消毒灭菌与生物安全.ppt

*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第3章消毒与灭菌,1,1.,灭菌,杀灭物体上,所有微生物,的方法。,包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的,全部,病原微生物和非病原微生物。,第一节 消毒灭菌的常用术语,2,2.,消毒,杀灭物体或环境中的,病原微生物,。,但不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物。,用以消毒的药品称为消毒剂。,3,3.,防腐,防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。,用以防腐的药品称为防腐剂。,4.,清洁,通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。,4,5.无菌和无菌操作,无菌：不存在任何活菌、多是灭菌的结果。,无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。,5,分为物理方法和化学方法两大类,一、物理消毒灭菌法,物理消毒灭菌的因素包括：热力、辐射、滤过、干燥和低温等,第二节 消毒灭菌的方法,6,红外线,是一种,0.7-1000m,波长的电磁波，尤以,1-10m,波长的热效应最强。,热效应只能在照射到的表面产生。多用于医疗器械的灭菌。,9,2.,湿热灭菌法,最常用,效果优于干热灭菌法。,湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性,湿热的穿透力比干热大,湿热的蒸气有潜热效应存在。,10,湿热与干热灭菌效果的比较,热型 温度（）时间 布层内的温度（）灭菌效果,（,h,）,20,层,40,层,100,层,湿热,90-105.3 3 101 101 101,完全,干热,130-140 4 86 72 70.5,不完全,11,巴氏消毒法,用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物、保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。,用于消毒,牛乳、酒类,（,61.1-62.8C,，,30min,或,71.7C,，,15-30s,）,12,煮沸法,100C,，,5min,杀死细菌繁殖体,100C,，,1-2h,杀灭细菌芽胞,流动蒸气消毒法,利用水蒸气进行消毒。,(1,个大气压,100C),细菌繁殖体,15-30min,可被杀灭。,13,间歇蒸气灭菌法,利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌的目的。,100,C，15-30min，37C,孵箱过夜*3次,适用于一些,不耐热的含糖、牛奶等培养基。,14,高压蒸气灭菌法,灭菌效果最好,高压蒸气灭菌器是一个密闭、耐高压蒸锅。,15,103.4,kPa，121.3 C，15-20 min,可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物,。,常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌。,16,新型的预真空压力蒸汽灭菌器,先抽出灭菌器内空气约,98%,，再送入蒸汽。,灭菌时间只需,34,分钟。,特别适用于周转快的物品。,17,（二）辐射杀菌法,1.紫外线,（1）波长240-300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以265-266nm最强。,（2）主要作用于DNA，形成二聚体，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的变异或死亡。,18,（,3,）紫外线穿透力较弱，一般只用于手术室等的空气消毒，或用于不耐热物品的表面消毒。,（,4,）紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。,19,2.电离辐射,（主要包括,射线和射线）,具有较高的能量和穿透力，对微生物有致死作用。,常用于大量一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。,20,3.,微波,波长为,1-1000mm,的电磁波,可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质，但不能穿透金属表面。,主要用于食品、非金属器械、检验室用品、食品用具、药杯及其他用品的消毒。,21,（三）滤过除菌法,用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌，达到无菌的目的，但是不能除去病毒和支原体。,所用的器具是滤菌器（薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器）。,主要用于一些不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素等的除菌。,22,空气除菌采用,生物洁净技术,。通过初、中、高三级高效分子空气滤过器，除掉空气中的尘埃微粒，并采用合理的气流方式来达到空气洁净的目的。,初级过滤：塑料泡沫海绵 过滤率50%,中效过滤：无纺布 过滤率50%90%,高效过滤：超细玻璃滤纸 过滤率99.9599.99%,凡在送风系统上装有高效或亚高效过滤系统的房间,一般统称为生物洁净室。,23,（四）干燥和低温抑菌法,有些细菌的繁殖体在空气中干燥时会很快死亡。低温可,使细菌的新陈代谢减慢,，故常用作保存细菌菌种。,为避免解冻时对细菌的损伤，可在低温状态下真空抽去水分，此方法称为,冷冻真空干燥法,。该法是目前保存菌种的最好方法。,24,超声波消毒法,不被人耳感受的高于,20kHz/s,的声波，称为超声波。超声波可裂解多数细菌，尤其是,G-,菌。,主要用于,粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等,。,25,二、化学消毒灭菌法,化学消毒剂的杀菌机制：,促进菌体蛋白质变性或凝固。,干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白与核酸的基团。,损伤细菌的细胞膜。,26,常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织都有危害，所以只限于,外用或环境消毒。,局限于：,1、体表（皮肤、粘膜、伤口的消毒）,2、手术器械消毒,3、排泄物及周围环境的消毒,27,消毒剂的分类,1.高效消毒剂,可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。,适用于不,能,耐受热力灭菌，但要进入人体内部的物品，如内窥镜、塑料外科器材等的消毒。,如含氯消毒剂、过氧化物消毒剂、醛类消毒剂、环氧乙烷,28,2、中效消毒剂,不能杀灭细菌芽胞，但能杀灭细菌繁殖体、真菌和大多数病毒。,适用于纤维内窥镜、喉镜、阴道窥器、麻醉器材等。如含碘消毒剂、醇类消毒剂,3.低效消毒剂,可杀灭多数细菌繁殖体，但不能杀灭细菌芽胞及某些抵抗力较强的细菌、真菌和病毒。,如季胺盐类消毒剂、氯己定、高锰酸钾,29,第三节 消毒灭菌的运用,医疗器械物品的消毒灭菌,1.高危器械物品 使用时需进入无菌组织的物品,高压蒸汽灭菌、高效消毒剂,2.中危器械物品 使用时不进入无菌组织，但需接触粘膜的器械,消毒,即可。,3.低危器械物品 只接触未损伤的皮肤,一般,用后清洗、消毒处理,即可。,4.快速周转的医疗器械,采用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂快速处理、中效或低效消毒剂与低热协同等方法。,30,室内空气消毒灭菌,1.物理消毒法,紫外线照射（1.5w/m,3,1小时）,滤过除菌（孔径0.2,m）,2.化学消毒法,过氧乙酸喷雾,过氧化氢喷雾、二氧化氯溶液、中草药,31,手和皮肤的消毒,75%乙醇，0.05%-0.1%次氯酸钠、0.2-0.4%过氧乙酸,粘膜的消毒,3%过氧化氢、0.1-0.5%氯己定或1,g/L,高锰酸钾,病人排泄物与分泌物,次氯酸钠、漂白粉等作用1,h,32,病人污染物品的消毒,日常生活小用具煮沸或流通蒸汽消毒，或过氧乙酸擦洗、喷洒。,饮水的消毒 氯气或漂白粉,环境的消毒,过氧乙酸，含氯消毒液,厕所阴沟用生石灰等,33,消毒剂,微生物,环境,性质,浓度,数量,种类,有机物,物理状态,酸碱度,作用时间,第四节 影响消毒灭菌效果的因素,温度,34,一、微生物的种类,不同微生物对消毒灭菌的敏感性不同。,敏感性高低：真菌、细菌繁殖体、包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞,二、微生物的物理状态,消毒灭菌前的微生物的生长情况影响它们的抵抗力。,三、微生物的数量,数量越大，所需消毒的时间就越长。,35,四、消毒剂的性质、浓度与作用时间,1.,理化性质不同，对微生物的作用大小各异。,2.,同一种消毒剂的浓度不同，其消毒效果也不同。一般消毒剂在高浓度时杀菌作用大（醇类例外）。,3.,消毒剂在一定浓度下，对细菌的作用时间越长，消毒效果也愈好。,36,五、温度,消毒剂的杀菌作用实质是化学反应，其反应速度随温度升高而加快。因此，温度升高可提高消毒效果。,37,六、酸碱度,消毒剂的杀菌作用受酸碱度的影响。,（戊二醛溶液中加入碳酸氢钠后才有杀菌作用。）,七、有机物,环境中有机物的存在，能够影响消毒剂的效果。,38,第五节 病原微生物实验室生物安全,一、病原微生物的分类,第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。,39,第三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。,40,第一类、第二类病原微生物统称为,高致病性病原微生物。,采集、运输高致病性病原微生物样本应当防止病原微生物扩散和感染。容器或者包装材料上应当印有,生物危险标识,。,41,二、病原微生物实验室的分级,国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为一级、二级、三级、四级。,一级、二级实验室,不得从事,高致病性病原微生物实验活动。,三级、四级实验室,从事,高致病性病原微生物实验活动。,42,三、实验室感染的控制以及监督和法律责任,1.控制工作,2.监督内容,3.法律责任的核心,43,复 习 思 考 题,1.解释,消毒、灭菌、防腐和无菌和无菌操作,2.试述高压蒸气灭菌法的用途。,3.简述紫外线杀菌法的特点及机理。,4.试述影响消毒灭菌效果的因素。,5.试介绍热力灭菌的种类、原理及应用范围。,6.试介绍各级病原微生物实验室的工作范围。,44,