无菌工艺验证培养基模拟灌装试验课件.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,*,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,1,2,3,|,4,2,|,Cont,tents,培养基灌装相关法规要求,如何设计培养基灌装方案,培养基灌装的评价与调查,常见问题及,FDA,483,缺陷,国家大容量注射剂工程技术研究中心,2,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,3,|,无菌药品基本理念,无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应,最大限,度,降低微生物、各种微粒和热原的污染。,生产人员的,技能,、所接受的,培训,及其,工作态度,是达到上述目,标的关键因素,无菌药品的生产必须严格按照,精心设计,并经验证的方法及规,程进行,|,处理或成品检验。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,3,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,空调系统,资质职责,公用设施,人员操作,生产设备,环境监控,容器密封,质量保证,|,质量控制,质量受权人,过程控制,4,|,无菌特性组成,清洁消毒,质量保证,更衣确认,人员卫生,文件体系,物料质量,无菌药品,风险分析为基础,国家大容量注射剂工程技术研究中心,4,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,5,|,培养基模拟灌装试验,培养基模拟灌装试验-使用培养基作为药品的替代,品（Placebo）进行无菌模拟生产，对无菌工艺进行,验证。,培养基灌装在某种意义上是一种挑战性试验，因为几乎在,所有情况下，微生物在培养基中的繁殖和生长要比在实际,产品中更容易,全面反映整个生产过程采用无菌工艺生产无菌产品,的能力。,|,各国药品法规要求的基本内容。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,5,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,6,|,培养基模拟灌装试验,相关法规要求,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,6,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,7,|,|,ng,US,FDA,和,EU,GMP,的要求,FDA,CGMP,无菌工艺药品指南,An,aseptic,processing,operatio,on,should,be,validated,using,a,microbiological,growth,mediu,um,in,place,of,the,product.,This,process,simulati,ion,also,known,as,a,media,fill.,EU,GMP,Annex1,无菌药品的生产,Validation,of,aseptic,processin,should,include,a,process,simulation,test,using,a,nutrient,t,medium,(media,fill).,国家大容量注射剂工程技术研究中心,7,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,8,|,2010,版,GMP,附录一：无菌制剂,第四十七条,无菌生产工艺的验证应包括培养基模拟灌,装试验。,应根据产品的剂型以及培养基的选择性、澄清度、浓度,和灭菌的适用性选择培养基。应尽可能模拟常规的无菌生产工,艺，包括所有对产品的无菌特性有影响的关键操作，及生产中,可能出现的各种干预和最差条件。,培养基模拟灌,|,装试验的首次验证，每班次应连续进行,3,次,合格的试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更,后，应重复进行培养基模拟灌装试验。培养基模拟灌装试验通,常应按生产工艺每班次半年进行,1,次，每次至少一批。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,8,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,9,|,2010,版,GMP,附录一：无菌制剂,培养基灌装容器的数量应足以保证评价的有效性。批量较小的,产品，培养基灌装的数量应至少等于产品的批量。培养基模拟灌装,试验的目标是零污染，应遵循以下要求：,（,1,）灌装数量少于,5000,支时，不得检出污染品；,（,2,）灌装数量在,5000,至,10000,支时：,有,1,支污染，需调查，可考虑重复试验；,有,2,支污染，需调查后，进行再验证。,（,3),灌装数量超过,10000,支时：,|,有,1,支污染，需调查；,有,2,支污染，需调查后，进行再验证。,（,4,）发生任何微生物污染时，均应进行调查。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,9,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,批量（瓶）,3000,允许染菌的数量（瓶）,0,10,|,注册申报要求,SFDA,化学药品注射剂基本技术要求（,2008,）,培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的,一种系统验证,是判断无菌保证水平的关键手段,工艺验证工作主要为培养基灌装验证试验。灌装的批数、批,量与合格标准见表,1,。,|,4750,6300,7760,1,2,3,国家大容量注射剂工程技术研究中心,10,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,fo,fo,|,11,|,相关指南文件,PDA,关于培养基模拟灌装的技术报告,PDA,Technical,Repo,ort,No.,28,Process,Simulation,Testing,or,Sterile,Bulk,Pharmaceutical,Chem,micals,Revised,Supplement,2006,PDA,Technical,Repo,ort,No.22,1996,Process,Simulation,Testing,or,Aseptically,Filled,Products,）,国家大容量注射剂工程技术研究中心,11,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,12,|,培养基模拟灌装试验,试验设计,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,12,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,13,|,1,、试验涵盖范围,模拟必须包括产品成为无菌状态后的所有的无菌生产工艺步,骤,(,如转运,灌装,装载,/,卸载,冻干,加塞,轧盖,),模拟必须包括所有的无菌处理,(,如灌装线的设置,无菌连接,人员的干扰操作,),培养基灌装研究不包括非无菌混合操作或产品的除菌工艺,(,如无菌过滤,),培养基的制备和灭菌可以与产品的,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,13,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,14,|,2,、多产品简化试验思路,一条灌装线生产多个产品时，,根据下列因素可被划分为不,同的类型组,灌装工艺,不同的容器、密封方式,由此选出两个或更多个在下列方面能涵盖所有其它相关产品,的产品：,容器的大小、开放或密封的设计,灌装线的速度和干预,|,冻干,贮存容器的形式、转移的方式,推荐使用类似于矩阵式试验设计，选择产品和工艺,国家大容量注射剂工程技术研究中心,14,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,15,|,模拟灌装实验的设计,包装容器代表性选择：,对于多规格、容器形状不同的灌装生产线，应对不同大,小、形状的容器进行评估。,多数可能选用最大敞口直径的容器和最低生产线速度；,有时也会选择容易倒落的小型容器用来代表最差情况，,因可能需要更多的人工干预；,当不能兼顾,|,时，应考虑选取有代表性的几种容器进行培,养基模拟灌装试验。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,15,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,材质与安装质量,16,|,3,、验证与确认,稳定的产品质量,性能确认及工艺验证（,PQ/PV,）,可靠的设备性能,运行确认（,OQ,）,安装确认（,IQ,）,|,用户需求与设计,设计确认（,DQ,）,国家大容量注射剂工程技术研究中心,16,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,17,|,验证开始前的准备工作,设备设施确认,HVAC,及压空系统（或氮气）的确认,设备的在线清洗和灭菌,CIP,P,SIP,灭菌工艺验证,湿热、干热灭菌工艺,除菌过滤验证及空气过滤器的完整性检测,容器,/,胶塞密封完好性测试,人员培训,|,无菌更衣确认,环境监控符合要求,国家大容量注射剂工程技术研究中心,17,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,18,|,4,、模拟灌装实验的设计,最差状况：高于或低于正常范围的条件限度，与,正常生产条件相比最有可能造成工艺或生产失败,的条件。,宜尽可能模拟实际无菌生产过程，并包括产品加,工中的“最差状况”。其设计应具有以下几方面,的代表性：,时间代表性,|,运行代表性,包装容器代表性,国家大容量注射剂工程技术研究中心,18,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,19,|,模拟灌装实验的设计,时间代表性：,应选择正常工作阶段的不同的时间间隔，并考虑可能,的中断、换班。培养基灌装应持续足够长的时间，覆,盖允许的工艺时间限度，并包括实际加工中最常发生,的操作。,操作代表性：,根据实际生产中可能发生的动作或操作来设计培养基,|,中发生的、允许和禁止的干预事件的一览表，并在试,验中进行模拟。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,19,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,20,|,模拟灌装实验的设计,运行代表性：,应模拟包括“最差状况”的生产条件下进行培养基灌装。,（如：最大干预次数、模拟的加卸料、可能的生产线停机的,纠正、灌装针,/,管的调整和更换、人工轧盖、在线过滤器的,更换以及所用人员的数量等）,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,20,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,21,|,最差条件的设计（,1,）,储存时间的验证,灌装设备、部件、储罐、无菌物料、药液在实际灌封前,能够放置的最长时间,1.,灌封设备、灌封部件、储罐、无菌物料需要再灭菌（除菌,）的时间间隔,用超出单项验证后确定的最长保存时间的设备部件、储,罐、无菌物料参与培养基灌装试验,2.,产品从无菌过滤到灌封加塞完成所需要的时间,无菌过滤后存放在中间储罐内的培养基模拟实际生产时产,品的最大储存时间后再灌封,产品在灌装后密封前的储存时间,国家大容量注射剂工程技术研究中心,21,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,22,|,最差条件的设计（,2,）,最长灌装的持续时间,最保守的设计：在培养基灌封试验中，模拟生产用时最长的,批量所需要的时间，其中包括正常的干扰时间（换班、设备,维修）。（一般不采用）,其他的设计：,1,1.,在生产完成后接着进行培养基灌封实验,2.,为了减少灌封瓶数，在每批试验开始、中间及结束前均灌装培养基，,|,任何干扰操作都应在培养基灌装时进行,在正常生产过程中所需的最长时间，包括可能发生的事件，人员的,换班等,国家大容量注射剂工程技术研究中心,22,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,拟一次,23,|,最差条件的设计（,3,）,干预的设计,所有干预都应是预先设定和进行记录,正常的,每班次都会发生（灌封线装配，称量调节，加胶塞,/,铝盖，处理倒瓶，中控取样，环境监测，手工补充轧盖等）,非正常的,非正常情况才会发生（设备故障，灌封线堵塞，轨,道调节，拆卸,/,替换破损的部件）,SOP,中应列出哪些干预是容许的，非正常的干预至少每年模,干预的次数应该等于正常生产时发生的次数,国家大容量注射剂工程技术研究中心,23,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,设备组装,加入胶塞,取出卡住的胶塞,取走倒下的玻瓶,手工装载到冻干机,放置热电偶,环境监测,-,放置和取走培养皿,操作人员进出及更衣,24,|,干预举例,冷冻干燥工艺,不同区域玻瓶破碎,设备故障,更换灌装针头,灌装针头位置调整,自动称量故障,自动加塞故障,国家大容量注射剂工程技术研究中心,24,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,25,|,5,、培养基灌装试验的频率,新建的或生产工艺、设备、人员等重大变更后的无菌工艺生,产线，必须经至少连续三批合格的培养基灌装试验,常规生产条件下的再验证频率，培养基模拟试验通常按生产,工艺,每班次半年进行,1,次,，每次至少一批。,生产线生产不同规格的无菌产品，则应考虑不同规格的产品,的因素，培养基灌装试验的最差状况进行评估。,|,员，保证每年至少参加一次成功的培养基灌装试验。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,25,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,26,|,变更后培养基模拟灌装试验,变更及其评估,对产品或生产线的每一种变更，均应根据书面的变更控,制系统进行评估,。,如果通过评估认为此项变更会影响到无菌生产工艺产品,的无菌保证水平，则需要进行增补性培养基模拟灌装实,验。,比如，设施或设备的变化、生产线配置的变动、人员重,|,环境监控异常和无菌检查结果阳性等。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,26,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,培养温度,27,|,6,、实验用培养基和培养温度的选择,培养基选择,适应广谱微生物生长，包括细菌和真菌,较好的澄明度，较小的粘度,液体培养基易于除菌过滤,常用培养基：,3,大豆胰蛋白肉汤（,TSB,）,厌氧培养基仅在特殊情况下使用（,FTM,）,干粉工艺：具备与干粉产品流动性能相似的无菌,TSB,干粉或,无菌安慰剂粉末（,PEG,乳糖,甘露醇,),20-35,，目标值,2.5,，不少于,14,天；如选择两个温度，,则每一温度下至少培养,7,天，从低温开始。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,27,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,28,|,惰性替代粉末的选择,惰性替代品选择要求：,无活性、易灭菌,易溶解,对培养基促进生长作用无副作用,易灌装，流动性要好（培养基流动性较差）,常用替代品,聚乙二醇,Polyethylene,glycol,系列,(PEG,6000,PEG,8000,）,甘露醇,Mannitol,，乳糖,Lactose,等,|,事先需要伽马辐照灭菌（钴,60,，用量约,15,25kGy,）,应进行无菌性、抑菌性和溶解度的测试,国家大容量注射剂工程技术研究中心,28,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,29,|,培养基的适应性检查,培养基适应性检查,应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。本检,查培养基灌装试验前或同时进行。,必须用药典要求的标准微生物或工厂特定微生物（分离,自环境人员监测及无菌试验）来进行,通常为枯草芽孢杆菌、白色念珠菌，菌液浓度控制约在,100,个菌,/ml,加入的菌液应小于,100,CF,FU/,单位,|,生长良好，判该培养基的适应性检查符合规定,国家大容量注射剂工程技术研究中心,29,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,30,|,7,、灌装体积与数量,单位灌装体积,选择的体积要使培养基能适当地接触容器内表面，并且适当翻,转或旋转，接触到密封件的内表面。,每只容器的灌装体积一般不少于总容积的,1/3,，但也要考虑保,留,25,%,至,40,%,的顶空能确保肯能存在的微生物获得足够的氧,气生长。,对于厌氧灌装,:,用惰性气体代替氧气，,并使之完全充满容器,灌封试验数量,综合考虑统计学要求和实际生产批量。,|,5000,瓶，则培养基灌封至少应为实际生产线的最大批次量。,PIC,(3000,瓶,),：如果正常生产的批次量低于,3000,瓶，则培养,基灌封至少应为实际生产线的最大批次量。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,30,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,31,|,8,、培养基模拟灌装实验的阳性对照,培养基阳性对照实验：,随机选取已经,完成,14,天培养的灌装培养基样品,，按照药典要求,常用枯草芽孢杆菌、白色念珠球菌或工厂特定菌作为阳性菌,将每个菌种准备含,100cfu,u/0.1ml,的菌液，每个菌种接种,2,支,培养基样品，同时并平板计数（双份）,对真菌在,20-25,C,下培养，对细菌在,30-35,C,下培养，每天,检查，,5,天内需有生长迹象,国家大容量注射剂工程技术研究中心,31,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,I.,32,|,MP,9,、培养基灌封实验的合格标准,FDA,、,EU,GMP,和中国新版,GM,无菌附录：,灌封量,10000,瓶时，若有,1,瓶污染，需彻底调查；若有两瓶,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,32,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,污染,瓶数,0,1,2,3,4,5,95%,置信,限值,3,33,|,培养基灌封实验的合格标准,PIC,及,SFDA,研发注册标准：在,95,5%,置信限时污染率低于,0.1%,。,计算公式：污染率,=,(95%,置信限值,)/(,灌封容器数,),100%,污染瓶数与,95%,置信限值间的关系,6,7,8,9,10,|,4.74,6.3,7.75,9.15,10.,.51,11.84,13.15,14.43,15.71,16.9,6,国家大容量注射剂工程技术研究中心,33,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,菌空气破真空（不使用惰性气体），全压塞、轧盖,1.,2.,3.,4.,1.,2.,3.,34,|,10,0,、举例,-,冻干工艺,方式A：模拟灌装、装载/卸载过程，缩短放置时间,容器内灌封好培养基，以半压塞状态装入冻干机,冻干机内部分抽真空，在室温放置一定的时间，不进行冷冻。,用无菌空气破真空（不使用惰性气体），全压塞、轧盖,缺点:真空度不能过高，不能照成培养基沸腾。,方式B：以经稀释的培养基模拟冻干过程,容器内灌封好经稀释的培养基，以半压塞状态装入冻干机,模拟冻干过程，直到容器内的培养基大致达到正常浓度。用无,|,缺点：耗时长，需开发特殊的冻干程序，营养支持性不均一，,影响微生物的存活力。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,34,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,1.,2.,35,|,冻干工艺,方式C：模拟灌装、装载/卸载过程，缩短放置时间，不抽真空,或补充空气,容器内灌封好培养基，以半压塞状态装入冻干机,冻干机不抽真空或者边抽真空边补充无菌空气。在室温放,置一定的时间，不进行冷冻。,注意：用培养基完全模拟冻干工艺非常困难,(,如时间长、真空、低温,等,),应该首先识别有污染风险的活动，并加以模拟,(,如未完全密封小瓶,|,小瓶必须不被冷冻,注意确保培养基的需氧状态,国家大容量注射剂工程技术研究中心,35,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,注意事项,36,|,举例,-,无菌粉末分装工艺,方法,A,在灌装线上手工或增加灌装设备，先灌装液体培养基，再分装无,菌替代品粉末后压塞、轧盖。,方法,B,在灌装线上手工或增加灌装设备，先分装无菌替代品粉末，再灌,装液体培养基后压塞、轧盖。,方法,C,先灌装干粉培养基，再手工或增加设备加入注射用水,所用惰性剂或干粉培养基需事先经过辐射灭菌。,常用替代品粉末有聚乙二醇、甘露醇、乳糖等。,应对添加替代品的量和对培养基适应性的影响进行研究和评估。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,36,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,37,|,举例,-,无菌原料药,原料药生产工艺中常有结晶步骤，因结晶过程有相变产生，也,使模拟过程存在困难。,可用一种液体介质模拟结晶过程，让其流经除菌过滤器和所有,管路加到结晶罐中。,若结晶过程有加晶种的操作，模拟过程中也应有这样的操作，,晶种也可用模拟介质代替。,为使晶体粒度均匀，有些结晶过程需要降温，在模拟过程中一,般不应降温，因在低温下抑制微生物生长。,离心、洗涤和干燥环节一般采用常温，以免温度对微生物的影,响。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,37,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,38,|,11,、环境及人员监测,环境和人员监测按照相应的规程和方案进行，应涵盖无菌,工艺各工序，频次数与正常生产一致。包括：,空气粒子数,沉降菌,浮游菌,表面微生物,人员监测,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,38,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,39,|,12,、其他,建议要点,模拟灌装全过程建议应进行,录像,，便于事后调查分析和原因查,找，也有利于员工培训。如有可能，应有专人观察和记录操作,人员的有意或无意的干预行为及时间。,在试验设计时，有时还要考虑人员状态，如,夜班,人员的注意力,往往不够集中。,培养基灌封后可以进行生产，但要,等培养基灌封合格后产品才能放行,|,样品或按照托盘应进行,编号,，以便,于调查和追溯,国家大容量注射剂工程技术研究中心,39,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,40,|,培养基模拟灌装试验,结果分析与调查,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,40,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,41,|,培养后检查,目检培养基是否浑浊，是否有微生物生长,要由经过培训、并且有资质能够发觉微生物生长迹象的,人员进行检查,如果在两个温度下培养时，必须在温度切换时进行中间,判读,可疑单位立即交给质量控制的微生物,人员，进行进,|,一步分离培养和鉴定。,根据染菌单位数，判断是否达到验,证接受标准,国家大容量注射剂工程技术研究中心,41,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,污染,率,|,42,|,灌装污染曲线图,1,污染可能来源于液体培养基,(,如与培养基贮罐非无菌连接，,在循环管路中受到污染，微生,物持续繁殖,),。在灌装结束时，,应注意保持培养基贮罐处于无,菌密闭状态，在储罐内取样测,试，可以核实这样的假设。,灌装过程(时间或灌装数量),国家大容量注射剂工程技术研究中心,42,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,污染率,|,43,|,灌装污染曲线图,2,表明污染仅发生在试验初,期，可能污染来自起始的,生产设备中（,胶塞容器,/,轨道,计量泵,/,针头,),，在,灌装过程中污染被部分或,全部“清洗掉”。,灌装过程(时间或灌装数量),国家大容量注射剂工程技术研究中心,43,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,染率,污,|,灌装过程(时间或灌装数量),44,|,灌装污染曲线图,3,出现一个尖峰（在短时段的一,些产品被污染）可能与在灌装,过程中不正确操作或干预导致,的污染有关。,很关键的是必须知道被污染产,品灌装的准确时间，以及当时,实施的干预措施（灌装操作过,程的录像是非常有用的），这,样会比较容易调查到原因。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,44,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,率,污染,灌装过程(时间或灌装数量),45,|,灌装污染曲线图,4,同样可能是某个如果错误,的干预措施所造成的，不,同的是该污染影响到液体,的管路,/,回路时（如培养,基贮罐的变化，泵或针的,|,替换），导致微生物持续,繁殖。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,45,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,污染率,|,灌装过程(时间或灌装数量),46,|,灌装污染曲线图,5,非常不幸的是，这种现象,是最常出现的，也是最难,调查的。如果这种现象在,多次试验中反复出现，可,能说明这个工艺存在不确,定因素，需要采取根本的,措施（如,更衣,/,着装、消,毒剂和气流模式的改变,),国家大容量注射剂工程技术研究中心,46,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,47,|,失败调查流程,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,47,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,人员样,表面样,环境空气样,2.,对培养基污染的评估,培养条件,对污染培养基的菌种必须进行,鉴定,确定培养基污,|,染可能发生的时,间,3,3.,惰性粉末无菌测试的评估,48,|,培养基灌装失败调查,1,1.,生产环境的监控数据评估,4.,对气体取样结果的评估,压缩空气,氮气等,5.,对水的微生物的评估,纯水,WFI,6,6.,对培养基评估,培养基的配制和消毒记录,培养基预培养的条件,培养基预培养的结果,中,国家大容量注射剂工程技术研究,48,心,48,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,1.,粒子监控评估,粒子测试监控情况,层流风速,报警记录,烟雾测试,历史的监控情况和趋势,2.,清洁和消毒评估,设备的清洁,|,消毒,3.,消毒剂的配制检查,来源或配制比例记录,效期及效力,49,|,培养基灌装失败调查,2,4,4.,人员的评估,灌装间最多的人数,操作人员连续工作时间,其它人员,更衣情况,手消毒及污染可能,中,5,5.,干预操作的评估,频次，是否有非预期干预,危险的程度,污染的样品与干预的关联,国家大容量注射剂工程技术研究,49,心,49,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,51,|,培养基灌装失败后续措施,调查结论与风险评估,培养基灌装实验结果有效,暂停生产，直至确定污染来源并采取有效的纠偏措施。,对培养基灌封实验后和此前所生产的产品，进行风险评估,培养基灌装实验结果无效，重新进行培养基模拟灌装,实验,无菌灌装区的物理条件不满足要求,|,后续措施,根据调查情况，采取纠偏措施后，进行一批或多批的培养,基模拟灌装试验。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,51,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,52,|,要点提示：,任何失败的样品都应单独进行分离培养和鉴定，因为,可能不只有一个污染源。,人员与环境等监控的微生物也应进行分离鉴定，并与,污染菌相比较。,避免试验室引入新的污染，导致误判,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,52,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,53,|,培养基模拟灌装试验,常见问题及缺陷,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,53,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,54,|,常见问题,如何判断哪些灌装样品不需要进行培养？,破损，影响到密封性的样品,完整性测试（泄漏测试）失败的样品,文件中明确规定予以丢弃的中控测试样品,设备自动剔除的样品,文件中明确规定，每次干扰后应予手工剔除的样品,（规定应详细、明确，并需证明其可操作性和稳定可,信性）。,剔除的样品应进行记录注明丢弃原因,国家大容量注射剂工程技术研究中心,54,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,55,|,常见问题,是否需要厌氧工艺的模拟灌装实验？,如果工艺中存在冲氮气等惰性气体操作时,如果在环境监测样品或无菌试验中检出厌氧菌,有公司认为，即使常规无菌工艺，也应定期使用硫乙醇酸,盐培养基进行厌氧工艺模拟实验，或在模拟过程中进行培,养基的切换。,培养基灌装试验中的样品是否需要在培养过程中进行,|,不需要。培养基灌装的样品应在开始培养前进行操作，使,培养基充分接触到内部各个表面，开始培养后不应再进行,反转等干扰。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,55,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,56,|,常见问题,如何对培养基灌装试验中的干预进行设计？,考虑到最差状况,涵盖整个生产周期，包括换班、连续生产等,所有干预应经预先批准和文件化，干预描述、发生时间、频,率、持续时间、受影响的瓶数等,常规干预每次培养基灌装都要模拟，非常规干预可每年一次。,培养基灌装试验是否要模拟所有生产过程？是否可,以分段进行模拟试验？,|,菌过滤以后。,可以，比如冻干工艺，可以把无菌灌装和冻干模拟分开；粉,针工艺中可把加注培养基与粉剂分装分开。但都需要有明确,方案和判断标准。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,56,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,57,|,常见问题,什么情况下，可以认为培养基灌装试验无效？,阳性对照失败,工艺过程中在无菌操作区发生重大偏差，如停电，高效过,滤器损坏等,在培养基灌装试验中，是否必须进行录像？录像的保,存期需要多长？,不是必需的，录像仅是一种可选的辅助调查和培训手段。,如果采用了录像措施，也仅作为公司内部的资料（如同内,部审计报告），不必向检查员出示。,公司应有文件规定，什么情况下要进行录像，录像的储存,时间等,国家大容量注射剂工程技术研究中心,57,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,58,|,Warning,Letter,Your,firm,failed,to,design,and,perform,an,adequate,aseptic,process,simulation,(i.e.,media,fill),based,upon,the,same,controls,used,for,routine,production,.,We,note,that,t,the,(b)(4),was,observed,(b)(4),during,ac,ctual,production.,However,this,intervention,was,per,rformed,only,once,during,the,media,fill,in,2009.,公司的培养,|,基灌装验证未根据日常生产的控制进行设计,和完成，如在实际生产中观察到的一些干预操作,国家大容量注射剂工程技术研究中心,58,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,th,59,|,Warning,Letter,The,written,procedur,res,related,to,the,production,simulations,“media,fills”,-,conducted,to,validate,e,your,capability,to,aseptically,produce,s,small,volume,parenteral,(SVP),were,found,to,be,inadequate.,The,media,fills,for,this,line,did,not,represent,actual,operations,used,in,he,aseptic,production,of,ampoules,and,vials.,培养基灌,|,装没有模拟实际的生产过程。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,59,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,60,|,Warning,Letter,-,A,routine,production,of,a,(b)(4),Injection,vials,lot,would,take,approximately,(b)(4),hours,to,be,filled.,Your,written,pro,ocedures,for,routine,production,require,tha,at,an,intervention,take,place,every,(b)(4),minu,utes,for,fill-weight,verification,measurements,.,SOP,规定每几分钟就要对装量进行测试，但是模拟,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,60,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,61,|,Warning,Letter,The,process,simulatio,ons,(media,fill),do,not,represent,actual,production,operations,for,your,sterile,API.,The,proces,ss,simulation,performed,by,your,firm,in,July,20,009,failed,to,include,simulation,of,the,routine,interventions,performed,in,a,typical,l,campaign,of,13,batches,.,培养基灌装验证没有反应实际无菌,API,的生产过程。,|,常干预的模拟,。,国家大容量注射剂工程技术研究中心,61,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,溶液。,62,|,Warning,Letter,Placebo,mediums,should,be,evaluated,for,their,ability,to,support,growth,.,Their,placebo,used,in,the,process,simulation,is,sod,dium,phosphate,in,different,forms,(solution,and,anhy,ydrous),and,sodium,chloride,solution.,培养基灌装所用的介质，没有评估其对微生物的抑菌,影响。培养基灌装所用的材料是磷酸钠和次氯酸钠的,国家大容量注射剂工程技术研究中心,62,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,63,|,Warning,Letter,Placebo,mediums,should,b,be,evaluated,for,their,inhibitory,effect,on,microor,rganisms.,Your,response,does,not,indicate,that,your,firm,uses,beta-lactamase,to,inhibit,the,effect,of,antib,biotic,residue,in,the,production,line,during,proc,cess,simulation.,没有考虑可能存在的头孢残留对培养基中微生物的影响,|,国家大容量注射剂工程技术研究中心,63,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,|,影响。,64,|,Warning,Letter,Gases,used,during,proc,cess,simulation,should,be,evaluated,for,their,inhib,bitory,effect,on,microorganisms.,Your,response,states,that,the,nitrogen,used,in,the,pro,ocess,simulation,is,removed,by,the,test,membrane,d,during,filtration.,没有评估模拟过程中使用的气体（氮气）对微生物,国家大容量注射剂工程技术研究中心,64,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,65,|,Any,Ques,stions,？,谢谢！,|,Email,Address：gejunyou,国家大容量注射剂工程技术研究中心,65,无菌工艺验证培养基模拟灌装试验,