手术创伤对口腔黏膜细胞凋亡和增殖的影响及其临床应用的研究.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,手术创伤对口腔黏膜细胞凋亡和增殖的影响及其临床应用的研究,硕士研究生：尹小平,导 师：龚建平 教授,华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心,研究背景,营养支持到营养治疗,现代外科营养被认为是,20,世纪后半叶医学发展的重要里程碑,住院病人中约有,15-60,的患者存在营养不良,朱维铭,.,临床营养角色的转变：从营养支持到营养治疗,.,肠外与肠内营养,2009,16,（,1,）,:7.,李元新，黎介寿,.,肠内营养支持的进展,.,江苏临床医学，,2002,，,6(2):90-91.,ASPEN.Standards for nutrition support:hospitalized patients.Nutr Clin Pract,1995,10:208.,哪些病人个体存在营养不良而需营养支持？何时开始营养持,?,何时终止营养支持？,无选择的静脉高营养,（经验性方法）,PN+EN,1968-1975,生理,生化,营养 评价,?,生理,体重,体重身高指数,BMI,，皮脂厚度,TSF,，上臂围,AC,，,上臂肌围,AMC,等。,生化,血清前白蛋白、转铁蛋白、视黄醇结合蛋白等。,单纯应用身体测量指标进行营养评估准确性不易保证。,血清前白蛋白、转铁蛋白、视黄醇结合蛋白等不能特异性,反映,机,体的营养状态。,Lautz H U,Selberg O,Korber J,Burger M,Mul,ler M J.Protein calorie malnutrition,in liver cirrhosis.Clin Investig 1992;70:478-486.,Feldman M.The myth of serum albumin as a measure of nutritional status.Gastroenterology 1990;99(6):1845-1851.,?,龚建平，吴在德，裘法祖外科细胞分子生物学新世纪外科学的理论基础,中华实验外科杂志；,外科细胞分子生物学,研究生命与疾病的实质，即细胞间、细胞内的生物活性大分,子的物理、化学变化。,细胞的,凋亡与增殖是细胞最基本的生命活动。,细胞的凋亡与增殖都是主动的耗能过程，各种代谢底物的供,给状态会必将对细胞的,凋亡和,增殖产生直接影响。,proliferation,growth,apoptosis,protein,glucose,nucleic acid,fat,手术创伤应激，负氮状态，禁食因素的影响，导致患者术,后早期进入一个高分解代谢阶段，出现短期的急性蛋白质热量,型营养不良，与此同时各营养指标包括口腔黏膜细胞凋亡率和,增殖率均表现为明显的下降。,罗学来，周毅，胡俊波，杨传永，裘法祖，龚建平,.,不同营养状态对口腔粘膜细胞凋亡和,增殖的影响,.,Chin J Clin Nutr,，,2006,，,14,（,1,）：,3-6.,吴肇汉外科领域营养支持研究的新进展和方向中华实验外科杂志，,2004.21,：,517-518.,口腔黏膜细胞凋亡和增殖状态受到人体营状况的影响，,营养不良患者的口腔黏膜凋亡率和增殖率明显低于正常人，,并提出可对在体口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率检测对机体的,营养状况进行评判。,围手术期患者机体口腔黏膜细胞的凋亡、增生状态除,受营养因素的影响外，是否也同时受手术创伤的影响呢？,口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率检测对机体的营养状况,进行评判，必须排除手术创伤的潜在影响。,保留乳房的乳腺癌切除手术,10,例,乳腺癌根治术,13,例,VS,apoptosis,proliferation,方法,subG1,Ki-67,研究对象筛选,1,）手术前常规,生理、生化,评估无营养不良；,2,）年龄在,25-55,周岁区间女性；,3,）无肝肾功能不良、无代谢性疾患、无恶液质；,4,）无口腔局部疾患；,5,）围手术期基本能够正常饮食。,结 果,保留乳房手术组,（,10,例）,乳腺癌根治术组,（,13,例）,合计,女（例）,10,13,23,中位年龄（岁）,42,45,42,营养不良（例）,无,无,无,一般状况良好,(,例,),10,13,23,一般资料,用,Sub-G1,法测口腔黏膜细胞凋亡率,DNA,直方图,横轴为细胞核,DNA,染色的荧光强度，纵轴为细胞数。,M1,区域代表凋亡细胞。,图为一例保留乳房的乳腺癌切除术患者术前、术后的口腔黏膜细胞凋亡率。,Ki-67/DNA,双参数法检测口腔黏膜细胞增殖率口腔黏膜细胞,Ki67,染色散点图,横轴为细胞核,DNA,染色的荧光强度，纵轴为,Ki67,染色荧光强度。,R2,区域代表,Ki67,染色阳性的细胞。图为,1,例保留乳房的乳腺癌切除术患者手术前、手术后的口腔,黏膜细胞增殖率。,保留乳房的乳腺癌切除手术组和乳腺癌根治手术组之间手术前、手术后的口腔黏膜细胞凋亡率、增殖率比较,（,）,27.3290.53,27.510.61,27.010.46,27.360.50,15.980.36,16.040.55,16.250.25,16.240.64,凋亡率,增殖率,两种不同手术方式病人口腔黏膜细胞的凋亡,率,和增殖,率,，无论是手术前、手术后均无明显差异。,保留乳房的乳腺癌切除手术组和乳腺癌根治手术组组内术前术后口腔黏膜细胞凋亡率、增殖率比较,保乳手术组,根治手术组,每组病人在手术前、手术后，口腔黏膜细胞的凋亡率和增殖率无明显差异。,（,）,27.500.61,27.410.46,15.980.36,16.240.47,27.330.53,27.350.50,16.040.54,16.240.63,保留乳房的乳腺癌切除手术组和乳腺癌根治手术组之间手术前、手术后的营养指标的比较。,保留乳房手术组,（,10,例）,乳腺癌根治术组,（,13,例）,P,值,前白蛋白,（,mg,L,）,手术前,375.2477.38,360.4277.15,0.962,手术后,371.8673.81,379.0162.83,0.534,转铁蛋白,(g,L),手术前,3.130.30,3.200.29,0.920,手术后,3.180.34,3.220.36,0.671,视黄醇蛋,白,(mg,L),手术前,42.245.23,41.545.82,0.730,手术后,42.085.37,41.925.72,0.504,手术前,手术后,P,值,保乳手术,组（,10,例）,前白蛋白,375.2477.38,373.8773.81,0.983,转铁蛋白,3.140.30,3.180.34,0.736,视黄醇结合蛋白,42.235.23,40.085.368,0.748,乳腺癌根,治术组,（,13,例）,前白蛋白,360.4277.15,379.0462.84,0.476,转铁蛋白,3.200.29,3.220.36,0.405,视黄醇结合蛋白,41.545.81,41.925.72,0.736,保留乳房的乳腺癌切除手术组和乳腺癌根治手术组组内手术前、手术后营养指标的比较。,血清前白蛋白、转铁蛋白、视黄醇结合蛋白手术在前、手术后,两组间和两组内的比较,结 论,手术创伤对在体口腔黏膜细胞的凋亡和增殖状态无明显影响,结合既往研究结果，口腔黏膜细胞凋亡率和增殖率检测可作,为对机体的营养状况进行评判的,快速、准确手段。,致 谢,感谢尊敬的答辩主席及各位答辩委员的指导！,感谢我的导师龚建平教授在学习上的严格要求、悉心指导！,感谢同济医院胃肠外科中心各位老师在学习、生活上给予的极大帮助！,感谢同济医院甲状腺乳腺外科各位老师在实验上给予的极大支持！,感谢分子医学中心各位老师、师兄弟姐妹们热心帮助和鼓励！,感谢我的家人给我的巨大支持！,