2026届云南省文山马关实验高级中学生物高三第一学期期末学业质量监测模拟试题.doc

2026届云南省文山马关实验高级中学生物高三第一学期期末学业质量监测模拟试题
注意事项：
1． 答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。
2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。
3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。
4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1．下列实验材料或方法可以达到相应实验目的的是（ ）
A．用鸡血液中的红细胞提取细胞膜 B．用洋葱根尖分生区细胞观察染色体联会
C．用黑光灯诱捕法调查群落丰富度 D．用标志重捕法调查水西沟镇的臭鼬数量
2．如图为真核细胞内发生的某生理过程，下列相关叙述正确的是（ ）

A．②的碱基总数与其模板链上碱基总数一致
B．图示为翻译，核糖体在②上从右向左移动
C．随核糖体移动①将读取mRNA上的密码子
D．该过程中既有氢键的形成，也有氢键的断裂
3．细胞毒素可有效杀伤肿瘤细胞，但没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造 成伤害。下图是特异性杀死肿瘤细胞的过程，图中抗体是利用单克隆抗体技术制备的。下列 叙述正确的是（ ）

A．单克隆抗体制备过程中需要使用 Taq 酶
B．抗体与细胞毒素结合增加了细胞毒素的杀伤力
C．细胞毒素具有与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的能力
D．溶酶体破裂导致其中的蛋白酶及其它水解酶释放，加速了肿瘤细胞凋亡
4．关于种群的空间特征的描述正确的是（ ）
A．以种子繁殖的植物在自然散布于新的地区时经常体现为均匀分布
B．农田、人工林等地区的人工栽培种群由于人为因素常呈随机分布
C．集群分布不利于个体之间的基因交流，降低了种群的遗传多样性
D．环境资源分布不均匀、丰富与贫乏镶嵌是集群分布形成原因之一
5．下图为甲、乙两种单基因遗传病的遗传家系图，其中一种遗传病为伴性遗传。人群中乙病的发病率为1/256。下列叙述正确的是（ ）

A．图中甲病为伴X染色体显性，而乙病为常染色体显性
B．Ⅱ3和Ⅲ6的基因型不同，III3的出现是交叉互换的结果
C．若Ⅲ1与某正常男性结婚，则子代患乙病的概率为1/51
D．若Ⅲ3和Ⅲ4再生一个孩子，同时患两种病的概率为1/6
6．对现代进化理论的理解，错误的是（ ）
A．能遗传的变异是生物进化的基础
B．环境改变使生物产生适应性的变异
C．突变与基因重组产生的变异是不定向的
D．变异经过长期的自然选择和积累就可能产生出生物的新类型
7．细胞是生物结构和功能的基本单位，下列相关叙述错误的是（ ）
A．细胞骨架与细胞的物质运输、能量转换和信息传递等有关
B．镰刀型红细胞血红蛋白的结构发生改变，细胞容易破裂
C．人体内细胞之间的黏着性与细胞膜上的糖蛋白有关
D．能合成固醇类激素的内分泌细胞，内质网一般不发达
8．（10分）下列有关变异及进化的叙述，正确的是（ ）
A．单倍体育种时，常用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，目的是诱导染色体变异
B．基因突变导致产生核苷酸序列不同的基因，仍可表达出相同的蛋白质
C．不同基因型的猕猴个体对环境的适应性一定不同
D．生物变异与进化的方向是由自然选择决定的
二、非选择题
9．（10分）研究人员对某牧场进行了相关调查研究：
（1）调查中发现该牧场生长着披碱草、针茅、黑麦等多种牧草，所有这些牧草_____（填能”或“不能”）构成一个生物群落，判断理由是_____。
（2）如图为该牧场的长爪沙鼠数量调查结果

①其种群数量变化趋势是_______，理由是_____________________________________ 。
②为防治鼠害，通过引入鼠的天敌来降低该鼠群的K值。从能量流动的角度分析，该措施的实践意义是 __________________________________________________ 。
（3）某同学认为也可以用样方法调查该牧场的物种丰富度，思路是____________________。
10．（14分）血浆中的部分成分经过肾小球的滤过作用（形成原尿）和肾小管的重吸收作用后最终成为尿液，图示血糖浓度与单位时间血糖的滤过量和肾小管重吸收葡萄糖量的关系，回答下列问题：

（1）健康人血糖值能维持在图示中N点左右，这主要是______________激素的调节作用所致。
（2）据图，肾小管重吸收葡萄糖的速率最大约为______________mg/min，限制该最大值的因素是______________。
（3）血糖浓度超过T点后，尿液中开始出现葡萄糖，据图分析其原因是___________。
（4）肾小管还能通过______________运输对水分子进行重吸收。与健康人相比，糖尿病人肾小管对水的重吸收更______________，从而排尿较多。
11．（14分）已知某种小鼠的体色由复等位基因A1、A2、A3控制，A1控制灰色，A2控制黑色，A3控制黄色，基因B控制色素的形成，基因型bb的小鼠为白色。科研工作者通过转基因技术将基因M定向插入到基因B或b所在的染色体上，并培育出均含有一个基因M的小鼠品系：灰色①、黑色②、黄色③，M基因纯合致死。每个小鼠品系中雌雄个体各有若干只，且基因型相同。已知上述基因均位于常染色体上，染色体结构缺失个体正常存活。对这三个品系小鼠进行了两组杂交实验，结果如下：
实验一： 实验二：

（1）由杂交实验一、二可知，基因A1、A2、A3的显隐性关系是______________。杂交亲本①②③的基因型依次为_____________________。
（2）通过上述实验推断，在品系①②③中基因M与基因___________（填“B”或“b”）位于同一条染色体上。
（3）仅根据上述实验不能确定基因B、b与基因A1、A2、A3之间遵循基因自由组合定律，请说明理由___________。进一步研究确定基因B、b与基因A1、A2、A3位于非同源染色体上，若让实验一F1中的多只灰色鼠相互交配，子代表现型及比例为____________________。
（4）在多次进行实验二的过程中，F1代偶然出现了一只黄色雄鼠。为探明其产生机理，科研工作者进行了如下操作：提取该鼠性腺中处于联会期细胞，用六种颜色的特殊荧光分子分别对细胞中可能存在的基因M、B、b、A1、A2、A3进行特异性染色，然后将未被相应基因结合的荧光分子洗脱，在显微镜下检测基因的着色情况，每个被染上颜色的基因都会出现一个光点。请分析下列变异类型会出现的光点的颜色和数量。
①若该黄色雄鼠是由于环境因素导致而遗传物质没有发生变化，则一个细胞中可能出现5种颜色10个光点或___________。
②若该黄色雄鼠是由于某个基因突变产生的，则一个细胞中出现___________。
③若该黄色雄鼠是由于某条染色体结构缺失导致的，则一个细胞中出现___________。
12．人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，肝硬化、肝癌多从乙肝发展而来。接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法。下图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程。质粒中lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色。

（1）过程①需要用到限制酶和_____________酶。根据质粒和目的基因所在DNA上酶切位点的分布情况，如果过程①用一种限制酶应选_____________，如果用两种限制酶应选_____________。
（2）在该项目中青霉素抗性基因作为_____________基因；目的基因的具体功能是_____________。
（3）在培养大肠杆菌的通用培养基中还应额外加入青霉素和X-gal，培养一段时间挑选出_____________（蓝色/白色）的菌落进一步培养获得大量目的菌。
（4）血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗，具有一定的感染风险。用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因：__________________________。
参考答案

一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1、D
【解析】
哺乳动物成熟的红细胞没有细胞器膜和核膜，常用来作为提取纯净细胞膜的实验材料。群落的丰富度是指群落中物种数目的多少。
【详解】
A、鸡的红细胞中含有细胞膜、细胞器膜和核膜，用鸡血液中的红细胞不能提取到纯净的细胞膜，可用哺乳动物的红细胞来提取细胞膜，A错误；
B、联会发生在减数第一次分裂前期，而洋葱根尖分生区细胞进行的是有丝分裂，染色体不会出现联会，B错误；
C、用黑光灯诱捕法只能调查某些有趋光性的昆虫的数量，不能调查没有趋光性的生物数量，故不能用其调查群落的丰富度，C错误；
D、标志重捕法可用于调查活动能力强、活动范围广的生物的种群密度，故可用标志重捕法调查水西沟镇的臭鼬数量，D正确。
故选D。
2、D
【解析】
分析图示可知，此过程为翻译，发生在核糖体上，①为tRNA，②为mRNA。
【详解】
A、②为mRNA，在真核细胞内基因上存在非编码区和内含子等非编码序列，所以②的碱基总数比模板链上碱基总数少，A错误；
B、图示为翻译过程，该过程中核糖体从左向右移动，B错误；
C、翻译过程中核糖体沿着mRNA移动，核糖体读取密码子，C错误；
D、该过程中有密码子与反密码子之间的互补配对和tRNA与mRNA的分离，因此有氢键的形成和断裂，D正确。
故选D。
本题结合核糖体合成蛋白质的过程图，考查遗传信息的翻译过程，要求考生熟记翻译的相关知识点，准确判断图中各种数字的名称，并能准确判断核糖体的移动方向。
3、D
【解析】
据图分析，抗体上带有细胞毒素，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。
【详解】
A、单克隆抗体制备过程中不需要使用 Taq 酶，A错误；
B、抗体与细胞毒素结合增加了细胞毒素的定向性，细胞毒素的杀伤力并未改变，B错误；
C、细胞毒素杀伤肿瘤细胞没有特异性，能与肿瘤细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合的是抗体，C错误；
D、溶酶体破裂使其中的蛋白酶等多种水解酶释放出来，破坏细胞结构，加速肿瘤细胞凋亡，D正确。
故选D。
4、D
【解析】
组成种群的个体在其生活空间中的位置状态或空间布局叫做种群的空间特征或分布型。种群的空间分布一般可概括为三种基本类型：随机分布、均匀分布和集群分布。
【详解】
A、以种子繁殖的植物在自然散布于新的地区时经常体现为随机分布，A错误；
B、农田、人工林等地区的人工栽培种群由于人为因素常呈均匀分布，B错误；
C、集群分布有利于增加个体之间的基因交流，丰富种群的遗传多样性，C错误；
D、环境资源分布不均匀、丰富与贫乏镶嵌是集群分布形成原因之一，D正确。
故选D。
5、C
【解析】
1、根据Ⅱ2和Ⅱ3不患乙病，但Ⅲ3为患乙病的女性可知，乙病为常染色体隐性遗传病，设相关的基因为A/a，根据其中一种遗传病为伴性遗传可知，甲病为伴性遗传病，图中存在甲病女患者，故为伴X遗传病，又因为Ⅲ3患甲病，而Ⅳ1正常，故可以确定甲病不属于伴X隐性遗传，应为伴X显性遗传病，设相关的基因为B/b。
2、根据人群中乙病的发病率为1/256，可知a基因频率为1/16，A基因频率为15/16，则AA=15/16×15/16=225/256，Aa=2×1/16×15/16=30/256。
【详解】
A、根据分析可知，图中甲病为伴X染色体显性遗传，而乙病为常染色体隐性遗传，A错误；
B、Ⅲ3患甲病和乙病，基因型为aaXBXb，Ⅱ3的基因型为AaXbXb，Ⅱ4患乙病，其基因型为aaXbY，则Ⅲ6为AaXbXb，Ⅱ3和Ⅲ6的基因型相同，III3的出现是亲本减数分裂产生配子时非等位基因自由组合的结果，B错误；
C、Ⅱ2和Ⅱ3的基因型分别为AaXBY、AaXbXb，则Ⅲ1为1/3AAXBXb或2/3AaXBXb，正常男性关于乙病的基因型为AA或Aa，根据上述分析可知，其中Aa的概率为30/256÷（30/256+225/256）=2/17，二者婚配的后代患乙病的概率为2/3×2/17×1/4=1/51，C正确；
D、Ⅲ3的基因型为aaXBXb，Ⅲ4甲病的基因型为XbY，乙病相关的基因型为Aa的概率为30/256÷（30/256+225/256）=2/17，为AA的概率为1-2/17=15/17，后代患乙病的概率为2/17×1/2=1/17，患甲病的概率为1/2，所以二者再生一个孩子同时患两种病的概率为1/17×1/2=1/34，D错误。
故选C。
6、B
【解析】
现代生物进化理论的基本观点：种群是生物进化的基本单位；生物进化的实质在于种群基因频率的改变；突变和基因重组、自然选择及隔离是物种形成过程的三个基本环节。通过它们的综合作用，种群产生分化，最终导致新物种的形成。其中突变和基因重组产生生物进化的原材料，自然选择使种群的基因频率发生定向的改变并决定生物进化的方向，隔离是新物种形成的必要条件。
【详解】
A、可遗传的变异能为生物进化提供原始材料，所以遗传和变异是自然选择发生作用的基础，A正确；
B、变异是不定向的，在环境变化之前就存在，环境只是对生物的变异起到了选择的作用，B错误；
C、突变与基因重组产生的变异是不定向的，而自然选择是定向的，因此自然选择能决定生物进化的方向，C正确；
D、变异经过长期的自然选择和积累，就会导致生物间基因库的差异增大，当生物之间形成生殖隔离时，就产生了新物种，D正确。
故选B。
本题考查现代生物进化理论的主要内容，要求考生识记现代生物进化理论的主要内容，能结合所学的知识准确判断各选项。
7、D
【解析】
1、细胞骨架是真核细胞中维持细胞形态、保持细胞内部结构有序性的网架结构，细胞骨架由蛋白质纤维组成。
2、糖蛋白位于细胞膜的外侧，有识别、保护、润滑等作用。
3、内质网是细胞内由单层膜构成的网状物，能够增大细胞内的膜面积，与蛋白质的合成与加工有关，是脂质合成的车间。
【详解】
A、由蛋白质纤维组成的细胞骨架，与细胞物质运输、能量转换、信息传递等有关，A正确；
B、镰刀型红细胞血红蛋白的结构发生改变，细胞呈镰刀型，容易破裂，B正确；
C、细胞膜的外表的糖蛋白对于动物起保护润滑的作用，动物细胞间的粘着性也和其有关，C正确；
D、脂质的合成车间在内质网，固醇类激素的化学本质是脂质，因此能合成固醇类激素的内分泌细胞，内质网一般发达，D错误。
故选D。
8、B
【解析】
生物的变异分为可遗传变异和不遗传变异，可遗传变异的来源有基因突变、基因重组和染色体畸变，其中染色体畸变，在显微镜下可见。可遗传变异是进化的原材料，进化的实质是基因频率的改变，变异具有不定向性，自然选择决定净化的方向。
【详解】
A、与正常植株相比，单倍体植株长得弱小，而且高度不育，故单倍体育种时，常用秋水仙素处理的对象是幼苗，A错误；
B、由于密码子的简并性等原因，基因突变导致产生核苷酸序列不同的基因，仍可表达出相同的蛋白质，B正确；
C、不同基因型的猕猴个体对环境的适应性可能不同，C错误；
D、变异是不定向的，自然选择决定生物进化的方向，D错误。
故选B。

二、非选择题
9、不能 生物群落应包含该区域的全部生物 逐渐增加 处于幼年的个体数量较多，处于老年期的个体数量较少（或“种群的年龄组成为增长型”） 合理调整生态系统能量流动的关系，使能量更多的流向对人有益的部分 随机选取若干个样方，计数每个样方内的物种数，最后统计所有样方的物种数作为该牧场的物种丰富度
【解析】
样方法的注意点：①随机取样；②样方大小适中；③样方数量不易太少；④一般选易辨别的双子叶植物（叶脉一般网状）；⑤常用五点取样法和等距取样法。
【详解】
（1）所有这些牧草不能构成一个生物群落，因为生物群落应包含该区域的全部生物，包括动物、植物和微生物。
（2）①据图分析，牧场的长爪沙鼠种群中处于幼年的个体数量较多，处于老年期的个体数量较少，种群的年龄组成为增长型，则种群数量逐渐增加。
②为防治鼠害，通过引入鼠的天敌来降低该鼠群的K值。从能量流动的角度分析，该措施的实践意义是：合理的调整生态系统的能量流动关系，使能量更多的流向对人类有益的部分。
（3）用样方法调查该草原的物种丰富度时，应在被调查的范围内，随机选取若干个样方，计数每个样方内的物种数，最后统计所有样方的物种数，作为该草原的物种丰富度。
本题考查了种群密度调查的相关知识，要求考生能够识记两种方法在不同生物中调查过程中的运用；识记样方法调查过程中的相关注意点，如取样随机、样本数量足够大等；理解群落的概念，了解种群年龄结构与种群数量之间的关系。
10、胰岛素和胰高血糖素 300 肾小管细胞膜上葡萄糖载体蛋白的数量 血糖的重吸收速率达不到血糖滤过速率，原尿中未重吸收的葡萄糖成为尿液中的葡萄糖 被动 少（弱）
【解析】
1、血糖调节过程：当血糖浓度升高时，胰岛素分泌量增加，促进组织细胞加速摄取、储存和利用葡萄糖，使血糖含量降低；当血糖含量降低时，胰高血糖素分泌量增加，加速肝糖原分解、非糖物质转化为葡萄糖，使血糖含量上升，这两种激素相互拮抗，维持血糖浓度的稳定。
2、分析题图：肾小球滤过葡萄糖的速率随着血糖浓度的升高而上升。当原尿流经肾小管的时候，肾小管细胞对其中的葡萄糖有重吸收作用，血糖浓度达到一定值，超过肾小管的重吸收能力，才会出现尿糖。当血糖浓度超过13mg/100ml后，肾小管对原尿中葡萄糖吸收速率不再增加，原因是肾小管细胞膜上吸收葡萄糖的载体数量是有限的。
【详解】
（1）胰岛素具有降低血糖的作用，胰高血糖素具有升高血糖的作用，健康人血糖值能维持在图示中N点左右，主要是胰岛素和胰高血糖素的调节作用所致。
（2）由图可知，肾小管重吸收葡萄糖的速率最大约为300mg/min，限制该最大值的因素是肾小管细胞膜上葡萄糖载体蛋白的数量。
（3）血糖浓度超过T点后，肾小球滤过葡萄糖的速率大于肾小管重吸收葡萄糖的速率，使原尿中未重吸收的葡萄糖成为尿液中的葡萄糖，所以尿液中开始出现葡萄糖。
（4）肾小管上皮细胞上含有水通道蛋白，水分子通过通道蛋白的运输为被动运输。由于糖尿病患者的原尿中葡萄糖浓度较高，渗透压较大，使肾小管重吸收水分减少，所以与健康人相比，糖尿病人肾小管对水的重吸收更弱，从而排尿较多。
本题借助于曲线图考查血糖调节的相关知识，意在考查考生的审图能力，识记和理解能力，难度适中。
11、A1A1BbM、A2A2BbM、A3A3BbM A1对A2为显性；A2对A3为显性 B 因为无论基因B、b与基因A1、A2、A3之间是否位于一对同源染色体上，上述杂交的结果都相同， 灰色∶黑色∶白色=6∶2∶4 3种颜色8个光点 4种颜色10个光点 4种颜色8个光点
【解析】
基因分离定律的实质是位于同源染色体的等位基因随着同源染色体的分开和分离。
基因自由组合定律的实质是位于非同源染色体上的非等位基因的自由组合。
基因分离定律是基因自由组合定律的基础。
【详解】
（1）由题意可知，灰色①的基因型为A1A1BbM、黑色②的基因型为A2A2BbM、黄色③的基因型为A3A3BbM其中B和M连锁，且M基因纯合致死，由杂交实验一、二可知，基因A1、A2、A3的显隐性关系是A1对A2为显性；A2对A3为显性。
（2）若基因M与基因b在同一条染色体上，则在上述杂交结果中不会出现白色个体，因此在品系①②③中基因M与基因B位于同一条染色体上，。
（3）因为无论基因B、b与基因A1、A2、A3之间是否位于一对同源染色体上，上述杂交的结果都相同，所以仅根据上述实验不能确定基因B、b与基因A1、A2、A3之间遵循基因自由组合定律。现已知基因B、b与基因A1、A2、A3位于非同源染色体上，根据上述分析可知实验一F1中的多只灰色鼠的基因型为A1A2BbM，若然这些灰色鼠相互交配，则子代的基因型为（1灰色A1A1、2灰色A1A2、1黑色A2A2）×（2有色BbM，1白色bb），则表现型及比例为6灰色∶2黑色∶4白色。
（4）在多次进行实验二的过程中，根据之前的分析可知，实验二中F1的基因型为A2A3BbM（黑色）和A2A3bb（白色），若进行不同颜色的荧光标记则它们细胞中荧光标记的种类数依次为5和3，由于观察染色体的时间为联会时，故细胞中含有荧光点的数目依次为10和8；若F1代偶然出现的黄色雄鼠是由于某个基因突变产生的，则发生突变的只能是由A2A3BbM突变为A3A3BbM，则荧光点的种类数变为4中数目为10；若F1代偶然出现的黄色雄鼠是由于某条染色体结构缺失导致的，则只能是含A2的染色体发生了缺失，即由A2A3BbM突变为A3BbM，则荧光点的种类数变为4中数目为8，据此分析如下：
①若一个细胞中可能出现5种颜色10个光点或3种颜色8个光点，则该黄色雄鼠是由于环境因素导致而遗传物质没有发生变化。
②若一个细胞中出现4种颜色10个光点，则该黄色雄鼠是由于某个基因突变产生的。
③若一个细胞中出现4种颜色8个光点。则该黄色雄鼠是由于某条染色体结构缺失导致的。
认真读题和提取信息能力是解答本题的必备能力，综合分析能力是解答本题的关键！
12、DNA连接 BamHI BamHI和EcoRI 标记 控制病毒蛋白外壳的合成 白色 该疫苗不含遗传物质，不会出现病毒感染和增殖
【解析】
基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
图中表示的是通过基因工程获得疫苗和产生相应抗体的过程图，过程①表示基因表达载体的构建，过程②表示将目的基因导入受体细胞，过程③表示目的基因的表达。
【详解】
（1）过程①表示基因表达载体的构建，需要用到限制酶和DNA连接酶。根据质粒和目的基因所在DNA上酶切位点的分布情况，有两种选择限制酶的方案，只选择BamHⅠ既能将目的基因切下，也能切割质粒，在获取目的基因和切割质粒时，使目的基因和质粒两端产生相同的黏性末端，而在连接酶作用会出现自身环化、目的基因自身与自身连接、质粒自身与自身连接、目的基因与质粒连接多种情况，需要筛选；用两种限制酶切割，质粒和目的基因两端不会形成相同黏性末端，在连接酶作用下不会发生环化还可以防止反向连接，最终在连接酶作用下只会出现目的基因与质粒成功重组和没有进行重组的质粒，如果过程①用一种限制酶则应选BamHI，如果用两种限制酶应选BamHI和EcoRI。
（2）在该项目中青霉素抗性基因作为标记基因，便于筛选鉴定；根据图中④目的基因最终产生乙肝病毒外壳进行接种，说明该目的基因具体功能是控制病毒蛋白外壳的合成。
（3）在培养大肠杆菌的通用培养基中还应额外加入青霉素和X-gal，根据题干信息“选用质粒中lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X-gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色”可知，由于构建基因表达载体时，将质粒的lacZ基因破坏，故导入重组质粒的大肠杆菌不能利用培养基的物质X-gal，从而菌落成无色，培养一段时间挑选出白色的菌落进一步培养即可获得大量目的菌。
（4）血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速离心提纯血液中的乙肝病毒，之后再灭活，制成乙肝疫苗，灭活的乙肝病毒中含遗传物质，具有一定的感染风险，而用基因工程疫苗接种比血源性疫苗更安全，主要是因为图示的基因工程疫苗中不含遗传物质，不会出现病毒感染和增殖。
本题主要考察学生对于基因工程的理解应用，对于抗原本质的认识，解题关键在于对一种限制酶切割后再连接所出现情况的推理，能够理解限制酶切割后产生末端的特点。