博士课病理学1.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第一部分 细胞自噬、凋亡和坏死,细胞自噬、凋亡和坏死都属于细胞死亡的范畴。,细胞死亡与其增殖一样在保证生物体正常发育及维持成体细胞数量稳定等方面的作用都是不可缺少的。,第一节 自噬,什么是自噬？,自噬（,autophagy,）,:,是,Ashford,和,Poter,在,1962,年发现的细胞内存在的自我吞噬现象，是指细胞在饥饿和能量应激等状态下将自身的蛋白、细胞器和胞质进行包裹并形成囊泡，然后，在溶酶体中消化降解的过程。,自噬是一种多步骤、多程序、高度进化及保守的过程，普遍存在于酵母菌、线虫、果绳及哺乳动物等的机体中，在细胞维持正常代谢和生存中发挥着不可替代的作用。,3.,分子伴侣介导自噬：是指最先由胞质中的分子伴侣,HSP70C,和其辅助分子复合物识别并与蛋白质底物结合形成的分子伴侣,-,蛋白质复合物，该复合物与溶酶体膜上溶酶体相关蛋白,2A,（,LAMP2A,）的胞质侧结合，使底物去折叠。,还有，溶酶体内另一分子伴侣,HSP90,的结合使该复合物稳定，并在溶酶体膜转位。,4.,自噬的特异性：自噬又可分为非特异性自噬和特异性自噬。,非特异性自噬：主要是指饥饿时腹水的细胞通过溶酶体清除大量受损细胞器和蛋白的自噬。,特异性自噬：主要是指发生在特定情况下，如氧化压力、射线损伤、病原体侵袭等，通过线粒体、内质网、微粒体、脂质体、过氧化物酶体等所发生的自噬。,（二）自噬的形态特征,自噬前体：自噬的进化过程高度保守，它起始于细胞质,来源不明游离的杯状凹陷双层膜结构。,自噬体：自噬前体延伸包裹胞质及细胞器形成双层膜结构。,自噬溶酶体：自噬体通过胞内微管系统运输至溶酶体并与,之融合形成的。,作用：是将内容物在此降解成氨基酸、脂肪酸以及其,它小分子化合物。降解物用于细胞内再循环，维持细胞内,环境稳定。,溶酶体的超微结构与病理意义,溶酶体（,Lysosome,，,Ly,）是各种真核细胞所共有的消化系统，与细胞的一系列生物行为密切相关。,溶酶体的功能：具有吞噬和清除由于细胞损伤时的碎片、坏死组织等成分，是细胞内起主要的消化作用。还参与杀灭细胞内微生物的功能。主要功能有如下方面：,I,物质代谢作用：,Ly,水解,Pr,、脂肪、糖类被细胞利用。,II,保护作用：,Ly,膜具有抗,Ly,消化作用，分解衰老细胞。,III,其它：细胞发生，激素调节等均有,Ly,参入。,一、溶酶体的形态结构,溶酶体是由各种有膜包绕的小体或小泡，与许多细胞器难以区别。最可靠的鉴别方法是，溶酶体内含有酸性磷酸酶。溶酶体的功能活动状态分为三期：,1.,溶酶体前期,包括初级溶酶体、吞噬体及自噬泡。初级溶酶体为单层膜包裹的小体，基质呈均质状，尚未参与细胞内外的降解过程。初级溶酶体是由,ERE,及,Golgi,器产生的。,初级溶酶体可与次级溶酶体融合，对吞噬物进行消化处理，或将排除于细胞外。,第,97,图,溶酶体,溶酶体和被消化物（底物）接触的主要两种机制：,I,自噬过程（,autophugia,）,细胞自身的物质结构进入细胞内由双膜包裹的大泡，并被降解消化的过程。所形成的大泡为自噬泡。,II,异噬过程（,heterophagia,）,非细胞自身的物质，通过吞噬、胞饮，即入泡过程而进入细胞。吞噬细胞的表面有一些伪足样突起，可包裹细胞外异物，纳入细胞内，即吞噬过程。,第,98,图,自噬泡,箭头,2.,溶酶体期,包括自噬过程和异噬过程。可形成自噬溶酶体和异噬溶酶体。,3.,溶酶体后期,泡内未能被彻底消化的物质，则残留于胞质内，成为终溶酶体或残留小体。或通过出泡过程而被排除细胞外间隙。,溶酶体的整个变化过程：,1,）初级溶酶体：刚从,Gol,分离出来的囊泡，无作用底物，无消化功能，电,子密度低。,2,）次级溶酶体：自生,Ly,，作用底物为内源性来源衰老细胞器等。吞噬,Ly,，,作用底物为外源性细胞吞噬的物质。残体，不能被酶消化,的物质残留在,Ly,内。,3,）多泡体：是多个小泡由单位膜包裹形成的小体基质内含酶类。,4,）脂褐素：由单位膜包裹的不规则小体，内含脂滴等。,5,）髓样小体：外有膜包裹，基质内含丝网状或同心圆排列的膜性成分。多,见巨噬细胞、肿瘤细胞、免疫缺陷病细胞内。,第,99,图,溶酶体功能,模式图,第,100,图,肝细胞内的脂褐素颗粒,二、溶酶体内的酶类及其他成分,目前已知，溶酶体中含有,60,余种不同的酶，具有水解蛋白质、脂类和糖类的作用。除中性粒细胞终的嗜天青颗粒、血小板中的,Alpha,颗粒、精子（顶端）的特异性酶外，大多数细胞的溶酶体均含有共同的酶类。,溶酶体内含有一些金属离子，如铁、锰、铜等。其中铜在,Wilson,病时增多；含铁的铁蛋白对溶酶体酶的降解作用具耐受性；脂褐素为脂质及铁的复合物，不易被消化，常堆积于溶酶体内。,三、溶酶体的病理意义,1.,细胞内消化功能异常,细胞内消化时溶酶体起重要的作用。,1,）动脉粥样硬化症,在平滑肌细胞和巨噬细胞的溶酶体内有酯化的胆固醇堆积。,2,）,Wilson,病,铜以致密体的形态特征储积于溶酶体中。,3,）糖原储积病,由于肝、心、骨骼肌等细胞的溶酶体内相关酶的缺乏，糖原不能降解，堆积于溶酶体内。,2.,硅酸盐与巨噬细胞,硅石为工业环境中常见的粉尘成分，吸入肺后，可导致尘肺（硅肺）及肺纤维化。由于粉尘颗粒被巨噬细胞而沉积于溶酶体内，形成次级溶酶体，并破坏其包膜，进而杀死巨噬细胞。,3.,石棉与巨噬细胞,石棉为硅酸盐的通称石棉纤维（石棉小体）进入肺组织，致支气管壁逐渐形成胶原纤维，弥漫性的肺间质纤维化。,4.,溶酶体与晶体沉积病,体内代谢过程中可产生内源性晶形产物，引起炎症反应称为晶体沉积病。如痛风，致尿酸单钠的堆积；假痛风及软骨钙化症时有焦磷酸钙的沉积。,5.,中性粒细胞颗粒,其中的嗜天青颗粒为典型的初级溶酶体。电镜下为卵圆形的致密颗粒。此颗粒含有溶酶体酶、溶菌酶、髓过氧化物酶以及阳离子蛋白质，能杀灭细菌也能致组织损伤。,6.,水解酶的分泌与慢性炎症的发病机制,慢性炎症的病理过程，有单核巨噬细胞的聚集和活化。引起巨噬细胞活化的介质有：活化的,T,淋巴细胞产物、免疫复合物及补体裂解产物,C3b,。,第,102,图,胞质内可见含铜的溶酶体,第,103,图,上图的高倍,微体,肝细胞）,自嗜体,胰腺细胞,吞噬溶酶体,多泡体（上,X90.000,初级溶酶,下,脂褐素 （肾上腺皮质细胞,X50.000,肝细胞的髓样小体,（三）自噬的分子机制,主要是以酵母为模型，利用遗传工程方法解析获得，,在高等动物和真核细胞中高等保守。目前在酵母中已经发,现,20,多种自噬相关基因，这些基因在五个重要阶段协调控,制自噬这一复杂的生物工程。,自噬泡的形成,2.Atg12-Atg5-Atg16L,复合物,3.CL3,加工处理,4.,随机或选择性降解,5.,自噬溶酶体的形成,二、自噬的双重作用和生物学意义,生理功能：,可以参与如营养匮乏、生长因子损耗及低氧等代谢应激；作为细胞的“管家”，能清除有缺陷的蛋白或细胞器，阻止异常蛋白聚集体的细胞内积聚和清除细胞内的病原体。所以，自噬具有促进细胞死亡和保护细胞的双重作用。,（一）自噬促进细胞死亡,当自噬的活跃程度超过生理阈值，可以损伤大量细胞质中的细胞器和蛋白，使细胞发生功能障碍。导致细胞的不可逆性损伤。,自噬导致死亡被认为是,II,型程序细胞死亡。自噬可能通过降解细胞质内生存必需的因子或选择性降解生存必需的调节分子或细胞器来完成调控程序性细胞死亡的过程。,（二）自噬对细胞的保护作用,实验表明，自噬能够抑制细胞死亡。,自噬作为一种质量控制机制，能清除细胞质内聚集蛋白和受损的细胞器，有效的阻止应用蛋白在细胞内聚集造成的细胞毒性，维持细胞的存活。,自噬作为保护机制,是一种相当保守的过程，从酵母到哺乳动物细胞自噬均发挥着保护功能。在饥饿状态下，细胞通过自噬溶酶体降解膜质成分和蛋白质产生游离脂肪酸和氨基酸，这些成分被重新利用，为氧化还原和线粒体合成,ATP,提供底物，促进蛋白质的合成，从而维持细胞的生命活动。,第二节 细胞程序性死亡和凋亡,程序性细胞死亡,是依机体生理需求腹水的，当然它不应该给机体带来损伤。,凋亡,（,apoptosis,）一词来自希腊语，原指枯萎的树叶从树上掉落。,组织上的细胞凋亡,是一种以凋亡小体形成的特点，不引起周围细胞损伤，也不引起周围组织炎性反应的单个细胞的死亡。,一、凋亡的特征与发生机制,（一）凋亡细胞的形态特征,(,找照片,),凋亡：一般表现为正常细胞群体中单个细胞的死亡。,光镜下,，单个凋亡细胞与周围细胞分离，细胞核染色质浓集呈强嗜碱性致密球状（核固缩）或染色质重新集中分布于核膜下，胞质浓缩，嗜酸性增强。,电镜下,，凋亡细胞首先出现核的致密化，染色质浓缩，沿核膜分布，然后逐步分裂成碎片，同时，细胞器失去水分，发生浓缩。,凋亡小体,：凋亡细胞的细胞膜发生皱缩、凹陷，染色质变得致密，最后碎裂成小碎片。进一步发展，细胞膜将细胞质分割包围，形成多个膜结构完整的泡状小体，即凋亡小体。,细胞凋亡和细胞坏死的超微结构形态比较,细胞凋亡,荧光显微镜下,电子显微镜下,电子显微镜下,（二）凋亡细胞的生物学特征,1.Caspase,的激活,凋亡的特征是一系列,caspase,家族成员的激活。,Caspase,属于半胱氨酸蛋白酶，是细胞凋亡发生过程中的关键酶，在信号转导途径中一旦被激活，就能将细胞的蛋白质降解，使细胞不可逆地走向死亡。,2.DNA,断裂,细胞凋亡时细胞核内的,Ca2+,、,Mg2+,依赖性核酸内切酶活化，活化的核酸内切酶将,DNA,链在核小体见连接区切成缺口，是细胞膜内,DNA,首先切割成,50-300kb,长的,DNA,片段，再断裂为,180-200bp,及其倍数的小片段。,3.,凋亡细胞的细胞膜改变及巨噬细胞识别,凋亡细胞的细胞膜特征性变化可使巨噬细胞对其识别及清除。,（三）细胞程序性死亡的发生机制,程序性死亡过程可分为,起始,和,执行,两个阶段。,在起始阶段,，细胞接受来自不同途径的信号，催化激活,caspase8,9,等，启动死亡程序。,在执行阶段,，触发执行,caspase3,6,7,等，降解细胞关键的细胞组分。,细胞凋亡起始阶段接受,线粒体信号,途径和,死亡受体信号,途径,二、凋亡的生理和病理学意义,生理学意义：,1.,细胞凋亡与胚胎发育,从胚泡期的内细胞群和滋养层，到出生后都有细胞程序性死亡及凋亡的发生。,2.,程序性细胞死亡、细胞凋亡与激素依赖组织的重塑,月经周期、更年期、哺乳期等激素的依赖性,3.,程序性细胞死亡、细胞凋亡与免疫,T/B,淋巴细胞分化发育过程中,4.,细胞凋亡与细胞数量,程序性细胞死亡、凋亡控制着机体的细胞数量,5.,细胞凋亡与细胞损伤,当细胞受到严重损伤，尤其是,DNA,损伤，而自身修复系统无法修复时，则要通过程序性死亡清除，避免突变细胞增殖而导致畸变及肿瘤发生。,病理学意义：,1.,细胞凋亡与肿瘤,因为增殖、分化、凋亡三者相互协调，共同调节维持正常组织细胞的生长平衡。如果细胞凋亡受抑，细胞增殖与死亡见的平衡调节被破坏，且不能重新恢复，细胞死亡率就会下降，细胞数目就会不断增加，表现出增殖优势，这是肿瘤形成的重要机制之一。,2.,细胞凋亡与艾滋病,HIV,感染导致,CD4+,淋巴细胞减少的原因是细胞凋亡异常。,第三节 坏死,坏死,（,necrosis,）：是指活体内局部组织、细胞的意外死亡,一、坏死的形态特征和类型,（一）坏死的形态学特征,1.,细胞核变化：,是细胞死亡的主要标志,1,核固缩（,pyknosis,2,核碎裂（,karyorrhexis,3,核溶解（,karyolysis,2.,细胞质和细胞膜变化,细胞质因,RNA,丢失及蛋白变性酸性减弱，与酸性染料伊红的亲合力增强，致嗜酸性增强。当细胞器被酶消化时可变为虫蚀状或空泡样。,3.,间质变化,间质对损伤的耐受性大于实质细胞。,（二）坏死的类型,1.,凝固性坏死（,coagulative necosis,蛋白质变性凝固且溶酶体酶作用较弱时，坏死区呈灰黄、干燥、质实状态，凝固状。,发生部位：常发生心、肝、肾、脾,病因：缺血、缺氧、细菌毒素、化学腐蚀剂,病变特点：坏死与健康组织间境界较明显；镜下坏死区细胞结构消失，而组织轮廓仍保存,干酪样坏死：,病灶中含脂质较多，坏死区呈黄色，状似干酪；镜下坏死区无结构红染物，为彻底的凝固性坏死,心肌细胞,干酪样坏死,肺结核，干酪样坏死,2.,液化性坏死（,liquefactive necrosis,由于坏死组织中可凝固的蛋白质少，坏死后很快因酶性分解而变成液态。,常发生脑（含脂质多,和胰腺（含蛋白质多,组织,3.,特殊类型死亡,包括干酪样坏死、坏疽、脂肪坏死和纤维素样坏死,（三）坏死的结局,1.,溶解吸收,2.,分离排出,3.,机会,4.,包裹、钙化,二、坏死的生物机制和病理学意义,（一）生物机制,细胞是机体的基本功能单位，细胞死亡是生命的基本过程，对多细胞生物的发育和自稳平衡极为重要。,多数细胞凋亡,由基因调控，是主动的、有序性的细胞死亡，即,程序,性细胞死亡。,坏死,则是一种由化学、物理或生物等因素伤害引起的细胞死亡现象。,坏死并非是一个无序过程，也具有一定的规律性，有,程序性坏死,这一名称。,程序性坏死细胞,有以下特点：,1.,有坏死细胞的形态学改变，早期可观察到细胞膜破裂；,2.,线粒体膜电势缺失；,3.,坏死过程中细胞可有自噬现象；,4.,可伴有活性氧类（,ROS,）增加；,5.,该过程不受凋亡抑制剂影响，但能被一种小分子物质,Nec-1,（,necrostatin-1,）特异性抑制。,（二）生理和病理学意义,坏死与胚胎发育,凋亡在胚胎发育组织重塑过程中发挥作用。,2.,坏死与缺血性损伤,缺血是引起心、脑、肢体等器官损伤的重要原因。坏死性细胞凋亡是,心肌细胞缺血性损伤的重要机制之一。心肌缺血损伤中细胞死亡华为,细胞凋亡并存。,3.,坏死与兴奋性中毒和神经退行性疾病,神经发育过程中，生长因子缺失可造成神经营养因子信号通路传,导障碍，诱导神经细胞凋亡，从而清除过剩的神经元。,4.,坏死与感染性疾病,感染所致炎症反应是病原体与宿主免疫应答相互作用的结果。炎症反应可以由,坏死细胞引起，也可以是细胞死亡的原因。,5.,坏死与肿瘤治疗,坏死可能加速肿瘤细胞死亡或增强肿瘤细胞对抗癌药物的敏感性。,结束语,通过本章节的学习在科学研究方面的参考价值：,1.,有关自噬与肿瘤的发生发展,2.,细胞的凋亡与肿瘤的发生发展,3.,细胞坏死与缺血性疾病，如心肌梗死、脑梗死等关系,4.,细胞凋亡与神经系统变性疾病，如,Alzheimer disease,Parkinson disease,等多种神经系统退行性疾病的关系,5.,恶性肿瘤与坏死、凋亡，与多药耐药,一、什么是自噬？什么是凋亡？什么是坏死？简述自噬的双重作用和生物学意义。,二、简述凋亡的生理学和病理学意义。,