国家自然科学基金年度研究计划及预期研究结果示例.doc

年度研究计划及预期研究结果示例：本项目预计在4年内完成，具体进展计划如下：u 2016.012016.06：回顾性收集组织标本，定量PCR和免疫组化实验检测肠癌组织标本中A基因的表达水平，分析临床病理及预后的相关性；u 2016.072016.12：过表达A基因和靶向A的RNAi慢病毒构建、包装和纯化，感染肠癌细胞，并通过实时定量PCR和western blot实验方法检测A的表达水平改变；u 2017.012017.06：通过细胞实验（MTT 生长实验，克隆形成实验和转移小室实验）验证A被消减或过表达后，细胞表型的变化，在多株细胞株上做验证；u 2017.072017.12：通过pathway array，验证A对于Y信号通路的影响及其下游分子信号通路的改变，鉴定调控的关键节点分子。同时筛选A基因的相互作用蛋白；u 2018.012018.06：根据筛选结果聚焦于对Y通路已有报道的靶分子，利用co-IP实验验证A与靶分子之间的相互作用关系，建立A调控Y通路的直接作用机制认识；u 2018.072018.12：信息学预测作用靶位点，制备点突变载体对两个分子直接的结合位点进行验证，明确结合的精细模式；u 2019.012019.06：动物实验验证A对小鼠移植瘤模型和转移模型的影响，在组织样本中检测A基因调控的Y通路分子和相互作用分子的表达改变；u 2019.072019.12：总结数据，发表论文，根据修回意见补充实验。预期研究结果1） 揭示A参与肿瘤转移细胞可塑性调控（科学问题）的功能，通过体内、体外实验结合过表达和RNAi手段，证实其具有调节肿瘤细胞可塑性的表型并由此影响肠癌的转移；2） 阐明A通过介导Y调节Z作用的机制。不仅通过生物信息学预测靶分子，还要通过实验进行验证，找到A干预的Y通路关键分子，解析其相互作用模式。3） 通过临床样本分析，检测A在肠癌组织及肝转移灶中（临床问题）的表达情况并分析其与肠癌肝转移及预后、生存的相关性，明确A的临床意义； 4） 在专业学术刊物上发表3-4篇SCI研究论文；5） 培养博士生1名，硕士研究生2名；