溶血的检验.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,酸化血清溶血试验,一、原理：酸化血清溶血试验，也称,Hamtest,。阵发性睡眠性血红蛋白尿症（,PNH,）患者体内存在对补体敏感的红细胞，即红细胞在酸性（,pH6.4,6.5,）的正常血清中孵育，补体被激活，,PNH,红细胞破坏而产生溶血。而正常红细胞不被溶解，无溶血现象。如血清经,56,加热,30,分钟，使补体灭活，患者红细胞即不被溶解。,二、参考范围：健康人：阴性。,三、临床意义：阳性主要见于,PNH,，敏感度较低，有,30%,以上患者呈阴性反应。自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。,蔗糖溶血试验,一、原理：根据,PNH,患者的红细胞，在低离子强度的蔗糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育后可使补体与红细胞膜结合加强，蔗糖溶液进入补体敏感的红细胞内，导致渗透性溶血。,二、参考值：定性试验：正常为阴性；定量试验：正常溶血率,5%.,三、临床意义：,PNH,患者为阳性或溶血率增加，可作为,PNH,的筛选试验。部分自身免疫性溶血性贫血患者可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。,抗人球蛋白试验,一、原理：抗人球蛋白试验（,Coombs,试验）检测自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（,IgG,）。分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验（,DAGT,）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验（,IAGT,）。直接试验应用抗人球蛋白试剂（抗,IgG,、,IgM,、,IgA,和（或）抗,C3,）与红细胞表面的,IgG,分子结合，如果红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。目的是检查红细胞表面的不完全抗体。间接试验应用,Rh(D),阳性,O,型红细胞与受检血清混合孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。,二、参考范围：健康人直接和间接抗人球蛋白试验均阴性。,三、临床意义：,自身免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫性溶血和血型不合引起的输血反应、药物性免疫性溶血、冷凝集素综合征、阵发性冷性血红蛋白尿等直接抗人球蛋白试验阳性，当抗体与红细胞结合后，有过剩抗体时直接和间接试验均阳性。,红细胞寿命测定,原理：红细胞寿命测定将标记放射性核素的红细胞注入血循环后，逐日观察其消失率，记录成活曲线，计算出红细胞寿命。,参考范围：半寿期,25-32,天,应用评价：,1.,溶血性贫血：红细胞寿命缩短，约为,14,天。,2.,再生障碍性贫血：红细胞寿命缩短，约为,15-29,天。,血浆游离血红蛋白检测,原理：血红蛋白可催化过氧化氢释放新生态氧，使邻苯氧化为蓝紫色。根据显色深浅，与同时测定标准血红蛋白液对照，可测出血浆游离血红蛋白的量。,参考范围：,0-40mg/L,应用评价：,1.,明显增高是判断血管内溶血的指征。蚕豆病、,PNH,、冷凝集素综合征、阵发性寒冷性血红蛋白尿、溶血性输血反应等明显增高；自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血可轻到中度增高。,2.,血管外溶血、红细胞膜缺陷不增高。,尿含铁血黄素试验,实验原理：尿含铁血黄素试验又称Rous试验。当血红蛋白通过肾滤过时，部分铁离子以含铁血黄素的形式沉积于上皮细胞，并随尿液排出。尿中含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体，其中的高铁离子与亚铁氰化钾作用，在酸性环境下产生普鲁士蓝色的亚铁氢化铁沉淀。尿沉渣肾小管细胞内可见直径13um的蓝色颗粒。,参考范围：健康人为阴性。,应用评价：Rous试验阳性提示慢性血管内溶血，尿中有铁排出，无论有无血红蛋白尿，只要存在慢性血管内溶血如PNH，本实验即成阳性，并可持续数周，但在溶血初期，虽然有血红蛋白尿，上皮细胞内尚未形成可检出的含铁血黄素，此时本实验可呈阴性反应。,尿卟啉检测,实验原理：尿中卟啉类物质在酸性条件下，经乙醚提取，于405nm处显红色荧光，从而可对尿卟啉进行定性检测。,参考范围：健康人呈阴性。,应用评价：,1.增加 主要见于先天性红细胞生成型卟啉病、迟发性皮肤型卟啉病、肝红细胞生成型卟啉病等。,2.卟啉类化合物检测对研究血红素代谢障碍有重要意义，除卟啉病外，对缺铁性贫血、铅中毒、铁粒幼细胞贫血和珠蛋白生成障碍性贫血等的诊断有一定价值。,谢谢！,