实验二-部分清热药的体外抗菌实验.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,学习要求,通过平板打孔法，,(1).,学习体外抑菌实验的基本操作，,(2).,了解部分清热药和大蒜的抑菌作用。,背景介绍,-1,药物的体外抑菌试验是为了检查药物的抑菌能力。该项试验方法已广泛应用于,新药研究,和,指导临床用药,。如抗菌药物的筛选，提取过程的生物追踪、抗菌谱的测定、耐药谱的测定、药敏试验、药物血浓度测定等各个方面。,背景介绍,-1,系列稀释法,琼脂扩散法,液体培养基系列稀释法,固体培养基系列稀释法,测定药物的最小抑菌浓度（,MIC,）,背景介绍,-1,系列稀释法,琼脂扩散法,液体培养基系列稀释法,固体培养基系列稀释法,测定药物的最小抑菌浓度（,MIC,）,滤纸片法,打孔法,挖沟法,管碟法,背景介绍,-1,系列稀释法,琼脂扩散法,液体培养基系列稀释法,固体培养基系列稀释法,测定药物的最小抑菌浓度（,MIC,）,滤纸片法,打孔法,挖沟法,管碟法,：,测试药物对不同种细菌的抑制,背景介绍,-1,系列稀释法,琼脂扩散法,液体培养基系列稀释法,固体培养基系列稀释法,测定药物的最小抑菌浓度（,MIC,）,滤纸片法,打孔法,挖沟法,管碟法,背景介绍,-2,清热药,指药性寒凉，以清解里热为主要作用的中药。,清热泻火药,清热燥湿药,清热解暑药,清热凉血药,清热解毒药,清虚热药,知母,黄连,黄芩,黄柏,金银花,荷叶,地黄,青蒿,连翘,背景介绍,-3,大蒜,为百合科葱属植物蒜,Allium sativum,L.,的鳞茎。人工栽培。具有解毒消肿，杀虫，止痢之功效。常用于痈肿疮疡，疥癣，肺痨，顿咳，泄泻，痢疾。,蒜氨酸,大蒜酶,大蒜素,及其 他 含 硫 化 合 物,挥发性,实验操作,一、部分清热药的抗菌实验,观并测量抑菌圈直径（明天,12:15,）,琼脂平板,（塑料）,100,L,大肠杆菌悬液，“,L,”棒涂匀,均匀打,5,个孔，,火焰稍加热封底,标记,中药药液 加满孔,灭菌水 加满孔,37,培养,24h,（,206,房间）,黄连、黄芩、黄柏、连翘、灭菌水,二、挥发性成分的抗菌实验,2.,皿盖中央放倒置无菌青霉素盖，石蜡固定，无菌镊移 取少量大蒜泥填满青霉素瓶盖凹陷；,1.,取一琼脂平板（玻璃），,100,L,大肠杆菌悬液，“,L,”棒涂匀；,3.,将琼脂培养皿倒置于盛有大蒜泥的培养皿盖上，切勿接触青霉素盖。放入,37,培养,24h,，观察并测量抑菌圈的直径；（明天,12:15,）,4.,同上操作，取无菌生理盐水加入青霉素盖凹陷内作为对照组。,大蒜、灭菌水,注意事项,1,、全班,4,组，每组出,4,位同学各做一块板；,2,、所有试验所用菌液、接触菌液的枪头、培养基均应收集到,75%,乙醇烧杯中，最后集中灭菌处理；,3,、操作靠近酒精灯火焰范围；接菌时平板盖不要完全敞开，避免空气中杂菌污染；,4,、涂布时，要等涂布棒稍冷再涂布，涂布要均匀；吸取细菌时，要将菌液摇匀。,5,、打孔加药时不要使供药液溢出孔。加药后，用记号笔在平板底部做标记，不能标在平板盖上；,6,、打孔法和倒牛津杯法培养时培养皿放置方向不一致。,