第5章-物质的跨膜运输.ppt

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,第五章 物质的跨膜运输,(Transport Across Cell Membrane),膜转运蛋白与物质的跨膜运输,离子泵和协同转运,胞吞作用与胞吐作用,本章内容提要,第一节 跨膜蛋白与跨膜运输,被动运输,(passive transport,）,主动运输,(active transport,）,胞吞作用,(endocytosis,）与胞吐作用（,exocytosis,）,跨膜运输方式：,膜转运蛋白（,membrane transport protein,）：,脂溶性分子、小的不带电荷的分子,选择性通透屏障，几乎所有小的有机分子和带电荷的无机离子都需要,脂双层的不透性：,通道蛋白（,channel proteins,）：介导被动运输；非特异性，其选择性在于溶质足够小和所带电荷合适；转运速率极高，接近自由扩散的理论值；无饱和性；门控性,01,载体蛋白（,carrier proteins,）：通透酶（,permease,）；介导被动运输与主动运输；特异性，具有酶的饱和动力学特征；构象变化,膜转运蛋白,(membrane transport protein,）：,通道蛋白和载体蛋白,载体蛋白构象变化,胱氨酸尿症：肾细胞不能将胱氨酸半胱氨酸转运到血液，从而在肾中形成胱氨酸结石,电压门通道（,voltage-gated channel,）,配体门通道（,ligand-gated channel,）,压力激活通道（,stress-activated channel,）,听毛细胞,孔蛋白,蛋白是存在于,细菌,质膜的外膜、,线粒体,和叶绿体的外膜上的通道蛋白,它们允许较大的分子通过,其中线粒体孔蛋白可通过的最大分子为,6000,道尔顿,而叶绿体的孔蛋白则可通过相对分子质量在,10,000,到,13,000,之间的物质。孔蛋白是膜,整合蛋白,它的膜脂结合区与其他的跨膜蛋白不同,是,折叠。,水分子的跨膜通道,水孔蛋白,(,aquaporin,AQP,),2003,年，美国科学家彼得,阿格雷和罗德里克,麦金农，分别因对细胞膜水通道，离子通道结构和机理研究而获诺贝尔化学奖。,水孔蛋白,被动运输,(passive transport,）,主动运输,(active transport,）,胞吞作用,(,endocytosis,）与胞吐作用（,exocytosis,）,跨膜运输方式：,Click to,add Title,简单扩散（,simple diffusion,）,协助扩散（,facilitated diffusion,）,被动运输（,passive transport,）,通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜转运，转运的动力来自物质的浓度梯度，不需要细胞提供代谢能量。,疏水的小分子或小的不带电荷的极性分子进行跨膜转运时，不需要细胞提供能量，也无需膜转运蛋白的协助。,简单扩散（,simple diffusion,）,饱和性,载体：离子载体、通道蛋白,转运速率高,运输速率同物质浓度成非线性关系,特异性,协助扩散（,facilitated diffusion,）,简单扩散与协助扩散的比较,A.,人工脂双层膜对不同分子的相对透性,;B.,不同分子通过人工脂双层膜的渗透系数（单位,cm/s,）,1,、脂溶性越高通透性越大；,2,、小分子比大分子易透过；,3,、非极性分子比极性容易透过；,4,、极性不带电荷的小分子可透过人工脂双层,;,5,、人工膜对带电荷的物质，如离子是高度不通透的。,人工膜对各类物质的通透率,Text in here,由载体蛋白所介导的物质浓度逆浓度梯度或电化学梯度由低浓度一侧向高浓度一侧进行跨膜转运的方式，需要与某种释放能量的过程相耦联。,由,ATP,间接提供能量的主动运输、次级主动运输,(secondary active transport),、协同运输（,cotransport,）,由,ATP,直接提供能量的主动运输、初级主动运输（,primary active transport,）、,ATP,泵（,ATP-drive pump,）,光能驱动（,light drive,）,主动运输（,active transport,）：,对比,比较三种物质运输方式的异同：,项 目,自由扩散,协助扩散,主动运输,运输方向,是否需要载体蛋白,是否消耗细胞内的能量,代表例子,顺浓度梯度,顺浓度梯度,逆浓度梯度,不需要,需要,需要,不消耗,不消耗,需要消耗,氧气、水、二氧化碳等通过细胞膜,葡萄糖通过红细胞,葡萄糖、氨基酸通过小肠上皮细胞膜；离子通过细胞膜等,第二节 离子泵与协同运输,P-,型离子泵,V-,型质子泵,F,型质子泵,ABC,超家族（,ABC superfamily,）,一、由,ATP,直接提供能量的主动运输、初级主动运输（,primary active transport,）、,ATP,泵（,ATP-drive pump,）：,四种类型的,ATP,驱动泵,1.,1,、动物细胞质膜上,2,、每消耗,1,分子,ATP,，泵出,3,个,Na+,泵进,2,个,k+,eCRM,3,、维持低,Na+,高,K+,的细胞内环境，维持细胞正常的生命活动，维持细胞的静息电位，维持细胞的渗透平衡，恒定细胞的体积,4,、地高辛、乌本苷等强心剂抑制其活性；,Mg2+,和少量膜脂有助提高于其活性；氰化物使,ATP,供应中断而停止泵的工作,1.,钠钾泵,(Na+-k+pump,Na+-k+ATPase),工作模式（,B,）示意图,Na+-K+,泵的结构（,A,）,4,1,2,3,所有真核细胞的质膜某些细胞器（如内质网、线粒体）膜上，尤其是肌细胞肌质网膜上,将,Ca2+,泵出细胞或泵入内质网腔，维持胞质内较低的,Ca2+,浓度,每消耗,1,分子,ATP,，转运,2,个,Ca2,2.,钙泵,(Ca2+pump,Ca2+-ATPase,）,Ca2+-ATPase,结构特点,钙泵功能,（,1,）红血球的细胞内外,Ca2+,的浓度梯度很大，可以 认为这是由存在于膜上的,Ca2+,依赖性,ATP,酶所引起的,Ca2+,的主动排出；,（,2,）肌浆网是靠膜上的,Mg2+,、,Ca2+ATP,酶来进行,Ca2+,的主动运输的；,（,3,）线粒体膜依靠电子传递能，以,11,之比摄取,Ca2+,和磷酸；,（,4,）小肠粘膜上皮细胞从食物中摄取,Ca2+,，此时维生素,D,是必需因子。所有这些都可称作钙泵。,其它,P,型离子泵,植物细胞、真菌（包括酵母）细菌细胞质膜上,1,、存在于动物细胞胞内体、溶酶体膜、破骨细胞和某些肾小管细胞质膜以及植物、酵母其他真菌细胞液泡膜上。,2,、利用,ATP,供能将细胞质基质中的质子逆浓度梯度泵入细胞器，以维持细胞质基质中性细胞器内的,pH,酸性。,3.V,型质子泵（,V-class proton pump,）、膜泡质子泵（,vacuolar proton pump,）,V,型质子泵（,V-class proton pump,）、膜泡质子泵（,vacuolar proton pump,）,1,、细菌质膜、线粒体内膜、叶绿体类囊体膜,2,、质子逆浓度梯度，将所释放的能量与,ATP,合成耦联起来,4.F,型质子泵,(F-class proton pump),、,H+-ATP,合成酶、,F1F0-ATPase,F,型质子泵,(F-class proton pump),、,H+-ATP,合成酶、,F1F0-ATPase,1,、只转运质子,2,、在转运质子的过程中泵蛋白不形成磷酸化的中间体,V,型质子泵和,F,型质子泵与,P,型离子泵的区别,广泛存在于从细菌到人类各种生物体内；,细菌质膜上糖、氨基酸、磷脂肽的转运蛋白；,哺乳动物细胞质膜上磷脂、亲脂性药物、胆固醇其他小分子的转运蛋白；,在肝、肾、小肠的细胞膜上分布广泛，将毒物废物排出体内,5.ABC,超家族（,ABC superfamily,）,(ATP binding cassette superfamily),由,4,个“核心”结构域组成的结构模式：,2,个跨膜结构域（,T,），形成跨膜转运通道并决定每个,ABC,蛋白的底物特异性；,2,个胞質侧,ATP,结合域（,A,）。,利用水解,ATP,的能量将各种药物从细胞质内转运到细胞外,MDR,是第一个被发现的真核细胞,ABC,蛋白器，约,40%,患者的癌细胞内该基因过度表达。,多药抗性转运蛋白（,multidrug resistance protein,）：如,MDR1 protein,90%,30%,55%,耦联转运蛋白（,coupled transporter,）、协同转运蛋白（,cotransporter,）,同向转运蛋白,(sympoter),反向转运蛋白,(antiporter),二、由,ATP,间接提供能量的主动运输、次级主动运输,(secondary active transport),、协同运输（,cotransport,）,协同运输（,cotransport,）,由,Na+-K+,泵（或,H+-,泵）与载体蛋白协同作用，靠间接消耗,ATP,所完成的主动运输方式,动物细胞中常常利用膜两侧,Na+,浓度梯度来驱动。,植物细胞和细菌常利用,H+,浓度梯度来驱动。,1.,同向协同（,symport,）,定义：物质运输方向与离子转移方向相同,例：小肠细胞对葡萄糖的吸收伴随着,Na+,的进入。,某些细菌对乳糖的吸收伴随着,H+,的进入。,2.,反向协同（,antiport,）：,定义：物质运输方向与离子转移方向相反,例：,Na+,驱动的,Cl-HCO3-,交换，即,Na+,与,HCO3-,的进入伴随 着,Cl-,和,H+,的外流，如存在于红细胞膜上的带,3,蛋白；,线粒体,Na+,驱动的,Na+/H+,反向转运,H+,以调节细胞内的,pH,Glucose is absorbed by symport,Glucose is absorbed by symport,三、离子跨膜转运与膜电位,膜电位：,细胞质膜两侧各种带电物质形成的电位差。,静息电位：,是指细胞未受刺激时，存在于细胞膜内外 两侧的外正内负的电位差。主要由质膜上相对稳定的离子跨膜运输或离子流形成。,动作电位：,在刺激作用下产生的行使通讯功能的快速变化的膜电位。,极化：,静息电位是细胞内外相对稳定的电位差，质膜内是负值，质膜外围正值，这种现状叫极化,极化状态概念,极化,：细胞膜两侧的电位差在某些情况下会发生变动，使细胞膜处于不同的电位状态。细胞安静时膜两侧内负外正的状态称为膜的,超极化,：当膜电位向膜内负值增大方向变化,去极化,：膜电位向膜内负值减小方向变化,反极化,：去极化近一步加剧，膜内电位变为正值，而膜外电位变为负值,复极化,：细胞受到刺激后先发生去极化，再向膜内为负的静息电位水平恢复,第三节 胞吞作用与胞吐作用,胞吞作用,：通过细胞质膜内陷形成胞吞泡（,endocytic vesicle,），将外界物质裹进并输入细胞的过程。,胞吐作用,：将细胞内的分泌泡或其它某些膜泡中的物质通过细胞质膜运出细胞的过程,胞吞作用（,endocytosis,）与胞吐作用（,exocytosis,：又称膜泡运输、批量运输（,bulk transport,）。属于主动运输。,胞饮作用（,pinocytosis,）：胞吞物若为溶液，形成的囊泡较小，称为胞饮作用。胞饮作用形成的胞吞泡称胞饮泡（）,吞噬作用（,phagocytosis,）：胞吞物若为大的颗粒性物质（如微生物细胞碎片），形成的囊泡较大，称为吞噬作用。吞噬作用形成的胞吞泡称吞噬泡（）,胞吞作用,胞吞泡,胞饮泡,吞噬泡,胞饮作用吞噬作用的区别,网格蛋白有被小窝（,clathrin coated pit,）网格蛋白有被小泡（,clathrin coated vesicle,）的三种成分,网格蛋白（,clathrin,）：,3,个 二聚体形成的三角蛋白复合体（,triskelion,）,Dynamin:,一种小分子,GTP,结合蛋白,接合素蛋白,(adaptin),：,Structure of a clathrin coated vesicle,Model for the formation of a clathrin-coated pit and the selective incorporation of integral membrane proteins into clathrin-coated vesicles,通过笼形蛋白包被小泡介导的选择性运输,网格蛋白有被小窝（,clathrin coated pit,）网格蛋白有被小泡（,clathrin coated vesicle,）,网格蛋白有被小窝（,clathrin coated pit,）网格蛋白有被小泡（,clathrin coated vesicle,）,吞噬作用,受体介导的胞吞作用（,receptor mediated endocytosis,）,:,选择性浓缩机制（,selective concentrating mechanism,）,非特异型的胞吞作用,胞吞作用：根据胞吞的物质是否具有专一性,动物细胞内由膜包围的细胞器，其作用是运输由胞吞作用新摄入的物质到溶酶体被降解。,胞内体（,endosome,）：,3、,转胞吞作用（,transcytosis,）：受体被运至质膜的不同结构域，如具极性的上皮细胞,1,、大部分受体返回原来的质膜结构域,2,、受体下行调节（,receptor down-regulation,）,:,有些受体不能再循环，进入溶酶体被消化：表皮生长因子（,EGF,）结合的细胞表面受体，大部分在溶酶体被降解，导致细胞表面,EGF,受体浓度降低。,胞内体是膜泡运输的主要分选站之一,不同类型的受体具有不同的胞内体分选途径,胞吞作用的意义,营养物的内化,信号转导,质膜更新,LDL,的受体介导的胞吞作用,释放胆固醇和脂肪酸,LDL,通过受体介导的内吞作用进入细胞,示受体回到原质膜转胞吞作用,不同类型的受体具有不同的胞内体分选途径,转胞吞作用（,transcytosis,）,母鼠抗体从血液转运到奶汁,胞吐作用,组成型的外排途径（,constitutive exocytosis pathway,）,调节型外排途径（,regulated exocytosis pathway,）,1,、所有真核细胞,2,、连续分泌过程,3,、用于质膜更新（膜脂、膜蛋白）、胞外基质组分、营养或信号分子,4,、去限定途径（,default pathway,）：在,RER,上合成的蛋白质除某些有特殊标志的蛋白駐留在,RER,中或选择性地进入溶酶体可调节的分泌泡外，其余蛋白的转运途径：粗面内质网高尔基体分泌泡细胞表面,组成型的外排途径（,constitutive exocytosis pathway,）,1,、,特化的分泌细胞,2,、产生的分泌物（如激素、粘液或消化酶）,调节型外排途径（,regulated exocytosis pathway,）,复习回顾,一、被动运输：简单扩散、协助扩散,二、主动运输,1,.,由,ATP,直接提供能量的主动运输、初级主动运输、,ATP,泵,P-,型离子泵、,V-,型质子泵、,F,型质子泵、,ABC,超家族,V,型质子泵、,F,型质子泵与,P,型离子泵的区别,（,1,）只转运质子,（,2,）在转运质子的过程中泵蛋白不形成磷酸化的中间体,V,型质子泵与,F,型质子泵的区别：前者逆浓度梯度，后者顺浓度梯度,2,.,由,ATP,间接提供能量的主动运输、次级主动运输、协同运输,同向协同转运、反向协同转运,3.,光能驱动,三、,胞吞作用、胞吐作用,复习回顾,膜转运蛋白：,载体蛋白,、通道蛋白,从特异性、饱和性、竞争性、构象变化几个方面比较,