生化试剂产品及临床意义介绍.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,产品介绍,售后服务部 200,7-01,产品分类：1、临床化学检验试剂,生化全系列,2、临床化学检验仪器,蓝宝石600全自动生化分析仪 （,Sapphire 600-Audit Diagnostics）,国内临床生化试剂最齐全之一,含已注册和正在申报中：,已注册,ALT,AST,ALP,GGT,CHE,AFU(,试,),TBA-I,TBA-V,TP,ALB,TBIL,DBIL,PA,ADA (,试,),CR-,苦,CR-,酶,BUN,UA,B2-MG(,试,),GLU-HK,GLU-OX,GSP,AMY,TG,TCH,HDL-C,LDL-C,APOA1,APOB,LPa,CK,CKMB,LDH,HBDH,Ca,Mg,P,Cu(,试,),Zn,Fe,CO2,ASO(,试,),CRP(,试,),RF (,试,),申报中,5-NT,GPDA,AFP,NAG,CSF,CYS-C,MALB,HbA1c,D3-H,ACE,LDH1,C3,C4,IgA,IgG,IgM,TRF,生化试剂分类：,酶类：,AMY，CK，CK-MB，HBDH，LDH，LDH1，ALT，AST，ALP，GGT，AFU，CHE，5-NT，ADA，NAG，ACE，GPDA,基质类：,TP，ALB，GLU，GSP，TBIL，DBIL，UA，BUN，CR，TBA,1,5-AG，D3-H，CSF，CYS-C，TRP，,血脂类：,TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）,电解质：,Ca，Mg，P，Cl，Cu，Fe，Zn，CO2,免疫类：,ASO，RF，CRP，B2-MG，HBA1C，C3，C4，IgA，IgG，IgM，PA，MALB，AFP,生化试剂临床应用,肝功能,TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT;TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5-NT,GPDA,PA,肾功能,UA,BUN,CR,B2-MG,NAG，mALB,UP,CSF,CYC,心肌酶谱,LDH-L，HBDH，CK，CK-MB,LDH1,血脂,TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）,风湿三项,ASO,RF,CRP,血糖,GLU,GSP,HBA1C,1,5-AG,D3-H,心血管,HS-CRP，ACE,电解质,CA，MG，P，CL，CU，FE，ZN，CO2,胰腺,AMY,其他,C3,C4,IgA,IgG,IgM,肝胆疾病的生物化学检测,蛋白质代谢功能检查,肝脏是蛋白质代谢的主要的器官，许多蛋白质如白蛋白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等都由肝细胞合成，当肝细胞受损时，合成上述蛋白的功能降低，蛋白质的合成量就减少；,-,球蛋白虽然不是肝细胞合成，但当肝实质细胞受损，间质细胞增生时，球蛋白的生成增加；,因此，在肝脏疾病时，可表现出血液中蛋白质质和量的改变；,其主要表现为白蛋白减少，纤维蛋白原减少，球蛋白的增多等；,因此，测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化，可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。,1.总蛋白、白蛋白的检测,总蛋白的检测,双缩脲法,蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，二价铜离子在碱性溶液中与蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物，在540,nm,有吸收峰，并与蛋白含量 成正比。,蛋白+,Cu,2+,Cu,蛋白络合物（紫红色）,白蛋白的检测,溴甲酚绿终点法,血清中白蛋白与溴甲酚绿（,BCG,）在,pH4.15,环境中结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，在6,00nm,有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，从而测出白蛋白含量。,白蛋白+溴甲酚绿,白蛋白,-BCG,复合物,与溴甲酚紫法的比较,溴甲酚绿法操作简单、快速，既可手工操作，也能自动化分析，是目前国内最常用方法。,溴甲酚绿法除与白蛋白结合外，还与部分球蛋白结合，对血清白蛋白特异性较溴甲酚紫法稍差,溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度,临床意义,血清总蛋白与白蛋白升高,急性失水、肾上腺皮质功能亢进,血清总蛋白与白蛋白降低,肝细胞损害合成减少：肝炎、肝硬化、肝癌,总蛋白60,g/L,白蛋白25,g/L，,低蛋白血症,营养不良：摄入不足,丢失过多：肾病、烧伤、大出血,消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤,血清总蛋白与白蛋白升高,TP80g/L（,高蛋白血症）,A 35g/L（,高球蛋白血症）,慢性肝病、,M,蛋白血症、自身免疫性疾病、慢性炎症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病,血清,TP,降低,生理性减少（,e.g.3y）、,免疫功能抑制、先天性低,TP,A/G,倒置,肝功能损伤、,M,蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、肝癌、多发性骨髓瘤,血清前白蛋白测定,免疫比浊法,标本中,PAB,与特异性抗体反应形成不溶性复合物，可在340,nm,测定该复合物的浊度，与同样处理的标准品比较，得出标本中,PAB,的含量。,临床意义,降低：见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝硬化、肝癌，,(,因为半衰期比,ALB,短，,PA,的变化远较,ALB,敏感,),，故对早期肝炎、急性重肝具有特殊诊断价值,升高：,Hodgkin,病（恶性淋巴瘤的一种独特类型,）,胆红素代谢检查,胆红素主要是在网状内皮系统中，由衰老,RBC,的血红蛋白分解后形成,生成后在血液中与白蛋白聚合，此时尚未与其它化合物结合，称为,非结合胆红素,（,间接胆红素,IBIL,或游离胆红素,）,非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与葡萄糖醛酸结合后 称为,结合胆红素,（,直接胆红素,DBIL,）,胆红素代谢检查,结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成,尿胆原,尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取，其中大部分又转变成胆红素随胆汁排入肠腔，形成“,肝肠循环,”,残留肠腔的尿胆原氧化后，以,粪胆素,排出,因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中胆红素增高，形成,黄疸。,总胆红素(,T-BIL),改良化学氧化法,总胆红素在表面活性剂存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定,450nm,处吸光度的减少与总胆红素的浓度成正比。,化学氧化剂,pH8.2,胆红素,胆绿素,表面活性剂,直接胆红素(,D-BIL),改良化学氧化法,直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定,450nm,处吸光度的减少与直接胆红素的浓度成正比。,化学氧化剂,pH3.0,胆红素,胆绿素,间胆抑制剂,与重氮盐法的比较,重氮法中的改良,J-G,法有较高的灵敏度、精密度和较宽的线性，但试剂无法长期稳定，溶血有负干扰，且叠氮钠作为防腐剂时能破坏偶氮试剂，导致呈色不完全；,改良化学氧化法与,J-G,法有很好的相关性（,R=0.994,）；抗溶血（,Hb,7.4,）；不受脂肪乳、,VitC,、肝素等干扰因素的影响；双试剂可以长期保持稳定,临床意义,增高：见于肝脏疾病，如原发性胆汁性肝硬化、急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黄疸、肝硬化；肝外疾病如溶血性黄疸、新生儿黄疸、胆石症、胰头癌、输血错误等也可见总胆红素也增高。,胆汁酸测定,酶循环法（第五代胆汁酸测定方法学）,胆汁酸被3,-羟基类固醇脱氢酶及,Thio-NAD,特异性地氧化，生成3-酮类固醇及,Thio-NADH，3-,酮类固醇在3,-羟基类固醇脱氢酶及,NADH,存在下，生成胆汁酸和,NAD,+,，,循环往复从而放大微量的胆汁酸量，测定生成的,Thio-NADH,的吸光度与标准比较，得出胆汁酸含量。,酶循环法测定反应式,Thio-NAD+Thio-NADH+H+,胆汁酸,3-,羟基类固醇脱氢酶,3-,酮类固醇,NAD+NADH+H+,临床意义,总胆汁酸升高,肝损害：肝炎、肝硬化、肝癌,胆道阻塞：胆管梗阻引起的胆汁淤积,小肠污浊综合症,与第一代胆汁酸测定试剂相比,成倍提高了测定灵敏度，克服了第一代酶比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问题。,同时由于灵敏度提高的原因，循环酶法试剂更加容易受到其他试剂中所含胆酸盐的交叉污染。应该在通道或者测定顺序设置上与那些试剂隔离开来。,血清酶学检查,肝脏是酶含量最丰富的器官，肝细胞损伤时，许多酶如,ALT、AST、GGT、ALP,释放入血，导致血浆酶水平升高,1.,肝脏疾病时酶活力改变的机制,酶合成异常,肝细胞释放增加,2.,对肝脏疾病诊断意义的分类,反映肝细胞病变和坏死的酶（,ALT,，,AST,）,反映肝、胆淤滞的酶,反映肝纤维化的酶,反映肝细胞合成功能的酶（,CHE,）,反映肝细胞病变和坏死的酶,谷氨酸氨基转移酶（谷丙转氨酶，,ALT）,连续监测法,（,IFCC,）,ALT,催化,L-,丙氨酸的氨基转移，生成丙酮酸。丙酮酸与,NADH,在,LDH,的催化下反应生成乳酸和,NAD,+,。NADH,在340,nm,处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中,ALT,的活性成正比，在340,nm,处测定,NADH,下降速率，即可测出,ALT,活性。,天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶，,AST）,连续监测法（,IFCC,）,AST,催化,L-,天冬氨酸的氨基转移与,MDH,催化的反应偶联，使,NADH,氧化生成,NAD+。NADH,在340,nm,处有特异吸收峰，其被氧化的速率与血清中,AST,的活性成正比，在340,nm,处测定,NADH,下降速率，即可测出,AST,活性。,与赖氏法的比较,连续监测法多用于自动化生化分析仪，准确性好、精密度高。,赖氏法多用于手工操作，实验条件要求不高，便于基层医疗单位开展，但重复性差，准确性差。,临床意义,急性病毒肝炎,ALT：500-1000U/L,，并且,ASTALT,多见,一些药物或毒物所致升高：氯丙嗪、异烟肼、奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒,腺苷脱氨酶（,ADA,）,酶比色法,ADA,腺嘌呤核苷,+H,2,O,次黄嘌呤核苷,+NH,3,PN,次黄嘌呤核苷,+Pi,次黄嘌呤,+,磷酸核糖,XOD,次黄嘌呤,+2H,2,O+2O,2,2H,2,O,2,+,尿酸,POD,2H,2,O,2,+4-AAP+TOOS,醌化合物,在波长,546nm,处测定醌化合物生成速率，计算出,ADA,活力。,临床意义,类似,ALT,，对反映急性肝损害的残存病变和慢性肝损害比,ALT,为先，（并且,ADA,在鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上也有应用）,。,反映肝细胞合成功能的酶,胆碱酯酶（,CHE),硫代丁酰胆碱法硫代丁酰胆碱在胆碱酯酶的作用下生成丁酸和硫代胆碱，硫代胆碱再与,5,、,5,二硫代,-2-,硝基苯甲酸反应生成,5-,巯基,-2-,硝基苯甲酸，通过在,405nm,处测定,5-,巯基,-2-,硝基苯甲酸的增高速率，可以计算出胆碱酯酶的活力。,临床意义,CHE,活力降低：肝实质细胞损害,反映胆道梗阻的酶,碱性磷酸酶（,ALP）,的测定,连续监测法（,IFCC,）,无色的对-硝基苯磷酸二钠在,ALP,作用下，生成在405,nm,处有特异吸收峰的淡黄色对-硝基苯酚，通过测定在405,nm,处吸光度的变化速率计算,ALP,活性。,临床意义,肝胆系统疾病：阻塞性黄疸、急、慢性黄疸肝 炎、肝癌,黄疸的鉴别,骨骼疾病：纤维性骨炎、佝偻病、骨软化病、骨转移癌、骨折愈合期,生理性升高：生长期的儿童和青少年,-,谷氨酰转肽酶（,GGT）,连续监测法,-,谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺和双甘肽在,-,GT,作用下，生成对硝基苯胺及,-,谷氨酰双甘肽，所释放出的对硝基苯胺与,-,GT,活性成正比，通过在405,nm,处测定对硝基苯胺的变化，可求出,-,GT,活力。,临床意义,胆道阻塞性疾病,急、慢性病毒性肝炎、肝硬化,酒精性肝炎,其他：脂肪肝、胰腺炎、前列腺肿瘤,其它酶类,酶类肿瘤标志物检测,-,L-,岩藻糖苷酶（,AFU）,与原发性肝癌诊断标志（81.2%），与甲胎蛋白（,AFP,）联合检测可提高肝癌检出率,肝纤维化的酶学检查,单氨氧化酶,腺苷脱氨酶（,ADA,）,思考题,1.,肝损害蛋白检查的意义。,2.,血清酶学在肝胆疾病检查的意义。,名词解释,1.,结合胆红素,2.,非结合胆红素,肾脏疾病的生物化学检测,肾脏的生理功能,排泄水分、代谢产物、废物，保留有用物质,调节水分和渗透压,调节电解质及酸碱平衡,制造某些重要的生理活性物质,第一节 肾小球功能检查,肾小球滤过率（,GFR,）,是反映肾小球滤过功能的客观指标，用单位时间内两肾生成的超滤液量即原尿的生成量来表示,肾清除率,是指双肾于单位时间（,min,）内，能将多少毫升血浆所含的某物质全部清除，结果以,ml/min,或,L/24H,表示,肾清除率,肾清除率可分别测定肾小球滤过率、肾血流量、肾小管对各种物质的重吸收和分泌作用,全部由肾小球滤出，肾小管不吸收、不分泌，如菊粉：可作为肾小球滤过率测定的理想物质，能完全反映肾小球滤过率,由肾小球滤出，肾小管也排泌，如尿素、肌酐等：反映肾小球滤过率不如菊粉准确,全部由肾小球滤出，又被肾小管全部吸收，如葡萄糖，可作为肾小管最大吸收率的测定,除肾小球滤过外，大部分通过肾小管分泌排出，如对氨马尿酸等，可作为肾血流量的测定,1.,内生肌酐清除率（,Ccr,）,肌酐,为肌肉中磷酸肌酸的代谢产物，是反映肾小球的滤过功能的较好指标,原理,血浆肌酐种类：内源性和外源性,血浆肌酐的代谢：大部分从肾小球滤过，不被肾小管重吸收，且肾小管的排泌量很少,条件：在严格控制饮食和肌肉活动相对稳定的情况下，血浆肌酐的生成量和在尿中的排出量较恒定，其含量的变化主要受内源性肌酐的影响,内生肌酐清除率（,Ccr,）,：指肾单位时间内，清除多少毫升血浆中的内生肌酐,病人检查前的准备,病人连续进食低蛋白食物,3,天，每天蛋白质摄入量,40g,，禁食肉类,禁饮浓茶、咖啡，避免剧烈运动,标本采集,第四天早晨,8,时开始收集,24,小时尿液（加入甲苯防腐），当日内任何时间抽血,2ml,与尿液（测量尿液的总体积）同时送检,计算公式,每分钟肌酐清除率,=,尿肌酐浓度,每分钟尿量,/,血浆肌酐浓度（单位：,ml/min,）,正常参考值,80-120 ml/min,临床意义,判断肾小球损害的敏感指标，可较早判断肾小球损害,对肾功能的初步估价，可作为观察肾移植成功与否的客观指标，移植成功，该指标逐步回升，发生排斥，则下降,慢性肾炎临床分型的参考,对临床治疗的指导意义,药物使用的参考,2.,血尿素氮和血肌酐的测定,原理,血尿素氮（,BUN,）和血肌酐（,CREA,）主要经肾小球滤过而随尿液排出，在肾实质受损时，肾小球滤过率降低，导致,BUN,和,Scr,在血中的浓度增加。,参考值,BUN 1.47.1 mmol/L,CERA,男性,44 97,mol/L,女性,35 80,mol/L,尿素氮,(BUN/UREA),的测定,临床实验室常采用脲酶速率法、离子选择电极法等。,脲酶速率法,脲酶催化尿素水解产生,NH,3,和,CO,2,。在谷氨酸脱氢酶催化下，,NH,3,与,-,酮戊二酸和,NADH,反应生成,NAD,+,。,NADH,在,340nm,处有特异性吸收峰，通过测定,NADH,下降速率与同样处理的标准比较，得出尿素含量。,肌酐,(CREA),的测定,氧化酶比色法,肌肝,+H,2,O,肌酸,肌酸,+H,2,O,肌氨酸,+,尿素,肌氨酸,+H,2,O+O,2,氨基乙酸,+H,2,O,2,+HCHO,H,2,O,2,+,笨酚,+4-,氨基安替比林,醌 亚胺（红色）,4H,2,O,醌亚胺在,546nm,处有最大吸收峰，其吸光度值与,CREA,含量成正比。,与碱性苦味酸法（,Jaffe,法,）比较,氧化酶法测定血肌酐的特异性大大提高，可消除假肌酐如,VitC,、丙酮酸、丙酮、乙酰乙酸 等物质的正干扰。因此在测得值上会较,Jaffe,法偏低（参考值应作相应调整）。氧化酶法试剂同时还能抗胆红素和半胱氨酸等,Jaffe,法的抑制物。,酶法试剂也克服了苦味酸法中色素对自动生化分析仪比色杯和管路的污染，适合于临床自动化分析仪使用,。,与,Jaffe,法相比，酶法试剂的开盖稳定性也大大提高。避免了频繁地定标操作。,临床意义,各种严重肾脏疾病引起肾功能不全时可增高；,上消化道出血、严重感染和饮食中蛋白质过多，也可导致,BUN,暂时升高；,由于血肌酐受其他影响较小，能反映患者肾功能情况，,CREA,明显升高，提示预后差。,3.,血尿酸（,UA,）的测定,原理,UA,是体内嘌呤代谢终产物，小部分经肝分解破坏，大部分经肾小球滤过，在近端肾小管中,98-100%,被重吸收，故正常情况下,UA,的清除率较低,尿酸酶法,尿酸酶催化,UA,氧化生成尿囊素和,H,2,O,2,，过氧化氢在过氧化物酶的存在下与笨酚、,4-,氨基安替比林氧化缩和成红色醌式化合物，在,546nm,处有最大吸收峰，其吸光度值与,UA,含量成正比。,临床意义,血液尿酸增高常见于肾脏疾病、痛风、子痫、白血病与肿瘤及其他疾病如慢性铅中毒引起的肾损害、长期禁食等,4.2-,微球蛋白,原理,2-M,在体内主要由淋巴细胞产生的一种小分子蛋白，正常人血中,2-M,浓度很低，可自由通过肾小球，然后在近端肾小管几乎被全部重吸收,免疫比浊法,2-MG,与特异性抗体反应形成不溶性复合物，可在,540nm,测定该复合物的浊度，与同样处理的标准品比较，得出血清中,2-MG,的含量。,临床意义,尿液,2-M,升高是反映近端小管受损的非常灵敏和特异的指标肾小球滤过功能下降时，血,2-M,水平升高,第二节肾小管功能试验,肾小管的功能较多，除了具有强大的重吸收水份与一些物质的能力外，还具有选择分泌和排泄一些物质的能力,目前为止没有理想的功能试验适用于临床,以尿液浓缩,-,稀释试验和酚红排泄试验作为肾小管的功能试验,近年来尿酶和自由水清除值等的测定使肾小管功能试验变得简单、灵敏、快速,1.,浓缩稀释试验,评价肾小管的重吸收功能,在日常或特定的饮食条件下，观察病人的尿量和尿比重的变化，用以判断肾浓缩与稀释功能的方法称为,浓缩稀释试验,（,concentration-dilution test,）,原理,肾脏调节水份和渗透压的功能决定机体的尿量和尿比重的变化。,当大量饮水后，远曲小管和集合管对水的吸收减少，排尿增多，比重降低，表示其稀释功能良好；,限制饮水后，对水的吸收增加，排尿减少，表示其浓缩功能良好。,在肾脏疾病时，由于远曲小管和集合管的损伤，对水的重吸收功能减退，其浓缩,-,稀释功能发生障碍,方法,莫氏（,Mosenthal),试验：病人正常饮食，日食三餐，每餐含水量不超过,500-600ml,，此外不再进食和饮水；注意饮食，其中要求水含量在,500-600ml,之间，早晨,8,时到晚上,8,时，每,2,小时收集一次，晚,8,时到次晨,8,时,12,小时全部收集在清洁的标本瓶中,正常参考值,24h,尿量,1000-2000 ml,昼夜尿量之比,3-4:1,12h,夜尿,0.009,临床意义,肾功能不全时，夜间尿量可超过,750ml,最高比重小于,1.018,表示肾浓缩功能不全,尿比重相差很小，比重固定在,1.010,左右，表示肾浓缩功能严重障碍,2.,尿渗量（渗透压）的测定,原理,液体的渗透压是由溶液中溶质的毫摩尔浓度决定的。尿液渗透压反映尿中物质的摩尔数。而与物质微粒的种类及性质无关，测定尿渗量比测定尿比重更好地反映肾浓缩和稀释能力,正常参考值,尿液为,600-1000mOsm/kgH,2,O,，平均,800mOsm/kgH,2,O,，,血浆平均值为,275-305 mOsm/kgH,2,O,尿渗量与血浆渗量比值为,34:1,3.,尿液酶的测定,尿液中含有数十种酶,血清酶进入尿液：当肾小球滤过增加而肾小管重吸收功能紊乱，血清酶进入尿液，活性增强,细胞酶释放入尿液：肾小球病变、肾小管细胞破坏，间质炎症等使细胞破坏，细胞酶释放入尿液使溶酶体酶增加,泌尿生殖系统肿瘤、炎症、红细胞、细菌等也可使尿酶增加,常见的测定酶,N-,乙酰,-,氨基葡萄糖（,NAG,）、,LDH,、,-,谷氨酰转移酶、溶菌酶,血清脂类的 生物化学检测,概述,血浆脂类包括游离胆固醇（,FC,）、胆固醇酯,(CE),、磷脂（,PL,）、甘油三酯（,TG,）、糖脂和游离脂肪酸（,FFA,）等,血浆中最多的脂质为胆固醇、,PL,和,TG,，,游离胆固醇和胆固醇酯称为总胆固醇,血浆脂类以脂蛋白复合体的形式存在,血浆脂蛋白分类：,CM,、,VLDL,、,IDL,、,LDL,、,HDL,和,Lp(a),1.,血清总胆固醇测定,TCH,酶比色法,胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下分解生成胆固醇，胆固醇在胆固醇氧化酶及过氧化物酶作用下最终生成醌亚胺，醌亚胺的颜色深浅与胆固醇的浓度成正比。,临床意义,胆固醇的监测用于评估罹患动脉硬化的风险以及对脂类,/,脂蛋白的代谢紊乱进行诊断和监测治疗。,增高见于糖尿病昏迷患者，还常见于原发性高胆固醇血症、动脉粥样硬化、肾病综合征、总胆管阻塞、粘液性水肿、肥大性骨关节炎、老年性白内障、牛皮癣等。,降低见于恶性贫血、溶血性贫血、甲状腺功能亢进、感染、营养不良、肝硬化、急性肝坏死等。,2.,甘油三脂,TG,磷酸甘油氧化酶法,甘油三脂在脂肪酶、甘油激酶等酶的作用下，生成,3-,磷酸甘油，再经磷酸甘油氧化酶（,GPO,）氧化生成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢与,4-,氨基安替比林在过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物。,546nm,下其显色程度与,TG,成正比。,临床意义,血中的甘油三酯以乳糜微粒和前,-,脂蛋白中含量最高，它与动脉粥样硬化的形成密切相关，甘油三酯的升高与冠心病的发生也有很大关系。,增高：脂肪肝、阻塞性黄疸、动脉粥样硬化、高脂血症等,降低：严重肝衰、甲状腺功能减退等,3.,高密度脂蛋白胆固醇（,HDL,）,一般通过,HDL-C,亚型含量间接反映,HDL,水平,化学修饰酶法,胆固醇酯酶,(CHER),和胆固醇氧化酶,(CHOD),经化学修饰后，对,LDL,、,VLDL,、乳糜微粒中的胆固醇反应性降低，仅对高密度脂蛋白中的胆固醇起作用。,临床意义,HDL-,胆固醇参与体内胆固醇酯逆转运，起到抗动脉粥样硬化作用，所以是冠心病的保护因子。,HDL-,胆固醇水平与,AS,性心、脑血管疾病发病率成负相关。,HDL-C:CHOL,能更好的预测心、脑动脉粥样硬化的危险性。,肝损害和肾病综合征时，,HDL-C,降低,4.,低密度脂蛋白胆固醇（,LDL,）,LDL,是血清中携带胆固醇的主要颗粒,LDL,向组织及细胞内运送胆固醇，直接促使动脉粥样硬化,选择性溶解法,试剂中添加仅使,LDL,溶解的表面活性剂，,LDL,之外的脂蛋白（,HDL,、,VLDL,、乳糜微粒）由于受表面活性剂和糖化合物的阻碍而不能参与反应，在反应液中以脂蛋白形式残存。,临床意义,低密度脂蛋白（,LDL,）从肝脏携带胆固醇到周围血管，特别是到心脏上的血管（医学上称冠状动脉），可造成过多的胆固醇在血管壁上存积，引起动脉粥样硬化。,LDL,水平升高与冠心病的发生呈正相关,5.,载脂蛋白,A1,Apo-A1,是,HDL,的主要载脂蛋白成分（,90%,）,Apo-A1,有清除组织内脂质和抗粥样动脉样硬化作用,临床意义,Apo-A1,血清水平与冠心病发病率负相关,6.,载脂蛋白,B,Apo-B,是,LDL,的主要载脂蛋白（,98%,）,是动脉粥样硬化的风险指标,临床意义,Apo-B,水平与动脉粥样硬化和冠心病正相关,胆汁淤积也可使血清,Apo-B,升高,载脂蛋白的测定方法,免疫透射比浊法,血清中载脂蛋白的与试剂中相应单克隆抗体相结合，形成抗原抗体复合物，产生混浊，其浊度的高低与血清中,APOA-1,成正比。,7.,脂蛋白,a Lp(a),免疫透射比浊法,人血清中,Lp(a),与试剂中相应的特异性单克隆抗体在适当的介质中，形成抗原,-,抗体复合物，产生一定的浊度，浊度的高低在足量抗体存在时与抗原的含量成正比。,临床意义：,Lp(a),动脉粥样硬化的独立危险因素。,风湿三项的,检测,1.,抗链球菌溶血素,O,（,ASO,）,免疫透射比浊法,将抗人抗链球菌溶血素,O,抗体包被在胶乳颗粒上，可与血清中的抗链球菌溶血素,O,产生凝集反应，产生一定的浊度，浊度的高低在足量抗体存在时与抗原的含量成正比。,临床意义,A.,对协助风湿热有一定价值。风湿热病人在感染后,4-6,周,60-80%,可见,ASO,增高,并伴有血沉增快及白细胞增多,;,若疑活动风湿,但,ASO,多次检查均在正常范围内则有助于排除该病。,B.,急性肾小球肾炎病人,ASO,也常有增高。,C.,确已感染溶血性链球菌,但,ASO,一直不见增高,可见于,1.,该溶血性链球菌不产生或很少产生 很少量,ASO.2,感染早期即应用大量糖皮质激素。,2.,类风湿因子,RF,免疫透射比浊法,将人,r-,球蛋白包被在胶乳颗粒上，可与血清中的类风湿因子产生凝集反应，该反应所产生的凝集成一定的浊度，浊度的高低在足量抗体存在时与抗原的含量成正比,。,临床意义,类风湿因子阳性是诊断类风湿性关节炎的重要依据，但有些正常人也可出现类风湿因子阳性，称为化验引起的假阳性。另外许多其他疾病也可出现类风湿因子阳性，如干燥综合症、系统性红斑狼疮、各种肝病、慢性支气管炎、肺气肿、梅毒、皮肌炎等。因此类风湿因子阳性不一定是类风湿性关节炎。诊断类风湿性关节炎要综合判断。类风湿因子滴度还可反应类风湿活动度，正常值,1,：,20,，大于它则为阳性，比值越大，活动度越高,3.C,反应蛋白,(CRP),免疫透射比浊法,将抗人,C,反应蛋白抗体包被在胶乳颗粒上，可与血清中的,C,反应蛋白发生凝集反应，该反应所产生的凝集形成一定的浊度，浊度的高低在足量抗体存在时与抗原的含量成正比。,临床意义,C-,反应蛋白（,CRP,）是最有名的急性相蛋白，发生炎症时（急性相反应）血液中,CRP,浓度会升高。健康个体血液中,CRP,浓度低于,5 mg/L,。在细菌感染、术后或组织损伤发生急性炎症过程中，,CRP,浓度在,6,小时后上升，峰值可达,500 mg/L,。检测,CRP,不仅可以用于检出急性感染，还可以对急性风湿性疾病和肠胃疾病的炎症反应过程进行监测。与红细胞沉降速率（,ESR,）和白细胞计数比较，,CRP,有很多优点：,CRP,更敏感，它的升高出现较早且在康复后恢复到参考值范围内也快。,心肌酶谱的,生化检测,1.,肌酸激酶,CK,IFCC,推荐法（,N-,乙酰半胱氨酸法）,CK,ADP+,肌酸磷酸,肌酸,+ATP,HK,ATP+,葡萄糖,ADP+G-6-P,G-6-PDH,G-6-P+NAD,+,6-,磷酸葡萄糖酸,+NADH+H,+,在,340nm,波长处测定,NADH,的生成速率，计算出,CK,活力。,临床意义,升高：心肌梗塞,4,6,小时开始升高，,18,36,小时可达正常值的确,20,30,倍，为最高峰，,2,4,天恢复正常。另外，病毒性心肌炎、皮肌炎、肌肉损伤、肌营养不良、心包炎、脑血管意外及心脏手术等都可以使,CK,增高。,2.,肌酸激酶同工酶,CK-MB,免疫抑制法,用抗人,M,血清，抑制,M,亚单位，然后测定剩余的,B,亚单位活性，乘,2,即得,CK-MB,活力。,CK,磷酸肌酸,+ADP,肌酸,+ATP,HK,ATP+,葡萄糖,葡萄糖,-6-,磷酸,+ADP,GPO,葡萄糖,-6-,磷酸,+NADP 6-,磷酸葡 萄糖酸,+NADPH,340nm,测定,NADPH,的生成速率，计算出,CK-MB,活力,临床意义,CK,由,M,和,B,二个亚单位组成三种的二聚体，,CK1,（,BB,）、,CK2,（,MB,）、,CK3,（,MM,）主要存在于胞浆中，另外血清中还有少量的线粒体同功酶（,CKm,）。心肌中,CK,活力较高（仅次于骨骼肌），其中,CK-MB,约占,13,22%,（骨骼肌中,1%,，因此其作为心肌损伤的指标具有特异性。,CK,MB,主要存在于心肌中，约为心肌总,CK,的,4,血清,CK-MB,上升先于总活力的升高，,24,小时达峰值，,36,小时内其波动曲线与总活力相平行，至,48,小时消失。,3.,乳酸脱氢酶,LDH,LP,法,乳酸脱氢酶能催化丙酮酸盐还原生成乳酸，同时被,NAD,+,还原成,NADH,，引起,340nm,吸光度的上升，其上升速率与样本中,LDH,活力成正比，其反应式如下：,LDH L-,乳酸,+NAD,丙酮酸,+NADH,pH9.3,临床意义,增高：急性心肌梗塞发作后,12-48,小时开始升高，,2-4,天可达高峰，,8-9,天恢复正常。,另外，肝脏疾病恶性肿瘤可引起,LDH,增高,4.,乳酸脱氢酶同工酶,1 LDH1,化学抑制法,LDH L-,乳酸,+NAD,丙酮酸,+NADH,pH9.3,反应体系中加有硫氰酸胍抑制剂,能抑制,LDH2,、,LDH3,、,LDH4,和,LDH5,的活性,测定结果为,LDH1,活力。,临床意义,急性心肌梗塞,(AMI),时血清,LDHl,及,LDH2,均增加，且,LDH2,LDH1,比值低于,1,。,心肌炎、溶血性贫血时,LDH1,也可升高。,5.,羟丁酸脱氢酶,GSCC,推荐法,HBDH -,酮丁酸,+NADH+H,+,-,羟丁 酸,+NAD,+,在波长,340nm,处测定,NADH,降低速率，计算出,HBDH,活力。,临床意义,增高：作为急性心梗诊断的一个指标，与,LDH,大致相同，在急性心梗时此酶在血液中维持高值，可达,2,周左右。,