2025年江西省浮梁一中生物高三第一学期期末教学质量检测模拟试题.doc

2025年江西省浮梁一中生物高三第一学期期末教学质量检测模拟试题
考生须知：
1．全卷分选择题和非选择题两部分，全部在答题纸上作答。选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题的答案必须用黑色字迹的钢笔或答字笔写在“答题纸”相应位置上。
2．请用黑色字迹的钢笔或答字笔在“答题纸”上先填写姓名和准考证号。
3．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，在草稿纸、试题卷上答题无效。

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1．某植物为自花传粉闭花受粉的二倍体植物，育种工作者用适宜浓度的秋水仙素处理基因型为Aa（A对a完全显性）的该植物幼苗的芽尖，该幼苗部分细胞染色体数目加倍发育成植株（甲），从中选育出子代四倍体品系（乙）。下列相关叙述，正确的是（ ）
A．甲植株的根尖细胞中最多含有8个染色体组
B．乙植株的体细胞中最多含有8个染色休组
C．秋水仙素促进着丝点断裂导致染色体加倍
D．自然状态下，甲植株的子一代中隐性个体占1/36
2．生物钟是指生物体生命活动的内在节律性。哺乳动物的生物钟包括脑部的中枢生物钟和周围器官中的外周生物钟。实验发现，分别敲除两组正常小鼠肝脏和胰腺中的外周生物钟基因，小鼠分别表现出低血糖和糖尿病症状。下列相关叙述错误的是
A．参与中枢生物钟调节的神经中枢位于下丘脑
B．肝脏和胰腺细胞中不存在中枢生物钟基因
C．低血糖出现的原因可能是肝糖原分解受阻
D．敲除胰腺中的外周生物钟基因可能影响了胰岛素的分泌
3．下列有关血糖平衡调节的叙述，错误的是（ ）
A．血糖平衡的调节机制是神经—体液调节
B．垂体分泌促胰岛素，促进胰岛素分泌并调节相关激素的合成和分泌
C．胰岛素分泌增加会抑制胰高血糖素的分泌，胰高血糖素分泌增加会促进胰岛素的分泌
D．调节血糖平衡的中枢是下丘脑
4．棉花在生长发育过程中，多种激素起着调节作用。下列说法正确的是（ ）
A．棉花的生长素可由谷氨酸转变而来
B．高浓度的细胞分裂素能通过促进乙烯合成抑制棉花生长
C．棉花顶芽合成的2，4-D通过主动运输运输到侧芽
D．棉花的幼芽和幼根可以合成乙烯
5．某人从未感染过甲型H7N9流感病毒，下列有关叙述正确的是
A．流感病毒可以发生基因突变、基因重组和染色体变异
B．浆细胞可以接受流感病毒的刺激，使其分泌特异性抗体
C．一旦甲型H7N9流感病毒侵入该人体，记忆B细胞就会迅速增殖分化
D．抗体只能作用于细胞外的流感病毒，不能直接作用于细胞内的流感病毒
6．新“肥胖因子”——GPNMB蛋白是一种由肝细胞产生的蛋白，能被Adam蛋白酶剪切后以出芽的形式释放到细胞外。肝脏分泌的GPNMB蛋白能促进小鼠脂肪组织的脂质合成基因的表达，抑制机体产热，最终引起肥胖及胰岛素抵抗。下列叙述错误的是（ ）
A．GPNMB蛋白是由内质网和高尔基体参与加工和运输形成的，并以胞吐的方式分泌
B．运用抗体中和GPNMB蛋白会抑制脂肪细胞中特有的脂质合成基因的表达
C．用技术手段减少肝脏GPNMB蛋白基因的表达，可能会减轻肥胖并改善胰岛素抵抗的状况
D．推测GPNMB蛋白大量表达会诱导肥胖，增加脂肪组织重量
7．下列关于孟德尔两对相对性状杂交实验的叙述，正确的是（ ）
A．从F1母本植株上选取一朵或几朵花，在花粉未成熟时将花瓣掰开去雄
B．F2中出现的4种表现型，有3种是不同于亲本表现型的新组合
C．F1产生配子时非等位基因自由组合，含双显性基因的配子数量最多
D．F1产生的雌、雄配子各有4种，受精时配子的结合存在16种组合方式
8．（10分）甘薯由于能增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等越来越被人们喜爱。但甘薯属无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（ ）
A．利用组织培养形成的胚状体制作人工种子，解决种苗用量大、成本高的问题
B．利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和，充分利用遗传资源
C．利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高
D．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，大大缩短育种年限
二、非选择题
9．（10分）为了获得治疗癌症效果更好的抗体，科学家对鼠源抗体进行了如下的改造过程，请据图回答下列问题：

（1）图中通过基因________，对现有的鼠源抗体进行改造，这项技术称为___________。
（2）一个完整的基因表达载体除了图中给出的结构外，还应具有_______、________。
（3）目的基因表达载体导入浆细胞常用方法是____________________，为了使目的基因在受体细胞中稳定遗传，需要将目的基因插入到受体细胞的____________DNA上。
（4）让浆细胞与______________细胞进行杂交，并通过选择培养基以及____________和抗体检测，才能获得足够数量既能无限增殖又能产生嵌合抗体的细胞。
10．（14分）猕猴桃酒含有丰富的维生素、氨基酸和大量的多酚，可以起到抑制脂肪在人体中堆积的作用。猕猴桃醋营养丰富、风味独特，是一种上佳的调味品。制作猕猴桃酒和醋的步骤如下：
第一步：选用猕猴桃作原料，用清水冲洗去杂质，在破碎机内破碎成浆状，并向其中加入1．1～1．3%的果胶酶，在51-61℃的温度下保持1小时。
第二步：在果浆中加入5%的酵母糖液（含糖2．5%），搅拌混合，进行前发酵，时间约5～6天。
第三步：当发酵中果浆的残糖降至1%时，进行压榨分离，浆汁液转入后发酵。添加一定量的砂糖，经31～51天后，进行分离。
第四步：在猕猴桃酒液中加入2～11%的醋酸菌菌种，发酵21天左右即醋酸发酵结束。
回答下列问题。
（1）从细胞结构角度分析，酵母菌与醋酸菌的主要区别是_____________；从代谢的角度分析，酵母菌与醋酸菌的主要区别是____________________。
（2）向果浆中加入1．1～1．3%的果胶酶的目的是_______________________。
（3）猕猴桃酒发酵的过程中装置先通氧后密封，通氧的目的是_________________________________，密封的目的是__________________________________。
（4）若在猕猴桃酒液中添加适量葡萄糖，则醋酸菌将猕猴桃酒液中乙醇间接转化成乙酸的速率________（填“上升”“不变”或“下降”）。
11．（14分）下图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：

（1）EcoRⅤ酶切位点为，EcoRⅤ酶切出来的线性载体P1为_______末端。
（2）用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增获得目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸，载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为_______的脱氧核苷酸，形成P2，P2和目的基因片段在_______酶作用下，形成重组质粒P3。PCR技术中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是_____________________________________。 
（3）PCR技术可以临床用于诊断感染性疾病、肿瘤及遗传病等，它是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，其标准步骤为_______、退火、__________。
（4）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了___________________。若该目的基因是从cDNA文库中分离获取的蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体中，然后在_______为唯一含碳营养物质的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
12．大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。
（1）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
成分
含量
蛋白胨
1．4g
乳糖
3．4g
蔗糖
3．4g
K3HPO4
3．4g
显色剂
4．3g
琼脂
13．4g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到144mL
根据用途划分，该培养基属于___________（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中_________换成__________，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成___________。
（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是_______________________。
（3）培养大肠杆菌时，在接种前通常需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________。对已使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释13稀释度。各取4． 1mL已稀释13倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为33、36、37，则每升原水样中大肠杆菌数为____________。
（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是____________________________________。
参考答案

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1、B
【解析】
多倍体育种：原理：染色体变异，方法：最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制有丝分裂时纺缍丝的形成，染色体不能移动，使得已经加倍的染色体无法平均分配，细胞也无法分裂。当秋水仙素的作用解除后，细胞又恢复正常的生长，然后再复制分裂，就能得到染色体数目加倍的细胞。如八倍体小黑麦的获得和无籽西瓜的培育成功都是多倍体育种取得的成就。
【详解】
A、被适宜浓度的秋水仙素处理的是幼苗的芽尖，甲植株根尖细胞的染色体不会加倍，处于有丝分裂后期的根细胞中染色体组数最多即含有4个染色体组，A错误；
B、乙是经选育获得的四倍体品系，乙植株处于有丝分裂后期的体细胞中染色体组数最多即含有8个染色体组，B正确；
C、秋水仙素抑制纺锤体的形成，纺锤体与染色体的着丝点断裂无关，与染色体向细胞两极移动有关，C错误；
D、经秋水仙素处理的细胞，染色体数目加倍率不高，即甲植株多数枝条基因型为Aa，其自然状态下的子一代中隐性个体占1/4，少数枝条基因型为AAaa，其自然状态下的子一代中隐性个体占1/36，D错误。
故选B。
本题主要考查育种和染色体数目变异，考查学生的理解能力和综合运用能力。
2、B
【解析】
1、胰岛素通过促进葡萄糖进入肝脏、肌肉、脂肪等组织细胞，并且在这些细胞中合成糖元、氧化分解或者转化成脂肪；另一方面又能够抑制肝糖元的分解和非糖类物质转化为葡萄糖从而降低血糖浓度。
2、血糖含量升高时，胰岛素分泌增多，促进葡萄糖进入肝脏、肌肉、脂肪等组织细胞，并且在这些细胞中合成糖元、氧化分解或者转化成脂肪；另一方面又能够抑制肝糖元的分解和非糖类物质转化为葡萄糖。从而降低血糖。血糖含量降低时，胰高血糖素含量升高，促进肝糖元分解，促进非糖类物质转化为葡萄糖。
【详解】
A、下丘脑是生物节律的调节中枢，A正确；
B、肝脏和胰腺细胞中存在中枢生物钟基因，只是基因的选择性表达，B错误；
C、肝糖原分解受阻，血糖来源减少，可能出现低血糖，C正确；
D、由题可知，敲除胰腺中的外周生物钟基因小鼠患糖尿病，胰岛素分泌可能减少，D正确；
故选：B。
3、B
【解析】
血糖调节过程中，血糖浓度的变化可以直接刺激胰岛B细胞或胰岛A细胞，分泌相应的激素调节血糖浓度，也可以刺激血管壁的血糖感受器，产生兴奋，传导至下丘脑的血糖调节中枢，通过神经调节，维持血糖的相对稳定。
【详解】
A、血糖平衡的调节既有激素调节又有神经调节，A正确；
B、垂体不能分泌促胰岛素，胰岛B细胞分泌胰岛素受血糖浓度的直接调控和下丘脑的传出神经支配，B错误；
C、胰岛素具有降低血糖的作用，胰高血糖素具有升高血糖的作用，胰岛素分泌增加会抑制胰高血糖素的分泌，胰高血糖素分泌增加会促进胰岛素的分泌，C正确；
D、下丘脑具有血糖平衡调节的中枢，D正确。
故选B。
本题主要考查血糖平衡的调节，意在加深学生对血糖平衡调节的过程，参与血糖调节的激素的作用等的理解与记忆。
4、D
【解析】
五类植物激素的比较：
名称
合成部位
存在较多的部位
功能
生长素
幼嫩的芽、叶、发育中的种子
集中在生长旺盛的部位
既能促进生长，也能抑制生长；既能促进发芽，也能抑制发芽；既能防止落花落果，也能疏花蔬果
赤霉素
未成熟的种子、幼根和幼芽
普遍存在于植物体内
①促进细胞伸长，从而引起植株增高②促进种子萌发和果实发育
细胞分裂素
主要是根尖
细胞分裂的部位
促进细胞分裂
脱落酸
根冠、萎蔫的叶片
将要脱落的器官和组织中
①抑制细胞分裂②促进叶和果实的衰老和脱落
乙烯
植物的各个部位
成熟的果实中较多
促进果实成熟
【详解】
A、生长素可由色氨酸转变而来，A错误；
B、高浓度的生长素能通过促进乙烯合成抑制棉花生长，B错误；
C、2，4-D是人工合成的对植物生长发育有调节作用的化学物质，棉花顶芽不能合成该物质，C错误；
D、植物体各个部位都能合成乙烯，故棉花的幼芽和幼根可以合成乙烯，D正确。
故选D。
5、D
【解析】
1、基因突变可以发生在任何生物体内，基因重组只能发生在真核生物的有性生殖过程中，染色体变异只能发生在真核细胞中。
2、病毒只能寄生在活细胞中代谢和繁殖，人体一旦感染病毒，首先通过细胞免疫使病毒暴露，然后再利用体液免疫将病毒清除。
3、抗体主要存在血清中，在组织液和外分泌液中也有少量分布。
【详解】
A、流感病毒可以发生基因突变，不会发生基因重组和染色体变异，因为流感病毒没有有性生殖和染色体，A错误；
B、浆细胞不能特异性识别抗原，B错误；
C、甲型H7N9流感病毒初次侵入人体，刺激 B细胞增殖分化浆细胞和少数记忆细胞，其中记忆细胞在受到相同抗原刺激后才会迅速增殖分化，C错误；
D、抗体只能作用于细胞外的流感病毒，不能直接作用于细胞内的流感病毒，D正确。
故选D。
6、B
【解析】
据题干信息可知“GPNMB蛋白是一种由肝细胞产生的蛋白，能被Adam蛋白酶剪切后以出芽的形式释放到细胞外”即是由细胞内产生、分泌到细胞外起作用的，属于分泌蛋白，据此分析作答。
【详解】
A、GPNMB蛋白是分泌蛋白，形成过程需要内质网和高尔基体参与加工和运输，分泌方式为胞吐，A正确；
B、脂肪细胞无特有脂质合成基因，其他细胞也含有脂质合成基因，B错误；
CD、由题干信息“GPNMB蛋白……最终引起肥胖及胰岛素抵抗”可知GPNMB蛋白大量表达会诱导肥胖，增加脂肪组织重量，若用技术手段减少肝脏GPNMB蛋白基因的表达，可能会减轻肥胖并改善胰岛素抵抗的状况，C、D正确。
故选B。
解答此题需从题干中充分挖掘有效信息：GPNMB蛋白的本质及其作用机理。
7、D
【解析】
基因的自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的；在减数分裂的过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
【详解】
A、子一代F1是自交，不需要母本去雄，A错误；
B、F2中出现的4种表现型，有2种是不同于亲本表现型的新组合，B错误；
C、F1产生配子时非等位基因自由组合，产生的四种配子的比例是相等的，C错误；
D、F1产生的雌、雄配子各有4种，受精时雌雄配子随机结合，存在4×4=16种组合方式，D正确。
故选D。
8、C
【解析】
1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，属于无性生殖。
2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株.植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。植物体细胞杂交过程中无有性生殖细胞的结合，属于无性生殖。
【详解】
A、植物细胞工程应用之一是利用胚状体包囊人工胚乳和人工种皮制成人工种子，实现大规模生产，从而降低成本，A正确；
B、原生质体的融合原理是细胞膜的流动性，可以实现体细胞杂交，克服杂交不亲和，充分利用遗传资源，B正确；
C、茎尖等分裂旺盛部位无病毒感染，所以利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，通过基因工程将抗病毒基因转移至受体细胞从而培育出抗病毒的转基因植物，C错误；
D、愈伤组织具有分裂旺盛的优点，适于诱变育种的取材，能提高突变频率，D正确。
故选C。

二、非选择题
9、修饰 蛋白质工程 标记基因 复制原点 显微注射技术 染色体 （骨髓）瘤细胞 克隆化培养
【解析】
基因工程技术的基本步骤：
(1) 目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
(2) 基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4) 目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
（1）图中通过将目的基因导入缺陷细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可修饰和改变缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强，称为基因修饰；现有的鼠源抗体属于蛋白质分子，对其进行改造的技术称为蛋白质工程。
（2）一个完整的基因表达载体除了图中给出的结构：目的基因、启动子、终止子外，还应具有标记基因、复制原点。
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法，目的基因表达载体导入浆细胞常用方法是显微注射法。将目的基因插入到受体细胞的染色体DNA上，可使目的基因在受体细胞中稳定遗传。
（4）让浆细胞与骨髓瘤细胞进行杂交，并通过选择培养基以及克隆化培养和抗体检测，才能获得足够数量既能无限增殖又能产生嵌合抗体的细胞，称为杂交瘤B细胞，它产生的高度均一、仅针对某一特定抗原起作用的抗体称为单克隆抗体。
结合基因工程的操作步骤及单克隆抗体的制备过程分析题图和题干。
10、酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌无以核膜为界限的细胞核 酵母菌属于兼性厌氧型，醋酸菌属于需氧型 分解果肉中的果胶，使发酵液澄清，提高果肉利用率 促进酵母菌的有氧呼吸，增加酵母菌的数量 创造无氧环境，以便于酵母菌的无氧发酵产生酒精 下降
【解析】
1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，21℃左右，罪与酵母菌繁殖酒精发酵时，一般在一般将温度控制在12~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。实验表明，醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通人氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为31~35 C。
【详解】
（1）酵母菌是真核、兼性厌氧生物，醋酸菌是原核、需氧型生物，故从细胞结构角度分析，酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌无以核膜为界限的细胞核；从代谢的角度分析，酵母菌属于兼性厌氧型，醋酸菌属于需氧型。
（2）果胶酶能分解果肉中的果胶，使发酵液澄清，提高果肉利用率，因此为了达到上述目的需要向果浆中加入1．1～1．3%的果胶酶。
（3）在猕猴桃酒发酵的过程中需要对装置先通氧后密封，通氧的目的是促进酵母菌的有氧呼吸，让酵母菌在有氧的条件下快速繁殖，从而增加酵母菌的数量，通过密封创造无氧环境，以便于酵母菌的无氧发酵产生酒精。
（4）由分析可知，当向猕猴桃酒液中添加适量葡萄糖，此时醋酸菌会直接将葡萄糖分解成醋酸，同时醋酸菌对猕猴桃酒液中乙醇的利用率会下降，即利用酒精间接转化成乙酸的速率下降。
熟知酵母菌和醋酸菌的生理特性是解答本题的关键，掌握酒精发酵和醋酸发酵的操作要点是解答本题的另一关键！
11、平 胸腺嘧啶（T） DNA 连接酶 耐高温 变性 延伸 鉴别和筛选含目的基因的细胞 蔗糖
【解析】
1、基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。其中标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来，常用的标记基因是抗生素抗性基因。根据题干信息和图形分析，P0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可以用检测目的基因是否导入受体细胞；EcoRV酶为限制酶，其切割质粒后悔破坏了四环素抗性基因（tetr）。
2、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备；
②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链。
【详解】
（1）根据题意分析，EcoRV酶识别的序列是-GATATC-，并且两条链都在识别序列的碱基的中轴线T与A之间进行切割，因此其切出来的线性载体P1为平末端。
（2）据图分析，目的基因两侧为粘性末端，且漏出的碱基为A，则在载体P1的两端需要个加一个胸腺嘧啶碱基T形成具有粘性末端的载体P2，再用DNA连接酶将P2与目的基因连接起来形成重组质粒P3。由于在PCR扩增技术中采用高温使其变形解旋，因此需要使用的DNA聚合酶具有耐高温的特点。
（3）根据以上分析可知，PCR技术的标准步骤包括变性、退火、延伸。
（4）根据以上分析可知，重组质粒中抗生素抗性基因属于标记基因，其作用是鉴别和筛选含目的基因的细胞。根据题意可知，该目的基因是从cDNA文库中分离获取的蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体中，在个体水平上鉴定目的基因是否表达，可以在以蔗糖为唯一碳源的培养基中培养大肠杆菌，如果大肠杆菌细胞内目的基因表达出了蔗糖转运蛋白，该大肠杆菌能够进行正常的生长和繁殖，则说明目的基因完成了表达过程。
本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握限制酶的特点和切割后形成的末端类型，把握基因表达载体的构成过程和组成，识记标记基因的作用，掌握基因工程在中PCR扩增目的基因的过程和特点，理解目的基因的检测和鉴定方法，特别是能够根据题意把握在个体水平上的鉴定方法，这是该题考查的重点。
12、鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂 平板划线法和稀释涂布平板法 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 灭菌 3．6×18 黑色 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌
【解析】
培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。
常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
【详解】
（1）该培养基含有显色剂，根据用途划分，该培养基属于鉴别培养基。若要分离能分解尿素的细菌，培养基中需要以尿素作为唯一的氮源，故需要将蛋白胨换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成酚红指示剂，观察是否变红。
（3）培养大肠杆菌时，可以选择平板划线法和稀释涂布平板法进行接种。
（3）培养大肠杆菌时，在接种前可以将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生，来检测培养基是否被污染。对已使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
（4）每升原水样中大肠杆菌数为（33+36+37）÷3×14×13=3.6×18。
（3）由于代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色，故要检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为黑色的菌落进行计数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，故可以通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。
筛选尿素分解菌的原理：培养基中以尿素作为唯一氮源，只有能利用尿素的微生物才能生长。