2025年分子生物学试题库.doc

第2章 染色体与DNA
名詞解释
原癌基因：细胞内与细胞增殖有关的正常基因，是维持机体正常生命活動所必须的，在進化上高等保守。 當原癌基因的构造或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强時，使细胞過度增殖，從而形成肿瘤。
半保留复制：以亲代DNA双链為模板以碱基互补方式合成子代DNA，這样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，這种复制方式叫半保留复制。
填空題
3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，還需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。
4.引起DNA损伤的原因有自发原因、物理原因、化學原因。
5.DNA复制時与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、單链DNA結合蛋白。
6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。
7.在真核生物中DNA复制的重要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。
8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。
9.DNA的修复方式有錯配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。
简述DNA复制的過程
DNA的复制過程可被分為3個阶段，即复制的起始、延伸和终止。每個DNA复制的独立單元重要包括复制起始位點和终止位點。
DNA复制的起始包括预引起和引起两個阶段。在预引起阶段，DNA解旋解链，形成复制叉，引起体组装；在引起阶段，在引起酶的催化下以DNA链為模板合成一段短的RNA引物。复制時DNA链的延伸由DNA聚合酶催化，以亲代DNA链為模板，引起体移動，從5′→3′方向聚合子代DNA链。當子链延伸抵达终止位點是，DNA复制就终止了，切除RNA引物，弥补缺口，在DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的DNA長链。
试述真原核生物的DNA复制的特點的不一样之处
①真核生物染色体有多种复制起點，多复制眼，呈双向复制，多复制子。原核生物的染色体只有一种复制起點，單复制子也呈双向复制。
②真核生物冈崎片段長约200bp比原核生物略短。真核生物DNA复制速度比原核慢，速度為1000～3000bp/min(仅為原核生物的1/20～1/50）。
③真核生物复制的终止在端粒处，原核生物的复制叉相遇時即终止。
④真核生物染色体在所有复制完之前起點不再重新開始复制；而在迅速生長的原核生物染色体DNA复制中，起點可以持续发動复制。真核生物迅速生長時，往往采用更多的复制起點。
⑤真核生物有多种DNA聚合酶，DNA聚合酶δ是真正的复制酶，在PCNA存在下有持续的合成能力。PCNA称為增殖细胞核抗原，相称于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的β-夹子，RFC蛋白相称于夹子装配器。
原核生物的DNA聚合酶有三种DNA聚合酶ⅢDNA的真正复制酶：多亚基酶，含拾种亚基，该酶DNA合成的持续能力强。
⑥真核生物线性染色体两端有端粒构造，它是由許多成串的重短复序列构成，端粒功能是稳定染色体末段构造，防止染色体间的末端连接，并可赔偿滞後链5’-末段在消除RNA引物後导致的空缺，使染色体保持一定長度。端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。
⑦RPA：真核生物的單链結合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物，DNA聚合酶ε弥补缺口。
简述半保留复制的生物學意义
DNA的复制過程（以大肠杆菌為例）
复制起始：
（1）、拓扑异构酶解開超螺旋。
（2）、Dna A蛋白识别并在ATP存在下結合于四個9bp的反复序列。
（3）、在类组蛋白（HU、ATP参与下, Dan A蛋白变性13個bp的反复序列,形成開链复合物。
（4） 、Dna B借助于水解ATP产生的能量在Dna C的协助下沿5’ →3’ 方向移動，解開DNA双链，形成前引起复合物。
（5）、單链結合蛋白結合于單链。
（6）、引物合成酶（Dna G蛋白）開始合成RNA引物。
链的延長（冈崎片段的合成）：
在DNA聚合酶Ш的催化下，以四种5’ -脱氧核苷三磷酸為底物，在RNA引物的3’端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸。DNA链的延伸同步進行前导链和滞後链的合成。两条链方向相反。
6、PCR的基本原理？
PCR是在试管中進行的DNA复制反应，基本原理是根据细胞内DNA半保留复制的机理，以及体外DNA分子于不一样温度下双链和單链可以互相转变的性质，人為地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成單链，單链DNA与人工合成的引物退火，然後耐热DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單链模板延伸為双链DNA。PCR全過程每一步的转换是通過温度的变化来控制的。需要反复進行DNA模板解链、引物与模板DNA結合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高温变性、低温退火、中温延伸３個环节构成PCR反应的一种循环，此循环的反复進行，就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性：模板双链DNA?單链DNA，94℃。退火：引物＋單链DNA?杂交链，引物的Tm值。引物的延伸：温度至70 ℃左右， Taq DNA聚合酶以４种dNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物３’末端為起點的5’→3’DNA链延伸反应，形成新生DNA链。新合成的引物延伸链通過变性後又可作為下一轮循环反应的模板PCR，就是如此反复循环，使目的DNA得到高效迅速扩增。
第三章
启動子：是一段位于构造基因5，端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA精确地相結合并具有转录起始的特异性。指RNA聚合酶识别、結合和開始转录的一段特定的DNA序列。
增强子：能强化转录起始的序列称為增强子。
转录：以DNA為模板，按照碱基配對原则合成RNA，即将DNA所含的遗传信息传給RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的過程。
RNA的编辑：是某些RNA，尤其是mRNA的一种加工方式，它导致了DNA所编码的遗传信息的变化。
外显子(Exon) ：真核细胞基因DNA中的编码序 列，這些序列被转录成RNA并進而翻译為蛋白质。
内含子(Intron) ：真核细胞基因DNA中的间插序列，這些序列被转录成RNA，但随即被剪除而不翻译。
复制子：生物体的复制單位称為复制子（replicon) ，是在同一种复制起點控制下的一段DNA序列。
转录單元：是一段启動子開始至终止子結束的DNA序列。
转录起點：是与新生RNA链的第一种核苷酸相對应的DNA链上的碱基，一般為一种嘌呤。转录開始時模板上的第一种碱基，在原核中常為A或G，并且位置固定。
填空
1转录的基本過程包括：模板识别，转录起始，转录的延伸，转录的终止。
2基因体現包括：转录和翻译 两個阶段。
3RNA的编辑方式：碱基突变，尿甘酸的缺失和添加。
4在原核生物中，-35区与-10区之间的距离大概是16~19bp
5帽子构造的功能：〔1〕在翻译中起识别作用〔2〕使mRNA免遭核苷酸的破壞
6原核生物只有一种RNA聚合酶而真核生物有三种，每一种均有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成rRNA,聚合酶Ⅱ合成mRNA，聚合酶Ⅲ合成tRNA和5s rRNA。三种聚合酶都是具有多亚基的大的蛋白复合体。
7 转录因子一般具有两個独立的构造域：一种結合DNA，一种激活转录。
8 在真核细胞mRNA的修饰中，“帽子”构造由甲基构成，“尾”由多聚腺嘌呤构成。
9原核生物的绝大部分起启動子都存在共同的序列，即位于-10bp处的 区和-35bp处的 区，他們都是RNA聚合酶与启動子結合的位點，能与σ因子互相识别而具高度亲和性。真核生物中，在转录起始位點上游-25—-35bp处有 区和位于-70--80bp处 的 区。
简答題
1增强子的特點
〔1〕有遠距离效应〔2〕無方向性〔3〕顺势调整〔4〕無物种和基因的特异性
〔5〕具有组织的特异性〔6〕有相位性，其作用与DNA的构象有关〔7〕有的增强子可以對外部信号产生反应。
2比较DNA复制和转录的异同點
相似點：都以DNA链作為模板，合成方向均為5，端到3，端，聚合反应均遵照碱基配對原则，通過核苷酸之间形成的3，，5，—磷酸二酯键使核苷酸键延長。
不一样點：

复制
转录
模板
两条链均被复制
模板链转录（不對称转录）
原料
Dntp
NTP
酶
DNA聚合酶
RNA聚合酶
产物
子代双链DNA（半保留复制）
mRNA tRNA rRNA
配對方式
A-T G-C
A-U A-T G-C
引物
RNA引物
不需要引物
DNA复制与转录的异同
相似點：
都需要模板
都以三磷酸核苷酸為底物（NTP或dNTP）
合成方向都是5→’3’
不一样點
转录不需引物；
只转录DNA分子中的一种片段（称為转录單位或操纵子,operon)；
双链DNA中只有一条链具有转录活性（称為模板链）；
哪個基因被转录与特定的時间、空间、生理状态有关。
RNA聚合酶無校對功能。

原核生物与真核生物mRNA的比较
（1）、原核生物mRNA的半衰期短；
（2）、許多原核生物mRNA以多顺反子形式存在；
（3）、原核生物5’端無帽子构造，3’或只有短的poly(A)。
（4）、真核生物mRNA5’端有帽子构造，
（5）、绝大多数真核生物mRNA3’具有poly(A)尾巴，是转录後加上的，是mRNA從核到质转移所必需的形式，提高mRNA的稳定性。

大肠杆菌的转录過程：
（1）、识别阶段：RNA聚合酶在σ亚基的引导下結合于启動子上；
（2）、DNA双链局部解開；
（3）、起始阶段：在模板链上通過碱基配對合成最初RNA链；
（4）、延伸阶段：关键酶向前移動，RNA链不停生長；
（5）、终止阶段：RNA聚合酶抵达终止子；
（6）、RNA和RNA聚合酶從DNA上脱落。

论述題
1 真核生物转录的前体hnRNA怎样加工為成熟的mRNA？
真核生物mRNA的构造构成：5，端存在帽子构造，3，端一般具有poly(A)尾巴，無内含子，部分碱基发生甲基化。
①5，端加帽：當RNA聚合酶Ⅱ聚合的转录产物到达25碱基長時，在其5，端加上一种以5，→3，方向相连的7—甲基鳥苷帽，防止5，核苷酸外切酶的袭击，有助于剪接、转运和翻译的進行；②3，端加尾：诸多真核生物的hnRNA的3，端通過剪切後再加上多聚A残基即poly(A)尾巴，這有助于整個分子的稳定；③剪接：在真核生物的mRNA加工過程中，内含子序列被切除，两侧的外显子片段连接。剪接反应在核内進行，需要内含子有5，—GU，AU—3，以及一段分支點序列。其過程是：内含子先以一种具尾的环状分子或套索状分子形式被删除，然後被降解，剪接包括snRNP与保守序列結合，形成剪接体，在其内发生剪接与连接反应；④编辑；⑤甲基化修饰：當序列為5，—RRACX—3，時會在第6位N原子位置发生甲基化。
2概括细菌细胞的转录過程
转录是通過RNA聚合酶的作用，以一条DNA链為模板产生一条單链RNA過程。环节如下：
⑴与RNA聚合酶全酶的結合：一种RNA聚合酶全酶分子与待转录的DNA编码序列上游的启動子序列松弛的結合。
⑵起始：RNA聚合酶往下游移動了几种核苷酸抵达启動子的另一段短序列—Pribnow框，紧密地与DNA結合。DNA上的启動子区域解链，RNA便從Pribnow框下游的几种核苷酸处開始合成，一般是DNA的反义链作為模板，合成几种核苷酸後，δ因子被释放并循环使用，如下环节不再需要δ因子。
⑶延伸：RNA聚合酶关键酶沿著DNA模板移動，使DNA解链，与DNA模板的下一碱基互补核苷三磷酸聚合到链上。RNA聚合酶继续在DNA上移動，RNA链從模板链被释放出来，DNA双螺旋重新形成。
⑷當所有编码序列被转录後，RNA聚合酶移動一种终止序列，即终止子。转录复合体解体，RNA聚合酶和新形成的RNA從DNA模板上脱落下来。
3、复杂转录單位的原始转录产物的加工方式有几种？分别是什么？
（1）剪、运用多种5’端转录起始為點或接位點产生不一样的蛋白质。
（2）、运用多种加poly（A）位點和不一样的剪接方式产生不一样的蛋白质。
（3）、虽無剪接，但有多种转录起始位點或加poly（A）位點的基因。
第四章
.SD序列：在原核生物mRNA起始密码AUG上游，存在4~9個富含嘌呤碱的一致性序列，如-AGGAGG-，称為S-D序列。位于原核生物起始密码子上游7-12個核苷酸处的保守区，该序列与16SrRNA3’端反向互补。又称為核蛋白体結合位點（ribosomal binding site，RBS)
正转录调控：
负转录调控：

填空題
1．tRNA的种类有：起始tRNA和延伸tRNA，同工tRNA，校正tRNA。
2. tRNA的二级构造為三叶草型，三级构造為倒L型。tRNA构造
3.原核生物蛋白质合成的起始tRNA是甲酰甲硫氨酰—tRNA（fMet-tRNA fMet）,它携带的氨基酸是甲酰甲硫氨酸（fMet），而真核生物蛋白质合成的起始tRNA是甲硫氨酰—tRNA（Met-tRNA Met），它携带的氨基酸是甲硫氨酸（Met）。
4．新生肽链每增長一种氨基酸單位都要通過AA-tRNA与核糖体的結合，肽键形成，移位三步反应。
5. 核糖体的作用位點有：A位點、P位點、E位點。
5．在真核生物中蛋白质合成起始時先形成起始因子和起始tRNA复合物，再和40S亚基形成40S起始复合物。
6．氨酰tRNA合成酶既能识别氨基酸，又能识别對应的tRNA。
7．多肽合成的起始密码子是AUG，而UAA，UAG，UGA是终止密码子。
8．遗传密码的特點包括持续性，简并性，摆動性，普遍性与特殊性。
9．核酸复制時，DNA聚合酶沿模板链3’→5’方向移動；转录時，RNA聚合酶沿模板链3’→5’方向移動；翻译時，核糖体沿模板链5’→ 3’方向移動。
10．原核生物蛋白质合成形成起始复合物時，其mRNA先与核糖体的30S亚基結合，然後再与結合起始因子和GTP的甲酰甲硫氨酰—tRNA結合，形成30S起始复合物，然後再与50S形成70S起始复合物。
简答題：
1．简述核糖体的构造及功能特點：
答：核糖体的构造：①真核生物：由60S大亚基和40S小亚基构成的80S的核糖体；②原核生物：由50S大亚基和30S小亚基构成的70S的核糖体
功能特點：合成蛋白质 。在單個核糖体上，包括至少5個功能活性中心，在蛋白质合成過程中，各有专一的识别作用和功能：mRNA的結合部位——小亚基 ，結合或接受AA-tRNA的部位——大亚基A位，結合或接受肽基tRNA部位——大亚基，肽基转移部位——大亚基P位，形成肽键部位（转肽酶中心）——大亚基E位。
2.简述氨基酸的活化過程
答：游离的氨基酸必须通過活化以获得能量，才能参与蛋白质的合成，活化反应由氨酰tRNA合成酶催化。活化分两步：①活化：aa + ATP+ E→氨基酰-AMP释放出 PPi
②转移：氨基酰-AMP转移到 tRNA 并释放出 AMP。

3、论述蛋白质的翻译過程。
答：蛋白质的翻译即合成過程可分為四個阶段：氨基酸的活化、肽链合成的起始、延伸和终止。
① 氨基酸的活化：游离的氨基酸必须通過活化以获得能量，才能参与蛋白质的合成，活化反应由氨酰tRNA合成酶催化，最终氨基酸连接在tRNA的3’端合成氨酰- tRNA。
② 肽链合成的起始：核蛋白体大小亚基分离 ，mRNA在小亚基上定位結合，起始氨基酰tRNA与小亚基結合，核蛋白体大亚基結合。
③肽链的延伸：肽链的延長是在核蛋白体上持续性循环式進行，每次循环增長一种氨基酸，分為如下三步：（一）進位:根据mRNA下一组遗传密码指导，使對应氨基酰-tRNA進入核蛋白体A位。（二）成肽:肽酰转移酶将相邻的两個氨基酸相连形成肽键，该過程不需要能量的输入；（三）转位：移位酶运用GTP水解释放的能量使核糖体沿mRNA移動一种密码子，释放出空载的tRNA并将新生肽链运至P位點。
③ 肽链合成的的终止与释放：释放因子识别并与终止密码子結合，水解P位上多肽链与tRNA之间的二脂键，接著，新生肽链和tRNA從核糖体上释放，核糖体大、小亚基解体，蛋白质合成結束。
4、原核生物翻译的起始過程
（1）核糖体大小亚基分离
（2）30s小亚基通過SD序列与mRNA模板相結合
（3）在IF-2和GTP的协助下fMet-tRNAfMet進入小亚基的P位，tRNA的反密码子与mRNA上密码子配對。
（4)带有tRNA、mRNA和三個翻译起始因子的小亚基起始复合物与50s的大亚基結合，GTP水解释放翻译起始因子。
5、以大肠杆菌為例简述蛋白质合成的過程
從如下四個方面详细论述
（1）氨基酸的活化：
（2）肽链合成的起始：
（3）肽链的延生：
（4）肽链合成的终止：
第六章
乳糖操纵子模型内容
（1）Z、Y、A基因产物由同一条多顺反子mRNA分子所编码。
（2）乳糖操纵子mRNA分子的启動区（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能單独起始半乳糖苷酶和透過酶基因的高效体現。
（3）乳糖操纵子的操纵区是DNA上的一小段序列（仅為26bp），是阻遏物的結合位點。
（4）當阻遏物与操纵区相結合時，lacmRNA的转录起始受到克制。
（5）诱导物通過与阻遏物結合，变化其三维构象，使之不能与操纵区相結合，诱发lac mRNA的合成。

乳糖操纵子(lac operon)的构造
1、构造基因
（1）lacZ：编码b －半乳糖苷酶 （使乳糖水解）
（2）lacY：编码b －半乳糖苷透過酶
（使b －半乳糖苷透過细胞壁、质膜進入细胞内）
（3）lacA：编码b －半乳糖苷乙酰转移酶（将乙酰基转移到b －半乳糖苷上）
2、调整基因（regulatory gene）
（1）概念： 其产物参与调控其他构造基因体現的基因
（2）特點：
a、可在构造基因群附近、也可遠离构造基因
b、不仅對同一条DNA链上的构造基因起作用，并且能對不一样DNA链上的构造基因起作用
（3）调控蛋白：
类型：a、阻遏蛋白（repressive protein）与操纵元件結合後能減弱或制止所调控基因转录的调控蛋白 b、激活蛋白（activating protein）：与操纵元件結合後能增强或启動所调控基因转录的调控蛋白
3、操纵元件（operator）
（1）与启動子邻近或与启動子部分序列重叠
（2）具有回文构造，能形成拾字形构造。
（3）与不一样构像的蛋白质結合，可以分别起阻遏或激活基因体現的作用
4、启動子(promoter)
是指能被RNA聚合酶识别、結合并启動基因转录的一段DNA序列。
（1）-10序列--- Pribnow盒：TATAAT；
（2）-35bp序列：TTGACA
操纵子至少有一种启動子，一般在第一种构造基因5’上游，控制整個构造基因群的转录
5、终止子（terminator）是予以RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列
（1）不依赖ρ因子的终止子
（2）依赖ρ因子的终止子
在一种操纵元中至少在构造基因群最终一种基因的背面有一种终止子
大肠杆菌乳糖操纵子（lactose operon）包括3個构造基因：Z、Y和A，以及启動子、控制子和阻遏子等。转录的调控是在启動区和操纵区進行的。
LacI——阻抑蛋白， LacZ——β-糖苷酶，LacY——透性酶，LacA——转乙酰基酶。
三种酶的功能：
①. β-半乳糖酶：将乳糖分解成半乳糖和葡萄糖
②. 渗透酶：增長糖的渗透，易于摄取乳糖和半乳糖
③. 转乙酰酶：β-半乳糖转变成乙酰半乳糖
lac 操纵子小結
一般状况（葡萄糖供应正常）阻遏蛋白与操纵序列結合，基因不转录。
细胞外的乳糖通過透性酶吸取到细胞内；细胞内的β-半乳糖苷酶将乳糖转变為异乳糖。异乳糖結合到乳糖阻抑物上使之從操纵序列上脱离，聚合酶迅速開始lacZYA基因的转录。這就是负控诱导。
然而，還需要细菌生長系统中缺乏葡萄糖，使cAMP含量增長，才有足够量的cAMP与CRP結合形成CRP-cAMP复合物結合于Plac上游。使DNA双螺旋发生弯曲，转录才可以有效地進行。
组氨酸操纵子：
与His降解代謝有关的两组酶类被称為hut酶(histidine utilizing enzyme)，控制這些酶合成的操纵子被称為hut operon。由一种多重调整的操纵子控制，有两個启動子，两個操纵区及两
個正调控蛋白。
转录後调控
一、 翻译起始的调控
遗传信息的翻译起始于mRNA上的核糖体結合位點（RBS）——起始密子AUG上游的一段非翻译区。在RBS中有SD序列，与核糖体16S rRNA的3’端互补配對，促使核糖体与mRNA相結合。
RBS的結合强度取决于SD序列的构造及与AUG的距离。SD与AUG相距一般以4～10核苷酸為佳，9核苷酸最佳。
二、mRNA稳定性對转录水平的影响
所有细胞均有一系列核酸酶，用来清除無用的mRNA。一种經典的mRNA半衰期為2-3min。mRNA分子被降解的也許性取决于其二级构造。
SD序列的微小变化，往往會导致体現效率成百上仟倍的差异，這是由于核苷酸的变化变化了形成mRNA 5’端二级构造的自由能，影响了30S亚基与mRNA的結合，從而导致了蛋白质合成效率上的差异。
三、蛋白质的调控作用
细菌中有些mRNA結合蛋白可激活靶基因的翻译。相反，mRNA特异性克制蛋白则通過与核糖体竞争性結合mRNA分子来克制翻译的起始。大肠杆菌中的核糖体蛋白就存在翻译克制現象。
四、反义RNA的调整作用
RNA调整是原核基因体現转录後调整的另一种重要机制。细菌對应环境压力的变化，會产生某些非编码小RNA分子，能与mRNA中的特定序列配對并变化其构象，导致翻译過程的启動或关闭等作用。
第七八章
操纵子(operon)：是指数個功能上有关的构造基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启動子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因体現單位，所转录的RNA為多顺反子。在原核生物中，若干构造基因可串联在一起，其体現受到同一调控系统的调控，這种基因的组织形式称為操纵子。
反式作用因子（trans-acting factor)：能直接或间接地识别或結合在各类顺式作用元件关键序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。
弱化子：在trp mRNA 5’端有一种長162bp的mRNA片段被称為前导区，其中123～150位碱基序列假如缺失，trp基因体現可提高6-10倍。mRNA合成起始後来，除非培养基中完全没有色氨酸，转录總是在這個区域终止，产生一种仅有140個核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录。這個区域被称為弱化子，该区mRNA可通過自我配對形成茎-环构造。
顺式作用元件(cis-acting element)影响自身基因体現活性的非编码DNA序列。
断裂基因（splite gene）：真核生物构造基因，由若干個编码区和非编码区互相间隔開但又持续镶嵌而成，清除非编码区再连接後，可翻译出由持续氨基酸构成的完整蛋白质，這些基因称為断裂基因。
基因的分子生物學定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的所有核苷酸序列。
基因体現的時间特异性：
基因体現的空间特异性：

填空題
1、真核生物中反式作用因子的DNA結合构造域有：螺旋－转角－螺旋，碱性－螺旋-环-螺旋，锌指，碱性－亮氨酸拉链，同源域蛋白。
2、转录调整因子按功能可以分為：基本转录因子和特异转录因子。
3、真核生物有3类RNA聚合酶，负责转录rRNA基因的RNA聚合酶是：RNA聚合酶I
4、經典的原核启動子的四個特性是：转录起始位點，原核基因转录起始位點一般是嘌呤，-10区，-35区。
5、乳糖操纵子的构造构造基因有：lacZ，lacY，lacA。
問答題
1、乳糖操纵子的作用机制。
答：（1）乳糖操纵子的构成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z，Y，A三個构造基因,分别编码半乳糖苷酶，透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外尚有一种操纵序列O，一种启動子P和一种调整基因I。
（2）阻遏蛋白的负性调整：没有乳糖存在時，I基因编码的阻遏蛋白結合于操纵序列O处，乳糖操纵子处在阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在時，乳糖作為诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能結合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导開放合成分解乳糖的三种酶。因此，乳糖操纵子的這种调控机制為可诱导的负调控。
（3）CAP的正性调整：在启動子上游有CAP結合位點,當大肠杆菌從以葡萄糖為碳源的环境转变為以乳糖為碳源的环境時,cAMP浓度升高，与CAP結合,使CAP发生变构，CAP結合于乳糖操纵子启動序列附近的CAP結合位點，激活RNA聚合酶活性,增進构造基因转录，调整蛋白結合于操纵子後增進构造基因的转录，對乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。
（4）协调调整：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调，互相制约。
2、原核和真核生物基因体現调控的比较。
答：相似點：都具有转录水平的调控和转录後水平的调控，并且也以转录水平的调控最為重要；真核构造基因的上游和下游也存在著許多特异的调控成分，并依托特异蛋白因子与這些调控成分的結合与否控制著基因与否转录
不一样點：原核的染色质是裸露的DNA，而真核的染色质则是由DNA与组蛋白紧密結合形成的核小体。原核中染色质的构造對基因的体現没有明显的调控作用，而在真核中這种作用是明显的。在原核基因转录的调控中，既有激活物的调控，也有阻遏物的调控，两者等同重要。在真核生物中虽然也有正调控成分和负调控成分，但迄今已知的重要是正调控。
原核基因转录和翻译是偶联的，而真核生物的转录和翻译不是偶联的， RNA在细胞核中合成，只有經转运穿過核膜，抵达细胞质後，才能被翻译成蛋白质。使得真核基因的体既有多种转录的调控机制。原核生物细胞内基因体現基本一致，且對于外界环境条件变化的反应也基本相似。真核生物大都是多细胞的复杂有机体，在個体发育中由一种受精卵逐渐分化形成不一样的细胞类型和多种组织，分化是不一样基因体現的成果，在不一样发育阶段和不一样细胞类型中，基因的時空体現受到严密的调控。
32、真核生物转录後水平的调控机制？
（1）、5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化的调控意义：5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一种重要原因，它至少保证mRNA在转录過程中不被降解。
（2）、mRNA选择性剪接對基因体現调控的作用
（3）、mRNA运送的控制
4、經典的DNA重组试验一般包括哪些环节
（1）提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形成一种新的重组DNA分子。
（2）将這個重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保留，這個過程称為转化。
（3）對那些吸取了重组DNA的受体细胞進行筛选和鉴定。
（4）對具有重组DNA的细胞進行大量培养，检测外援基因与否体現。