食用菌栽培课件22.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,食用菌栽培课件22,第四节 消毒 disinfection,创造局部相对无菌空间，为此就得采用物理或化学方法对局部空间进行消毒，使飘浮的大部分微生物致死。就是净化空间。,在栽培前为了改善栽培场地，旧菌种培养场的环境卫生进行空间毒。,一、常用的消毒,药剂,二、空间消毒,方法,三、培养料的,消毒,消毒药剂disinfection medication,1.高锰酸钾(KMnO4),这是强氧化型杀菌剂。深紫色晶体，易溶于水。能将细胞酶氧化，失去活性，常用0.1%0.2%溶液对床架、器皿、用具和皮肤表面消毒；2%5%溶液可在24小时杀死芽孢，浓度3%可杀死厌氧菌。随配随用。,2.过氧化氢(H2O4)双氧水。无色液体。其消毒原理在于使菌体蛋白酶的-SH氧化为-S-S-，酶失去活性，菌体死亡。,市场销售商品为30%或3%水溶液，常用1%浓度消毒器皿、用具和皮肤；在组织分离时，用20%溶液浸13分钟进行表面消毒。,下一页,消毒药剂medication,3.漂白粉,主要成分是次氮酸钙Ca(OCL)2,属于氧化型杀菌消毒剂。呈白色粉末状、有强烈氯臭。,杀菌原理是，分解时释放出氯和初生态氧，氧和氯的联合作用，侵入细胞内，使菌体蛋白发生氧化，失去活性。,常用2%5%溶液用于墙、地、床架和器具表面消毒，也用于空间喷雾消毒。,漂粉精也是次氯酸盐。其杀菌原理与之相同。常用浓度400mg/L。该杀菌剂呈碱性，易破坏衣物纤维，有腐蚀性。要求现配现用，否则有效氯挥发。,下一页,消毒药剂,4.,福尔马林(CH2O)是37%40%的甲醛水溶液。,无色透明，有强烈的刺激气味。属于还原性杀菌剂，0.1%0.25%的甲醛溶液，在612小时内能杀灭细菌的芽孢及病毒。,杀菌原理是甲醛与菌体的氨基酸结合，使蛋白质失去活性。,主要用于熏蒸，喷雾消毒，还可用于防腐，浸泡标本。,下一页,消毒药剂,5.石炭酸(苯酚 C,6,H,6,O),低温下的苯酚为无色或白色针状，块状，或三菱形晶体，有特殊气味和腐蚀性。在空气中易氧化变为红色，熔点4243。65以上能与水任意混合。,石炭酸可杀死微生物的营养体。高浓度下可裂解并穿透细胞壁，使菌体蛋白质凝聚沉淀；低浓度下可使细胞的主要酶系统失去活性。,一般用5%石炭酸水溶液作消毒剂。配制时，先用热水溶化再加入所需水量。,下一页,消毒药剂,6.来苏儿(C,6,H,4,CH,3,OH),是表面活性物质的消毒剂，含50%煤酚皂液。,常用1%3%溶液擦洗接种箱，无菌室的墙、地，或用于手、用具浸泡(2分钟)消毒。来苏儿消毒能力是石碳酸的四倍。,7.乙醇(C,2,H,5,OH),表面活性物质的消毒剂，也称酒精。无色透明液体。市售有75%、95%和无水乙醇(99.8%)。70%75%杀菌力最强。杀菌原理引起菌体蛋白质变性丧失活力。,下一页,消毒药剂,8.新洁尔灭(C,21,21H,28,NBr),这是阳离子型表面活性物质杀菌剂。化学名称溴化二甲基十二烷基苄基酸铵。,该品为淡黄色胶体状，具有芳香气味，极若，易溶于水，溶液澄清，呈碱性反应，摇振时能产生大量气泡，具有表面活性作用，耐热、耐光、稳定。,杀菌原理是通过阴阳离子电荷的结合，破坏菌体膜结构改变细胞壁的透性，使菌体肿胀死亡。,新洁尔灭原液浓度为5%，常用0.25%浓度对手和器具表面消毒。现配现用。,下一页,消毒药剂,9.碘福(CH,2,NH,2,COOH),4,K,3,I,属于氧化型杀菌剂。有效碘4%、10%、16%的三种水剂。黄色，可溶于水。抗菌性广，对细菌、霉菌、病毒线虫都有杀灭作用。对人无毒，对金属腐蚀性小。,常用200ml/L洗手，5080mg/L器具消毒，50320mg/L空间喷雾。注意随配随用，防止碘挥发。,10.气雾消毒合,属于烟熏杀菌剂。DCCNA为主剂，辅以烟熏供热剂为载体，是袋装粉剂。,每立方米空间用2g半小时即可95%杂菌，无菌室用量34g/m,3,，灭菌30分钟。,下一页,消毒药剂,11.金星消毒液,是一种高效、广谱、快速无毒副作用的新消毒液。它对病毒、细菌具有很强的杀伤作用。防治效果优于讲过的多种消毒药剂。该药对金属腐蚀性强，不能高压灭菌，也不宜与其它化学药品混合。,常用的浓度10001500/L进行空间消毒。,12.石灰(CAO)、熟石灰、消石灰Ca(OH),2,最常用于场地消毒，菌房消毒。杀菌原理是白灰的腐蚀性强，将微生物的蛋白质变性破坏菌体膜结构改变细胞壁的透性。,使用方法100斤石灰水，1斤盐，0.2斤敌百虫喷雾，粉刷。菌房最理想的消毒方法。,下一页,消毒药剂,13.多菌灵(CaNaN3O2),纯品白色结晶，工业品为淡褐色粉末，不溶于水，产品多为5%或25%可湿性粉剂，化学性质稳定，300以上分解，遇碱性物质分解失效。对人畜毒性较低。,本品为高效、低毒、广谱内吸氨甲基酸脂类杀菌剂，残效期较长，能干扰病原菌细胞的有丝分裂，从而抑制和杀死病原菌。是目前菇类生产上允许使用的抑菌剂。,使用剂量0.2%0.3%。配料时将可湿性多菌灵溶解后先与米糠或麦麸均匀混合，使米糠或麦麸外裹上药剂，再和其它主、辅料混匀。这种做法是因杂菌往往是从含氮高的培养料中先发生的缘故。,14.苯来特(C14H16N4O3),本品为高效、低毒、内吸杀菌剂，对人畜毒性很低，施药后残留量低。纯品白色结晶，带有刺激性臭味，难溶于水，市售有50%可湿性粉剂。本品和托布津是国外批准用于蘑菇栽培的药品。使用同于多菌灵。,下一页,消毒药剂,15.甲基托布津(C,14,H,18,N,4,O,4,S,2,),本品为无色片状结晶，分解点172，白色或淡黄色固体，难溶于水，可溶于若干有机溶液。化学性质稳定。本品高效、低毒低残留、广谱内吸杀菌剂。,用0.2%粉剂拌料，或用10001500倍空间喷雾。,返回,空间消毒方法,space disinfection method,(一)化学药剂,喷雾,消毒法,用药液对空间或栽培菇舍的空间进行喷雾，使雾粒将飘浮尘埃 下降。,(二)化学药剂,熏蒸,消毒法,甲醛高锰酸钾氧化熏蒸法，气雾消毒盒熏蒸法。,(三),物理,消毒法,紫外线消毒，臭氧发生器消毒，辐射消毒法,。,(四)空间消毒,效果,检验,无菌室应定期进行空气污染情况检验，以了解消毒的效果，及时改进，提高接种的成品率。,化学药剂喷雾消毒法methods of chemical medication,一是用药液对空间或栽培菇舍的空间进行喷雾，使雾粒将飘浮尘埃的颗粒包容，在重力的作用下尘埃沉降，可达到净化空间的目的。其二，提高空间的相对湿度，提高后继的物理、化学方法消毒的效果。,常用的化学药剂 2%3%的来苏儿、2%5%漂白粉、0.25%新洁尔灭、5%石炭酸、320/L碘福、10001500/L甲基托布津、0.25%多菌灵、10001500/L金星消毒液。,这些药剂的空间喷雾量以每立方米空间不低于30ml为宜。,返回,化学药剂熏蒸消毒法,喷雾仅是初步净化空间的方法。由于接种箱内存放菌种接种工具，很难使喷雾药剂对各角落均起到消毒作用，因而就必须选用熏蒸使气体扩散的办法进行消毒。,1.甲醛高锰酸钾氧化熏蒸法,按每立方米空间10ml甲醛5g高锰酸钾的剂量，将甲醛倒入高锰酸钾的容器中立即氧化还原反应，产生刺性甲醛味，,进行消毒,。,2.气雾消毒盒焚烧熏蒸法,焚烧熏蒸是一种新式的,空间消毒,方法。根据消毒对象密闭的程度，使用量26g/m3空间。,甲醛高锰酸钾氧化熏蒸法 formaldehyde potassium permanganate oxidative fumigation&steaming,这种消毒方法应保持室温20以上，否则杀菌效果差。无菌室使用前置一小杯氨水，让其自然挥发，与过量的甲醛进行化学反应产生无味的乌洛托品也可以直接加热碳酸氢氨(化肥)5g/m3空间分解产生氨气，以达到减少刺激的目的。,这种消毒方法优点比较稳定，可以常期使用，费用低；缺点对人眼睛、嗅觉器官刺激过大，作用时间12小时以上才能有好的消毒效果。,甲醛高锰酸钾熏蒸法适合接菌箱、冷却室、菌种培养室、等场所的消毒，除密闭以外，其它场所在使用之前最好能事先冲洗。,返回,气雾消毒盒的应用applying multi-functional medical disinfection case,焚烧熏蒸是一种新式的空间消毒方法。根据消毒对象密闭的程度，使用量26g/m3空间。,使用方法将消毒盒放入一小碗中，将点燃的火柴插入，随即冒烟，熏蒸30分钟以上，使用之前环境喷雾增湿，熏蒸效果更好。,该方法适合于各种场所的消毒，只是用量不同。,返回,物理消毒法,physical sterilization,1.,紫外线,消毒,常用于接种箱、超净工作台、缓冲室等空间消毒净化。,2,臭氧,发生器消毒,主要用于接种箱无菌室空气流动性较差的小环境内的消毒。,3.,辐射,消毒法,利用波动或粒子在空间高速运动产生辐射能量进行消毒的方,法。,4.,煮沸,消毒法,利于热水煮沸消毒,紫外线消毒ultraviolet radiation sterilization,280nm、260nm波段的紫外线分别是蛋白质。核酸的吸收峰。紫外线一旦被活细胞吸收，将使蛋白质构造发生变化，细胞失去活性。紫外线的杀菌效果与波长、照度(超射物与灯距离成反比)、照 射时间有关。,其原理是，紫外线照射空气时，使3O,2,2O,3,产生臭氧，臭氧具有很强的消毒作用，但浓度过高对人的呼吸道产生不利的影响。紫外线对细菌消毒可靠，对霉菌的可靠性差。,返回,臭氧发生器消毒ozonizer sterilization,臭氧发生器主要是将220V的电源变成高占比的脉冲高压，通过臭氧元件，把空气中的O,2,变成O,3,(臭氧)，O,3,具有很强的消毒作用，能破坏微生物的细胞膜与核酸。,O,3,也是一种暂态物质，常温下能自然分解，还原成氧。,返回,辐射消毒法,radiation sterilization,辐射可分为电离辐射和非电离辐射两种。,、等射线以及中子、质子射线属于电离辐射。,杀菌原理是将被辐射物质的原子核周围的电子击出，引起继发电离，如使水电离成H和OH，它们与氧结合产生激烈的化或还原作用，使微生物细胞变质损伤或失活致死。,一般在一定范围内，射线的杀菌作用与剂量成正比 芽孢较营养体更耐辐射；微生物在干燥状态下比液体状态下更耐辐射；无氧参与比有氧参与更耐辐射，培养基中有还原剂比没有还原剂时更耐辐射。,返回,煮沸消毒法boiling sterilization,即将玻璃器皿，器具投入沸水中煮一段时间(至少20分钟以上)。,煮沸时间越长，消毒越彻底。,主要用于防止病毒、细菌扩散，在试验后废弃的培养物的洗涤。,返回,空间消毒效果检验,checking the efficiency of sterilization,平板检测法：用培养微生物常规PDA培养基，牛肉膏培养制成平板数只。在接种操作过程中打开平板，分别10、20、30分钟再盖好，其中一只不打开盖子作为对照，置于30培养箱培养3天，观察菌落出现数。按奥格梁斯计算法，每立方米空气含杂菌量,。,每立方米杂菌数,式中，A为平板面积(cm)，t为暴露于空气中的时间(min)，N为培养菌数。,通过计算可知空间存在的杂菌数。,一般要求平板开盖30分钟，菌落数不超过5个为合格。,返回,三、培养料的消毒compost sterilization,在生料或熟料栽培中，为了减少培养料所携带的微生物量，常采用其它化学药剂进行处理，也有采用物理方法进行。,(一)生、熟,石灰,消毒法,(二)药物消毒法,在夏季制种，或为了防止防止高温高湿对熟料栽培(袋)接种的污染，常在配方中添加多菌灵。,(三)巴氏消毒,常用于培养料预处理，培养料的消毒。,最后一页,熟石灰消毒法white lime sterilization,生、熟石灰二者均为碱性物质，常用生硬石灰粉和偏酸性培养料(如棉籽壳)混合，预湿，进行假堆，以提高培养料的pH,更重要的是，提高培养料的pH可以减少细菌和酵母菌的增殖，导致培养料酸败。,其二是通过生、熟石灰消毒还能降解部分培养料的纤维及破坏蜡质层(如稻草)。,返回,本节课结束 the end,谢谢!,