脂类与复合脂.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,第三章,脂类与复合脂,Lipids and Lipid Complex,1,1881,年，,Johann Thudichum,发现了鞘脂的功能，提出,Tay-Sachs,病系由脑苷脂降解缺陷引起。,1940,年间，,Konrad Bloch,和同事证明了胆固醇所有碳原子皆来自乙酰辅酶,A,。,脂类研究历史：,2,20,世纪,5060,年代，科学家已经揭示了脂类在储能物质和膜结构组分发挥重要生理作用。,6070,年代后，薄层层析和气,-,液层析技术迅速发展，为科学家认识脂类的特殊作用提供了有力工具，揭示了脂类在生物膜、转运、受体和信息转导中的作用。,3,第一节脂类概述,Introduction to Lipids,4,一、脂类是一类非均一化合物,（一）脂类包括脂肪和类脂,脂类,(lipids),：脂肪,(fat),和类脂,(lipoid),的总称，是一类不溶于水的生物分子。,脂肪：动物源性的甘油三酯,(triglyceride,TG),植物源性,TG,类脂：,胆固醇,(cholesterol,CHOL),胆固醇酯,(cholesterol ester,CE),磷脂,(phospholipid,PL),鞘脂,(sphingolipids),5,分类,含量,分布,生理功能,脂肪,甘油三酯,95,脂肪组织、血浆,1.,储脂供能,2.,提供必需脂酸,3.,促脂溶性维生素吸收,4.,热垫作用,5.,保护垫作用,6.,构成血浆脂蛋白,类脂,糖酯、,胆,固醇及其酯、磷脂,5,生物膜、神经、,血浆,1.,维持生物膜的结构和功能,2.,胆固醇可转变成类固醇激 素、维生素,D,3,、胆汁酸等,3.,构成血浆脂蛋白,脂类的分类、含量、分布及生理功能,6,（二）脂类的基本元素组成是碳、氢和氧,脂类的基本元素组成为碳,(C),、氢,(H),、氧,(O),，一些复合脂含有氮,(N),和其他元素。,脂类是一类非均一化合物，结构的不均一性可导致功能的多样性。,7,甘油三酯,(triglyceride,TG),甘油磷脂,(phosphoglycerides),胆固醇酯,FA,胆固醇,脂类物质的基本构成：,FA,FA,FA,甘油,FA,FA,Pi,X,甘油,X=,胆碱、水、乙醇胺、丝氨酸、甘油、肌醇、磷脂酰甘油等,8,（三）脂类是水不溶性生物分子,脂类组成的共同特征是含有不溶于水的长链脂酸或胆甾（基）。,H,H,H,H,H,A,B,C,D,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,C,O,(CH,2,)n,C,H,3,OH,长链脂酸,胆甾（基）,9,结构决定了脂类在溶剂中的溶解度，即,不溶于水,而,易溶于非极性有机溶剂,。但磷脂的结构中含有少量如羟基、氨基或磷酸等亲水基团，在体内微环境中，这些磷脂可带电荷，使其具有微弱的亲水性。磷脂的这种特性是其作为生物膜基本成分的基础。,10,（四）脂类有简单脂和复合脂,简单脂,：脂酸和醇类所形成的酯,如：甘油三酯,复合脂,：除脂酸、醇类化合物外还含有其他成分的醇脂、酸酯,如：甘油磷脂类,11,二、脂类可与糖、蛋白质形成脂复合物,（一）脂类与糖形成的复合物称为糖脂或脂多糖,是含糖而不含磷酸的脂类，其间通过糖苷键相连，也是两性分子，普遍存在于真核和原核细胞的质膜上。,糖脂,(glycolipid),：,12,半乳糖脑苷脂（,galactocerebroside,）,神经节苷脂（,ganglioside,）,鞘糖脂（,glycosphignolipid,，,GSL,）,脂多糖（,lipopolysaccharide,，,LPS,）,13,（二）脂类与蛋白质形成的复合物称为脂蛋白,脂类可与蛋白质有机结合形成,脂蛋白,(,lipoprotein,),血浆脂蛋白,脑脂蛋白,核蛋白类,(,nucleoprotein,),14,三、许多动植物性食物含脂肪和类脂,人体内脂类,的来源：,自身合成,利用小分子有机化合物合成，如甘油三酯、磷脂等。多为,饱和脂酸,和,单不饱和脂酸,。,食物供给,包括各种脂酸，其中一些,不饱和脂酸,，动物不能自身合成，需从植物中摄取。,15,食物名称,脂肪,(g),含饱和或不饱和脂酸的脂肪量,(g),胆固醇,(mg),含饱和脂酸,单不饱和脂酸,多不饱和脂酸,啤酒,0,0,0,0,0,红酒,0,0,0,0,0,茶,痕量,痕量,0,痕量,0,苹果,1,0.1,痕量,0.1,0,香蕉,1,0.2,痕量,0.1,0,葡萄,1,0.2,痕量,0.2,0,桃,1,痕量,痕量,痕量,0,梨,1,痕量,0.1,0.2,0,全牛奶,3.3,2,1.1,0.1,13.5,豆奶,2,0.3,0.4,1.1,0,米,2.8,1.9,0.8,0.1,11.1,面粉,6.8,1.1,2.9,2.8,0,菜籽油,100,14.3,64.3,21.4,0,玉米油,100,14.5,24.8,60.7,0,棉籽油,100,27.1,18.6,54.3,0,橄榄油,100,14,75.8,10.2,0,花生油,100,18.9,47.3,33.8,0,葵花籽油,100,12,20.2,67.8,0,一些常见食物的脂肪和胆固醇含量,*,以,100 g,食物计算,目 录,16,牛脂肪,100,50.2,43.6,4,109,猪脂肪,100,40,46,14,91,鸡脂肪,100,29.8,44.7,20.9,85,全鸡蛋,10,3,3.8,1.4,426,鸡蛋白,0,0,0,0,0,鸡蛋黄,29.4,8.8,11.2,4.1,1253,牛五花肉,25.7,11.5,13.1,1.1,112,牛全精肉,14.2,6.5,7.3,0.62,106,猪五花肉,8.8,3,4.4,1.5,59,猪全精肉,5.3,1.9,2.7,0.5,53,羊五花肉,24,11.1,10.4,2,120,羊全精肉,16,7.2,6.8,1.2,134,鲶鱼,18,4.4,8,4.2,81,蛤肉,1,0.2,0.3,0.5,34,螃蟹,2,0.3,0.3,0.7,100,大马哈鱼,6,1.5,1.9,2,55,大西洋沙丁鱼,12,1.7,3.9,5.7,142,牡蛎,2.4,0.8,0.4,1.1,53,花生仁,62,8.6,31,19.7,0,葵花仁,50,5.3,9.4,32.8,0,一些常见食物的脂肪和胆固醇含量,*,以,100 g,食物计算,目 录,17,第二节 甘油三酯,Triglycerides,目 录,18,一、脂酸是脂肪烃的羧酸,脂酸结构通式为,CH,3,(CH,2,)nCOOH,。,高等动植物中的脂酸碳链长度一般在,1420,碳之间，且为偶数碳。,19,（一）脂酸的系统命名是由母链混合物派生的,脂酸系统命名遵循有机酸命名的原则，将包括羧基碳原子在内的最长直链碳链作为主链，依其碳原子数称为,某烷酸,，并从羧基碳原子开始编号；若碳链中含有双键，从羧基端编号，称为,某碳烯酸,，并将双键位置写在其前面。,20,系统命名法,标示脂酸的碳原子数即碳链长度和双键的数目和位置。,编码体系,从脂酸的羧基碳起计算碳原子的顺序。,油酸,含,18,个碳原子，在第,9-10,位间有一个双键，被称为,9-,十八碳单烯酸,，写成,18:1(9),或,18:1,9,。,不饱和脂酸的命名,例如：,21,或,n,编码体系,22,亚麻酸,为,18,碳,3,烯多不饱和脂酸，其双键位置按碳原子编号分别为,9,、,12,和,15,；按字母编号分别为,-3,、,-6,和,-9,。根据碳原子编号命名为,9,12,15-,十八碳三烯酸,，写成,18:3(9,12,15),或,18:3,9,12,15,；按字母编号归类于,-3,不饱和脂酸，写成,18:3,-3,。,例如：,23,（二）脂酸主要根据其碳链长度和饱和度分类,1.,脂酸根据其碳链长度分为短链、中链和长链脂酸,短链脂酸：,碳链长度小于或等于,10,的脂酸,如：癸酸,(,碳链长度为,10),中链脂酸：,碳链长度介于,10,和,20,之间的脂酸,如：油酸,(,碳链长度为,18),长链脂酸：,碳链长度大于或等于,20,的脂酸,如：,DHA(,碳链长度为,22),24,2.,脂酸根据其碳链是否存在双键分为饱和脂酸和不饱和脂酸,(1),饱和脂酸的碳链不含双键,饱和脂酸,(saturated fatty acid),以,乙酸,(CH,3,-COOH),为基本结构，不同的饱和脂酸的差别在于这两基团间,亚甲基,(-CH,2,-),的数目不同。,25,习惯名,系统名,碳原子数和双键数,簇,分子式,饱和脂酸,月桂酸,(lauric acid),n-,十二烷酸,12:0,CH,3,(CH,2,),10,COOH,豆寇酸,(myristic acid),n-,十四烷酸,14:0,CH,3,(CH,2,),12,COOH,软脂酸,(palmitic acid),n-,十六烷酸,16:0,CH,3,(CH,2,),14,COOH,硬脂酸,(stearic acid),n-,十八烷酸,18:0,CH,3,(CH,2,),16,COOH,花生酸,(arachidic acid),n-,二十烷酸,20:0,CH,3,(CH,2,),18,COOH,山箭酸,(behenic acid),n-,二十二烷酸,22:0,CH,3,(CH,2,),20,COOH,掬焦油酸,(lignoceric acid),n-,二十四烷酸,24:0,CH,3,(CH,2,),22,COOH,常见的饱和脂酸,目 录,26,（,2,）不饱和脂酸的碳链含有一个或一个以上双键,单不饱和脂酸（,monounsaturated fatty acid,）,含一个双键的脂酸，如油酸,多不饱和脂酸（,polyunsaturated fatty acid,）,含二个或二个以上双键的脂酸，如,DHA,27,习惯名,系统名,碳原子数和双键数,簇,分子式,单不饱和脂酸,棕榈,(,软,),油酸,(palmitoleic acid),9-,十六碳一烯酸,16:1,w-7,CH,3,(CH,2,),5,CHCH(CH,2,),7,COOH,油酸,(oleic acid),9-,十八碳一烯酸,18:1,w-9,CH,3,(CH,2,),7,CHCH(CH,2,),7,COOH,异油酸,(Vaccenic acid),反式,11-,十八碳一烯酸,18:1,w-7,CH,3,(CH,2,),5,CHCH(CH,2,),9,COOH,神经酸,(nervonic acid),15-,二十四碳单烯酸,24:1,w-9,CH,3,(CH,2,),7,CHCH(CH,2,),13,COOH,常见的不饱和脂酸,目 录,28,习惯名,系统名,碳原子数和双键数,簇,分子式,多不饱和脂酸,亚油酸,(linoleic acid),9,12-,十八碳二烯酸,18:2,w-6,CH,3,(CH,2,),4,(CHCHCH,2,),2,(CH,2,),6,COOH,a-,亚麻酸,(a-linolenic acid),9,12,15-,十八碳三烯酸,18:3,w-3,CH,3,CH,2,(CHCHCH,2,),3,(CH,2,),6,COOH,g-,亚麻酸,(g-linolenic acid),6,9,12-,十八碳三烯酸,18:3,w-6,CH,3,(CH,2,),4,(CHCHCH,2,),3,(CH,2,),3,COOH,花生四烯酸,(arachidonic acid),5,8,11,14-,二十碳四烯酸,20:4,w-6,CH,3,(CH,2,),4,(CHCHCH,2,),4,(CH,2,),2,COOH,timnodonic acid(EPA),5,8,11,14,17-,二十碳五烯酸,20:5,w-3,CH,3,CH,2,(CHCHCH,2,),5,(CH,2,),2,COOH,clupanodonic acid(DPA),7,10,13,16,19-,二十二碳五烯酸,22:5,w-3,CH,3,CH,2,(CHCHCH,2,),5,(CH,2,),4,COOH,cervonic acid(DHA),4,7,10,13,16,19-,二十二碳六烯酸,22:6,w-3,CH,3,CH,2,(CHCHCH,2,),6,CH,2,COOH,目 录,29,哺乳动物不饱和脂酸按,编码体系分类：,簇,母体不饱和脂酸,结构,w-7,软油酸,9-16:1,w-9,油酸,9-18:1,w-6,亚油酸,9.12-18:2,w-3,亚麻酸,9,12,15-18:3,30,（三）脂酸的熔点与碳链长度和不饱和度有关,脂酸一个重要物理性质是熔点：,随着碳链长度的增加熔点逐渐增加；随着不饱和度的增加熔点逐渐下降。,细胞膜的脂质在各种环境温度下以液态形式存在对维持细胞膜的正常功能具有十分重要的意义。,31,（四）不饱和脂酸具有十分重要的生物学作用,1,人体不能合成必须从食物获得的脂酸被称为营养必需脂酸,亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸等多不饱和脂酸是人体不可缺乏的营养素，不能自身合成，需从食物摄取，故称,营养,必需脂酸,（,essential fatty acid,）,。,32,2.,多不饱和脂酸的衍生物具有十分重要的生物学活性,前列腺素,(,PG,),、,血栓噁烷,(,TX),和,白三烯,(,LT),是二十碳多不饱和脂酸花生四烯酸代谢产生的,类花生酸类物质（,eicosanoids,）,，具有十分重要的生理作用，几乎参与了所有细胞的代谢活动，并与炎症、免疫、过敏、心血管等疾病的病理生理过程有关。,33,二、甘油三酯是甘油的脂酸酯,甘油一酯,(monoacylglycerol),被,1,个脂酸酯化的甘油酯,甘油二酯,(diacylglycerol,DG),被,2,个脂酸酯化的甘油酯,34,含有同一种脂酸的甘油三酯称为,简单甘油三酯,(simple triacyglycerol),含有两种或三种脂酸的甘油三酯称为,混合甘油三酯,(mixed triacyglycerol),35,（一）甘油三酯是的主要储存形式,游离形式的脂酸：,很少量在血液中和白蛋白结合。,酯化形式的脂酸：,主要以甘油三酯,(,主要,),、胆固醇酯等于体内,或存在脂蛋白,大多数存在脂肪细胞中。,36,（二）甘油三酯的主要作用是为机体提供能量,1.,甘油三酯是机体重要的能量来源,物质,1g,产生的能量,TG,38kJ,蛋白质,17kJ,碳水化合物,17kJ,37,2.,甘油三酯是机体的主要能量储存形式,TG,合成的主要场所：,肝脏,TG,储存的主要场所：,脂肪组织,正常人体内的,脂肪,量可抵抗,2,3,个月的饥饿,糖原,储备量仅能提供少于,1,天的代谢需要,蛋白质,作为功能和结构分子，不能无序地进行分解代谢提供能量。,38,第三节磷脂和糖脂,Phospholipid and Glycolipid,目 录,39,一、含磷酸的脂类被称为磷脂,磷脂,(,phospholipids,),主要由,甘油或鞘氨醇、脂酸、磷酸,和,含氮化合物,等组成。,分类：,甘油磷脂,由甘油构成的磷酯,（体内含量最多的磷脂）,鞘磷脂,由鞘氨醇构成的磷脂,FA,FA,Pi,X,甘油,X,=,胆碱、水、乙醇胺、丝氨酸、甘油、肌醇、磷脂酰甘油等,FA,Pi,X,鞘氨醇,40,两类磷脂的分子组成,相同的组成成分,(,分子数,),不同或不尽相同的组成成分,磷酸,脂酸,醇类,其他成分,甘油磷脂,1,2,甘油,胆碱、乙醇胺、丝氨酸、肌醇等,鞘磷脂,1,1,鞘氨醇,胆碱,41,（一）由甘油构成的磷脂统称为甘油磷脂,甘油磷脂,又称为,磷酸甘油酯,(phosphoglycerides),，,其结构特点是甘油的两个羟基被脂酸酯化，,3,位羟基被磷酸酯化成为,磷脂酸,(phosphatidic acid;PA),。,42,R1,常为饱和脂酸,R2,常为不饱和脂酸,43,体内几种重要的甘油磷脂,HO-X,X,取代基团,甘油磷脂名称,水,H,磷脂酸,胆碱,磷脂酰胆碱,(,卵磷脂,),乙醇胺,磷脂酰乙醇胺,(,脑磷脂,),丝氨酸,磷脂酰丝氨酸,肌醇,磷脂酰肌醇,甘油,磷脂酰甘油,磷脂酰甘油,二磷脂酰甘油,(,心磷脂,),C,H,2,C,H,2,N,(,C,H,3,),3,+,C,H,2,C,H,O,H,C,H,2,O,H,C,H,2,C,H,2,N,H,3,+,C,H,2,C,H,-,C,O,O,N,H,3,+,-,H,H,H,H,H,O,H,O,H,O,H,O,O,H,O,H,H,C,H,2,C,H,O,H,C,H,2,O,-,P,O,O,C,H,2,R,2,O,C,O,C,H,C,H,2,O,C,O,R,1,O,-,44,（二）由鞘氨醇或二氢鞘氨醇构成的复合脂称为鞘酯,1,鞘脂是鞘氨醇的衍生物,鞘氨醇的氨基通过酰胺键与,1,分子长链脂酸相连形成,神经酰胺,(ceramide),，为,鞘脂的母体结构,。,鞘氨醇的羟基通过酯键与取代基团结合而成为不含甘油、仅含鞘氨醇或二氢鞘氨醇的脂类被称为,鞘脂,(sphingolipids),。,45,鞘氨醇以,18,碳最多，分子中含有双键，有顺反异构体，但自然界均为反式构形。,鞘氨醇或二氢鞘氨醇是具有脂肪族长链的氨基二元醇，具有,2,个羟基及一个氨基的,极性头,和,疏水的长链脂肪烃尾,。,极性头,疏水尾,46,X-,磷脂胆碱、,磷脂乙醇胺,单糖或寡糖,m,多为,12,，,n,多在,12,22,47,2,鞘脂包括鞘磷脂和鞘糖脂两类,按取代基,X,的不同,鞘磷酯,X=,磷酸胆碱或磷酸乙醇胺,鞘糖脂,(sphingoglycolipid),X=,葡萄糖、半乳糖、以及唾液酸,48,神经组织各种膜,结构的重要成分,49,二、甘油磷脂在体内具有重要的生理功能,（一）磷脂是构成生物膜的重要成分,脂质双层,是构成生物膜的重要成分和结构基础。,几乎所有类型的磷脂在细胞膜中均有发现，其中甘油磷脂中以,磷脂酰胆碱,(phosphatidylcholine),、,磷脂酰乙醇胺,(phosphatidylethanolamine),、,磷脂酰丝氨酸,(phosphatidylserine),含量最高，鞘磷酯中以,神经鞘磷酯,为主。,50,1.,卵磷脂存在于细胞膜中,卵磷脂,即磷脂酰胆碱是组成细胞膜最丰富的磷脂之一，其甘油,2,位含多不饱和脂酸，被水解后生成,溶血卵磷脂,。卵磷脂也储存着体内大部分,胆碱,。,51,2.,心磷脂是线粒体膜的主要脂质,心磷脂,与大量的线粒体内膜蛋白质，如细胞色素,C,氧化酶、细胞色素,C NADH:,泛醌,(ubiquinone,),等相互作用，激活某些酶，特别与氧化磷酸化和,ATP,的产生密切相关。,52,（二）磷脂酰肌醇是第二信使的前体,磷脂酰肌醇,-4,5-,二磷酸,(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,，,PIP2),甘油二酯,三磷酸肌醇,(inositol triphosphate,，,IP3),53,（三）缩醛磷脂存在于脑和心肌组织中,缩醛磷脂,(plasmalogens),结构与磷脂酰乙醇胺相似，其甘油的位以缩醛方式与脂酸结合，但乙醇胺可被胆碱、丝氨酸或肌醇取代，其在脑、心肌组织、红细胞和血小板等中含量较高。,54,当,缩醛磷脂,缺乏时，可导致罕见的,康,-,亨综合征,(rhizomelic chondrodysplasia punctata,RCDP),，又称点状软骨发育不良,(,常染色体显性型,),等疾病的发生。,55,（四）神经鞘磷脂和卵磷脂在神经髓鞘中含量较高,神经鞘磷酯,是构成生物膜的重要磷脂，常与,卵磷脂,共同存在于细胞膜的外侧。构成神经髓鞘的脂质种类众多，约占神经髓鞘干重的,97%,，其中卵磷脂为,11%,，神经鞘磷酯为,5%,。,56,第四节,胆固醇,Cholesterol,57,一,.,胆固醇是含环戊烷多氢菲的脂类,类固醇,(steroids),以环戊烷多氢菲为母体结构。,环戊烷多氢菲,58,不同类固醇的区别在于,C,3,羟基和,C,17,连接的侧链碳原子数,(,一般为,810,个碳原子,),及取代基团的不同，生理功能各异。,分子组成中含大量的碳氢、无氧或少氧而为,非极性化合物,。,59,动物胆固醇,(27,碳,),胆固醇仅存在于动物体内。,60,植物以,-,谷固醇,(,-sitosterol),为最多。,酵母含麦角固醇,(ergosterol),。,61,（一）胆固醇是含有羟基的固体醇类化合物,胆固醇仅含一个亲水性的羟基，疏水性极强，不溶于水而溶于非极性溶剂。,胆固醇熔点较高,(149),，在常温下以固态形式存在。,62,（二）胆固醇的羟基酯化为胆固醇酯,63,二、胆固醇是细胞膜的基本结构成分,胆固醇是动物细胞膜的基本结构成分之一，但亚细胞细胞器,(subcellular organelle),膜含量较少。,胆固醇因含环戊烷多氢菲环使得其比细胞膜中其他脂质成分更强直,(rigidity),。因此，胆固醇是决定细胞膜性质的一种重要分子。,64,三、胆固醇可转化为一些具有重要生物学活性的固醇类化合物,（一）胆固醇可转化为类固醇激素,人体内利用胆固醇为原料合成的主要类固醇激素,器官,合成的类固醇激素,肾上腺,皮质球状带,醛固酮,皮质束状带,皮质醇,皮质网状带,雄激素,睾丸,间质细胞,睾丸酮,卵巢,卵泡内膜细胞,雌二醇、孕酮,黄体,65,（二）胆固醇可转变为胆汁酸,胆固醇在体内代谢的主要去路是在肝细胞中转化成,胆汁酸,(,bile acid,),，随胆汁经胆管排入十二指肠。,胆汁酸具有促进脂类消化与吸收、抑制胆汁中胆固醇的析出等作用。,66,（三）胆固醇可转化为一些具有重要生物学活性的固醇类化合物,胆固醇,7-,脱氢胆固醇,皮肤,维生素,D,3,紫外线,胆钙化,甾,醇,(cholecalciferol),67,第五节,脂类提取分析技术,Extraction and Analysis of Lipids,68,一、脂的分离分析需要某些特殊技术,分析脂质在体内的分布及其含量可探索和了解脂质在生理、病理生理过程中的作用。,分析脂质时，往往采用一些在分析蛋白质、核酸和碳水化合物等水溶性分子所不常用的方法和技术。,69,分析脂质一般程序：,有机溶剂分离,酸、碱或酶处理,色谱法分析,70,二、脂提取需要有机溶剂,脂类为非极性有机化合物，不溶于水，需用,有机溶剂,进行提取。,不同的脂类用不同有机溶剂：,中性脂,用,极性较小,的有机溶剂的进行提取,膜脂,用,极性较大,的有机溶剂,如：乙醚、氯仿、苯,如：乙醇、甲醇,71,脂质提取采用的一般方法：,组织匀浆,萃取,氯仿,/,甲醇,/,水,(1:2:0.8,，,v/v/v),静置,出现分层,下层液,进一步分离和分析,甲醇,/,水相：蛋白质、碳水化合物等水溶性分子,氯仿相：有被提取的脂质等非水溶性分子,72,三、吸附色谱法可根据极性将不同的脂分离,吸附色谱法（,adsorption chromatography,）原理,脂质通过分离介质时，因脂质极性的不同，导致与固定相吸附能力的差异，当流动相洗脱时移动速度不一而分离。,固定相为硅胶,（,silica gel,）,流动相为氯仿,极性较高的脂质与硅胶的结合比非极性高的脂质紧密，氯仿洗脱时，混合脂质中的,非极性脂质移动速度大于极性较高的脂质而分离。,73,吸附色谱分析常用的两种方法：,柱层析,将硅胶装在层析柱中，待分离的脂质加样于硅胶顶部。,薄层层析（,thin-layer chromatography,TCL,）,将硅胶铺层于玻片上，待分离的脂质加样于硅胶一端，加样端与分离液氯仿接触，通过虹吸作用，氯仿从加样端向另一端移动。,74,四、气,-,液色谱法可分析挥发性脂衍生物的混合物,原理：,根据脂酸衍生物混合物在柱中的吸附性质和沸点的不同，极性越小的脂酸衍生物随气相先流出。,对象：,不同链长和不同不饱和度脂酸的混合物。,阶段：,1.,组织脂质的粗分离；,3.,通过气相色谱仪进行气化和分析。,2.,将待分离、分析的脂质进行转变成可进行气化反应的化合物；,75,以分析磷脂中脂酸为例：,磷脂标本中加入甲醇,/HCl,或甲醇,/NaOH,混合液,加热后脂酸与其结合的酯键断裂，转变成脂酸甲基酯,将脂酸甲基酯填料于气液相色谱柱中，通过加热使柱中的脂酸甲基酯气化,流动相（惰性气体，如氦气）气流通过色谱柱,分离，极性越小的脂酸衍生物随气相先流出,76,五、特殊的水解方法有助于脂质结构的分析,在分析脂质的过程中，往往需要对脂质分子的组成成分进行结构分析，需将脂类中特定部位的组份水解，结合薄层层析、气相色谱、高压液相色谱,(,high pressure liquid chromatography,HPLC),等分析方法可明确被分析脂类的结构。,方法：,稀酸和碱,强酸,酶解反应,甘油三酯、磷脂、固醇酯（,酯键,）,鞘脂（,酰胺键,）,特异的水解方法（如,磷脂酶,）,77,六、质谱法可用来分析脂的结构,质谱法,(mass spectrometry),可明确被分析的脂酸的碳氢链的长度、双键的数目及其位置乃至其构像的差异。,78,Water,Homogenized in chloroform/methanol/water,NaOH/methanol,Fatty acyl methyl esters,分析脂质一般程序示意图,目 录,79,