抗体，并有效地利用不同的生物学特点及理化特性；,4.,可以容许插入不同的鼠单克隆抗体的可变区，缩短操作和研制周期；操作相对简单。,2.,改型抗体或人源化抗体,概念：指利用基因工程技术，将鼠单抗,V,区中互补性决定区（,CDR,）序列取代人源抗体,CDR,序列，重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持人抗体亲和力的,CDR,移植抗体。,改型抗体或人源化抗体的特点：,保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。,3.,小分子抗体,概念：是指由,Fab,和,Fv,组成的抗体片段。,小分子抗体的优点：,a.,仅含,V,区结构，免疫原性较弱，,b.,分子量小，易透过血管壁，可有效克服肿瘤灶组织对抗体的生理阻抗，,c.,无,Fc,段，不与非靶细胞的,FcR,结合，易渗透至病灶局部，,d.,有利于作为导向药物的载体。,小分子抗体的局限性：,与靶细胞表面抗原的结合力较弱，半寿期短，易从血液中被清除，从而影响到达肿瘤局部的抗体浓度。,小分子抗体的类型：,（,1,）,Fcb,片段，,（,2,）单域抗体，,（,3,）,Fv,片段，,（,4,）单链抗体（,ScFc,），,（,5,）最小识别单位（,MRU,），,（,6,）双价小分子抗体（,diabody,），,（,7,）双特异性小分子抗体，,（,8,）微抗体（,minibody,）。,（二）噬菌体抗体,概念：是将克隆的人抗体,V,区基因与一种丝状噬菌体,DNA,上的基因,或基因,精确连接，转染细菌后在其膜表面表达,Fab,段,-,噬菌体外壳蛋白的融合蛋白。,噬菌体抗体的优点：,（,1,）无须免疫，可直接从非免疫动物抗体库中筛选出特异性抗体，,（,2,）可供产生针对多种特异性抗原的人源抗体，以克服难以建立的人,-,人杂交瘤的困难，,（,3,）细菌增殖快，培养成本低，适合大规模生产，为临床上大量应用抗体提供了可能性。,（三）胞内抗体,概念：指借助基因工程手段，获得仅在细胞内表达并仅作用于胞内靶分子的抗体或其片段，多为,ScFc,。,胞内抗体的特点：,可特异性作用于胞内靶分子，从而发挥特定的生物学效应。,Thank you,！,