送检牛羊病材分离之细菌性病原培训课件.ppt

按一下以編輯母片標題樣式,按一下以編輯母片,第二層,第三層,第四層,第五層,*,送检牛羊病材分离之细菌性病原,*,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Abstract,A total of 83 bovine and,caprine,specimens were submitted.,A total of 16 isolates including,Arcanobacterium,pyogenes,Streptococcus,bovis,II,Pasteurella,multocida,Mannheimia,haemolytica,and,Klebsiella,pneumonia,from 26 cases with pneumonia.,Six strains of,Mycobacterium,avium,subsp,.,paratuberculosis,from 24 cases with diarrhea.,Two strains of,A.,pyogenes,from 22 cases with abortion or reproductive disorder.,2,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Two strains of,A.,pyogenes,and 1 strain of,Fusobacterium,necrophorum,from 11 cases with hepatic lesions.,Two strains of,A.,pyogenes,and 1 strain of,Corynebacterium,pseudotuberculosis,from 2 cases with,lymphotitis,.,One strain of,C.,pseudotuberculosis,from 1 case with spleen abscess.One strain of,A.,pyogenes,from 1 case with peritonitis.One strain of,A.,pyogenes,from 1 case with muscular,abscess.,3,送检牛羊病材分离之细菌性病原,材料與方法,材料來源：各地防治所委託送檢之病材。,細菌分離：一般臟器表面殺菌處理後，以無菌剪刀剪開釣取內部細菌，若確定為無菌操作取得之病材，可省去殺菌步驟。若自糞材中分離特定細菌則須多加數種抗生素及操作手續，以抑制雜菌生長。,細菌純化：選取單一菌落純化，以利後續鑑定步驟。,4,送检牛羊病材分离之细菌性病原,4.,細菌鑑定：包括使用傳統生化反應鑑定法，市售很多商品化套組可供使用，花費時間,1-2,天；另有依據細菌對於各種碳源利用能力而分類的鑑定方法；並以,PCR,增幅,16S rDNA,區域，與基因資料庫進行比對，可當作輔助鑑定方法。,5,送检牛羊病材分离之细菌性病原,結果,2006,年,4,月到,2008,年,5,月間取得牛羊病例,83,例，其中包括肺炎症狀,26,例,(31.3%),、下痢症狀,24,例,(28.9%),、流死產及生殖道病變,22,例,(26.5%),、肝臟病變,11,例,(13.2%),、衰弱消瘦症狀,4,例,(4.8%),、淋巴結炎,3,例,(3.6%),、腎臟病變,3,例,(3.6%),、神經症狀,2,例,(2.4%),、關節炎,2,例,(2.4%),、脾膿瘍,1,例,(1.2%),、腹膜炎,1,例,(1.2%),、肌肉化膿灶,1,例,(1.2%),。,6,送检牛羊病材分离之细菌性病原,肝病變,11,例中分離得,3,株病原菌包括,A.,pyogenes,2,株,(66.7%),、,Fusobacterium,necrophorum,1,株,(33.3%),。,其他包括淋巴結炎,3,例中分離得,3,株病原菌包括,A.,pyogenes,2,株,(66.7%),、,Corynebacterium,pseudotuberculosis,1,株,(33.3%),。脾膿瘍,1,例中分離得,C.,pseudotuberculosis,1,株。腹膜炎,1,例中分離得,A.,pyogenes,1,株。肌肉化膿灶,1,例中分離得,A.,pyogenes,1,株。,8,送检牛羊病材分离之细菌性病原,2006,年到,2007,年間取得恆春畜產試驗所分所牛羊病例,82,例，以呼吸道症狀與其周邊淋巴結炎、以及多發性化膿病灶為主，共分離得病原菌,41,株，包括,Str,.,bovis,II 15,株,(36.6%),、,Burkholderia,pseudomallei,12,株,(29.3%),、,C.,pseudotuberculosis,7,株,(17%),、,P.,multocida,4,株,(9.7%),、,M.,haemolytica,2,株,(4.9%),、,A.,pyogenes,1,株,(2.4%),。,9,送检牛羊病材分离之细菌性病原,病原菌簡介,Arcanobacterium pyogenes,舊名,Corynebacterium,pyogenes,Actinomyces,pyogenes,等等。,革蘭氏陽性短桿菌，細小溶血性菌落，無氧狀態生長比有氧狀態佳，需培養,48,小時才有足夠菌量做生化試驗。,感染途徑主要為傷口感染，可感染多種動物，造成多臟器多發性化膿病變。,抗生素治,療效果不佳。,10,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Streptococcus bovis,II,D,族鏈球菌，革蘭氏陽性球桿或是短桿菌，兼性厭氧，普遍存在反芻動物之呼吸道黏膜表面，為機緣性細菌。,可引起人類心內膜炎。,11,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Pasteurella multocida,革蘭氏陰性桿菌，兩極濃染為特徵，氧化酶陽性，巴斯德桿菌在生化反應測試上幾乎不利用醣類。,培養基上生長成白灰色菌落。,呼吸道常在菌，為重要之肺炎病原菌。,感染禽類及各種哺乳動物，在哺乳動物的症狀特徵是爆發性出血性敗血症。,12,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Mannheimia haemolytica,舊稱,Pasteurella,haemolytica,，革蘭氏陰性桿菌，特性與巴斯德桿菌類似。,培養基上生長成白色溶血性菌落。,在寒冷或運輸等緊迫因子下產生致害，主要症狀為纖維素性肺炎，為重要之反芻動物肺炎病原菌。,13,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Klebsiella pneumonia,屬腸內菌科，革蘭氏陰性桿菌。,培養基上生長成黏性透明菌落。,機緣性細菌，會造成動物之肺炎，在人則是院內感染及傷口感染常見之細菌。,14,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Mycobacterium avium,subsp.,paratuberculosis,分支桿菌屬，現分類於鳥型分支桿菌內，可引起,Johnes,disease,。,使用添加,Mycobactin,J,之蛋黃培養基分離，生長需,2,個月或更久。,感染途徑為由口食入，引起慢性消耗性肉芽腫性腸炎，有冰山效應。,可能與人類之,Crohns,disease,相關。,15,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Fusobacterium necrophorum,絕對厭氧菌，革蘭氏陰性長絲狀菌。,會造成牛羊的喉炎氣管炎,(,仔牛白喉,),、腐蹄及壞死性肝炎，感染部位膿腫惡臭。,也可能感染其他哺乳動物，常為二次性感染。,16,送检牛羊病材分离之细菌性病原,Corynebacterium pseudotuberculosis,革蘭氏陽性桿菌，觸媒反應陽性，乾躁菌落型態，需,48,小時培養。,羊隻由皮膚傷口、剪毛等傷口感染，引起局部乾酪性淋巴腺炎、膿血症或全身性多發性膿疱。,17,送检牛羊病材分离之细菌性病原,討論,無法從樣本分離到病原菌之最大原因為雜菌汙染,(,尤其是變形菌汙染,),，當污染嚴重時，便無法分離到正確之病原菌，汙染原因包括保存運送錯誤造成樣本腐壞、各臟器混雜保存、採樣時候污染等。,其他影響分離因素包括採集之樣本品過小、樣本未採取到病灶處及分離時候操作錯誤等等。,此外，養殖戶私用各種抗生素治療也對病原菌之分離有很大之影響。,18,送检牛羊病材分离之细菌性病原,目前鑑定之方法仍以傳統之生化反應為主，可是市售套組常常無法正確鑑定出菌別，因此常會配合碳源利用法及,16S,序列比對之方式輔助鑑定。,所有送檢病例中,(,不包含恆春試驗所,),前三名症狀為肺炎症狀,26,例,(31.3%),、下痢症狀,24,例,(28.9%),、流死產及生殖道病變,22,例,(26.5%),。,19,送检牛羊病材分离之细菌性病原,所有細菌分離結果中以造成化膿病灶之,A.,pyogenes,比例最高,(15/33,45.5%),，原因可能包括引起之病灶明顯，所以採樣及細菌分離時目標明確；並且此菌可長於厭養環境及耐抗生素特性，當樣本污染及私用抗生素下，仍可利用厭氧將之分離出來。,據其他國家報告，反芻動物肺炎前,3,名應為,M.,haemolytica,、,P.,multocida,、,Histophilus,somni,。,20,送检牛羊病材分离之细菌性病原,反芻動物下痢依分離結果，以副結核分支桿菌最主，依照此菌特性，必然養殖場中有很大比例之次臨床期動物未被發現。,可能引起流產之細菌性病原包括布氏桿菌、彎曲菌等，本次結果中皆未分離到。,恆春試驗所牛羊的分離結果，除去常在菌,Str,.,bovis,II,後，前,3,名為,B.,pseudomallei,、,C.,pseudotuberculosis,、,P.,multocida,，可提供正確細菌性病原之參考資料。,21,送检牛羊病材分离之细菌性病原,謝謝聆聽,22,送检牛羊病材分离之细菌性病原,